LC-MS/MS法测定克拉霉素血浓度及药动学

目的建立测定人血浆中克拉霉素的LC-MS／MS法，研究市售克拉霉素胶囊在人体的药动学特点。方法以罗红霉素为内标，取血浆样品0．3mL经蛋白沉淀后，以甲醇-水（1％甲酸溶液）-乙腈=（80：10：10）为流动相，用C18柱分离，采用电喷雾离子源，正离子方式检测，扫描方式为多反应检测（MRM）。结果克拉霉素线性范围为10～2500μg·L^-1，日内、日间RSD均〈3．5％。应用此法研究18名健康受试者单剂量口服250mg克拉霉素市售胶囊的药动学参数tmax、ρmax、t1/2、AUC0→t和AUC0→∞，其值分别为（1．95±0．71）h、（949±399）μg·L^-1、（4．79±0．84）h、（5600±1753）μg·h·L^-1、（5766±1776）μg·h·L^-1。结论该法用于人体药动学的研究具有专属、快速、灵敏等特点。     

胰激肽释放酶的分离纯化

探讨了利用离子交换纤维素(DEAE-cellulose)从分离弹性酶后的母液中吸附分离胰激肽释放酶的较优化工艺。平均得量1.832 g/kg 胰脏,比活12.34 u/mg,回收率为65.4%。它还能提高粗品胰激肽释放酶的比活,回收率为81.0%。     

用高效液相色谱-质谱-质谱法测定小鼠血浆和大脑中的石杉碱甲及药动学

目的建立小鼠血浆和大脑中石杉碱甲的液质联用测定法,测定灌胃给药后小鼠血浆和大脑中石杉碱甲浓度的动态变化以及药动学参数。方法小鼠血浆及大脑样品经液液萃取,用高效液相色谱-质谱-质谱(LC-MS-MS)联用法检测。色谱柱:PHENOMENEX C18柱,100mm×2mm,5micron;流动相为甲醇∶水(1%甲酸溶液)=60∶40;用于定量的离子为m/z243→154(石杉碱甲)和m/z278→203(内标:克仑特罗)。结果所建立的血浆的方法线性范围为1~1 000ng/mL,脑的方法线性范围为1~1 000ng/mL,它们最低检测限为1ng/mL,(r=0.999 0),RSD<7%,可以检测小鼠灌胃后石杉碱甲在血和脑中的浓度;血浆石杉碱甲浓度-时间变化可用一室模型拟合,主要药动学参数分别为Tmax=6min,Cmax=281ng/mL,AUC(0→tn)=35 266ng.L-1.min-1,AUC(0→∞)=38 056ng.L-1.min-1,t1/2=99min;在大脑中的药物浓度-时间变化用非房室模型拟合,主要药动学参数分别为Tmax=60min,Cmax=224ng/mL,AUC(0→tn)=44 344ng.L-1.min-1,AUC(0→∞)=58 571ng.L-1.min-1。结论该方法灵敏度高,简便快速,可用于药代动力学及相关研究;石杉碱甲在小鼠大脑中的消除速度比血浆缓慢。     

动物活体自动采样技术的应用和评价

介绍在动物实验中一种先进的生物样品自动采集与处理系统,该系统结合液相色谱/质谱/质谱(LC/MS/MS)分析方法,可以为临床前药动学研究、药效学研究和安全性评价提供可靠的实验数据。利用该系统能够在清醒的、自由活动的实验大鼠、小鼠等啮齿类动物及灵长类动物完成生物样品的定时自动采集,并进行即时处理。不但节约人力,且大大提高了对少量低浓度生物样品的实验数据准确性;与此同时,还能实时监测实验动物的其他生理参数,从而可减少所用动物数量,改善动物的舒适性。若能把自动生物样品采集技术和现代先进的LC/MS/MS分析方法合并使用,则可显著提高临床前研究的速度和质量,以满足高通量药物筛选的要求。自动采样系统被我们用于大鼠口服卡马西平的药动学实验,结果证实它确实是临床前药动学、药效学研究及安全性评价的有效工具。     

胰岛素自控给药系统新进展

<正> 目前,世界上有很多的糖尿病患者在使用胰岛素注射剂来治疗糖尿病引起的高血糖症。但要始终维持合适的血糖浓度,防止糖尿病引起的后遗症,靠每天常规注射胰岛素是难以达到的,而且给患者带来许多不便。因此,众多研究者正致力于研究能以类似     

跨国药企研发模式及发展趋势

制药业是研发投入占其销售总额比例最高的行业。通过透视目前全球新药研发现状与跨国医药企业研发的总体特征,对运行模式进行较为深入的分析探讨,将其归纳成7种研发模式：独立研发、专利授权、投资及收购、双方联合研发、项目外包、多方合伙利益分享风险分担及风险投资、外包企业与跨国药企知识产权的合作方式,分析其特点并分别提出具体的案例。指出了跨国药企日后的发展趋势：精简研发部门、建立小而灵的药物研发执行单元、扩大向公司外部寻求创新支持、加大研发外包等,分析了全球化对我国制药业的影响,进而提出我国医药产业全球化竞争和实施国际化的应对策略。     

MS275协同BI2536抗人肺癌A549细胞增效作用的研究

研究组蛋白脱乙酰酶抑制剂MS275与polo样激酶1抑制剂BI2536联合作用对人非小细胞肺癌细胞株A549细胞的增效作用及其作用机制。采用CCK-8法检测MS275和BI2536单用或联用时对A549细胞增殖的影响,结果显示细胞增殖抑制率在两药联合作用后比单独用药作用显著增强;使用流式细胞仪检测细胞周期,表明联合用药时细胞被大量阻断在G2/M期。应用蛋白质免疫印迹法(western blot)检测蛋白激酶AKT和半胱氨酸蛋白水解酶caspase-3蛋白表达水平,显示细胞内激活的caspase-3切割片段增多,磷酸化蛋白激酶AKT表达量下调。研究结果提示,MS275协同BI2536阻断细胞周期,抑制A549细胞增殖,其作用机制应是通过上调caspase-3的活性,抑制蛋白激酶AKT磷酸化,影响PI3K/AKT通路来完成的。这两种药物的联合应用可能成为人非小细胞肺癌治疗中的新方案。     

血管紧张素转化酶抑制剂

肾素-血管紧张素系统(RAS)在高血压的发生、发展中起着重要作用,其中血管紧张素转化酶(ACE)是该系统的关键酶.根据ACE活性部位的化学结构而设计出一些ACE抑制剂,如卡托普利(Captopril,SQ 14225)就是一种高效的抗高血压药物.血管紧张素转化酶ACE(EC.3.4.15.1)是RAS中一种关键     

临床溶栓药UK与SK生化、药理和临床应用比较

<正> 在饮食和生活水准日益提高的今天,由于饮食习惯,缺少锻炼以及体内代谢失调等,使得血栓症的发生率也在不断提高,以脑血管、冠脉为主的多种疾病已成为     

利用CMC与Sephadex G50纯化胰岛素

利用CMC离子交换层析结合Sephadex G50层析建立了(1)CMC—G50,(2)G50—CMC-G25纯化胰岛素的工艺路线。胰岛素在CMC和Sephadex G50柱上的回收率分别为88.4%和85.9%。通过此工艺,纯化倍数可达22～28倍,胰岛素电泳效价大于26u/mg。