柿蒂药材的高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立柿蒂高效液相色谱指纹图谱的分析方法.方法 采用HPLC法,色谱柱:Agela venusil MPC18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.5%(体积分数)醋酸,梯度洗脱;流速:0.8 mL/min;柱温:20℃;进样量:20 μL;检测波长:264 nm.结果 对所采集的10批柿蒂药材...     

基于网络药理学和实验验证探讨石榴皮对非酒精性脂肪性肝炎的作用机制

目的 基于网络药理学和细胞实验验证的方法探讨石榴皮改善非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)作用机制。方法 利用中药系统药理学数据库(TCMSP)进行条件检索,获取石榴皮的活性成分及其对应的作用靶点。利用人类基因数据库(GeneCards)等5个数据库获取NASH相关的靶点。将获得的石榴皮和NASH靶点进行筛选,通过韦恩图得到共同靶点。使用蛋白相互作用数据库(STRING)构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,并用Cytoscape 3.7.1建立“石榴皮-成分-靶点-NASH”网络。利用Metascape软件进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析。最后借助人肝癌细胞HepG2观察石榴皮中主要活性成分对NASH的影响。结果 石榴皮活性成分有7个,获得靶点基因191个,NASH靶点1 818个,两者交集靶点98个,拓扑学分析显示,石榴皮治疗NASH的核心成分为槲皮素、山奈酚和木犀草素,核心靶点为蛋白激酶B (protein kinase B,Akt1)、白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等。KEGG通路分析结果显示石榴皮治疗NASH主要涉及磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/Akt、核因子κB (nuclear factor kappa-B,NF-κB)等信号通路。体外细胞试验结果显示,与对照组相比,模型组磷酸化蛋白激酶B (phosphorylated-Akt^Thr308,p-Akt^Thr308)、IL-6等蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,石榴皮活性成分可显著降低p-Akt^Thr308、IL-6等蛋白的表达水平(P<0.05),也能够降低IL-6、TNF-α基因的mRNA表达水平(P<0.05)。结论 石榴皮可通过多成分、多靶点、多通路发挥抗NASH的作用,其机制可能与石榴皮中活性成分槲皮素、山奈酚和木犀草素影响Akt1等核心靶点及调控PI3K/Akt、NF-κB等信号通路,进而抑制相关炎症因子表达有关。     

羽扇豆醇抑制人肝癌Huh-7细胞增殖机制研究

摘 要 目的：研究羽扇豆醇（lupeol）对人肝癌Huh-7细胞增殖的影响。方法: 运用CCK-8法检测lupeol（10~150 μmol·L^-1）对T24细胞活力的影响;运用caspase抑制剂确证凋亡相关蛋白caspase是否与lupeol对细胞增殖抑制作用有关;运用western blot检测lupeol对c-Jun蛋白表达的影响;运用real time PCR评价lupeol对miR-21、MMP-2、MMP-9基因mRNA表达的影响;运用pGL3 Basic荧光素酶报告系统研究lupeol对MMP-9启动子活性的影响。结果: Lupeol在72 h能够抑制Huh-7细胞增殖,该抑制作用具有剂量依赖性;lupeol处理细胞72 h后半抑制浓度（IC50）为80 μmol·L^-1;与对照组相比,运用lupeol能够使Huh-7细胞中c-Jun蛋白表达下调;lupeol能够降低miR-21表达水平;与对照组相比,lupeol处理Huh-7细胞降低MMP-9的mRNA表达,并使MMP-9基因启动子活性下调40%;以上结果与对照组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。结论: Lupeol能够抑制人肝癌Huh-7细胞增殖,该作用与抑制miR-21/c-Jun/MMP-9信号通路有关。     

羽扇豆醇对人高转移肝癌HCCLM3增殖影响的机制研究

摘 要 目的： 研究羽扇豆醇（Lupeol）在人高转移肝癌细胞系HCCLM3中的抗增殖作用机制。方法: 运用CCK 8法检测不同浓度Lupeol在12-48 h对HCCLM3细胞活力的影响及相关Caspase参与Lupeol（20～100 μmol·L^-1）诱导的细胞凋亡类型;运用Realtime PCR评价Lupeol对细胞内Caspase家族及Bcl 2相关基因的mRNA表达的影响;同时运用流式细胞术检测Lupeol对细胞周期分布的影响。结果:Lupeol在24～48 h能够抑制HCCLM3的细胞增殖,并呈现浓度依赖性,在24 h处理细胞的IC₅₀为93 μmol·L^-1;运用60～100 μmol·L^-1的Lupeol能够使HCCLM3细胞在G2/M期细胞数增加1倍;Lupeol能够活化Caspase通路,与对照组相比Lupeol处理后细胞内Caspase 3的mRNA表达量增加50%～150%,同时100 μmol·L^-1的Lupeol处理细胞后使胞内p53及Bax的mRNA表达量分别上调1倍以上,并显著降低Bcl 2及PARP的mRNA水平(P<0.05或P<0.01)。结论: Lupeol具有抑制肝癌细胞增殖能力,对肝癌预防及治疗可能具有一定的协同作用。     

鞣花鞣质肠道代谢产物urolithins研究进展

鞣花鞣质是一类具有诸多生物活性的酚类化合物,近年来研究发现其发挥作用的物质基础与其肠道菌群代谢产物——尿石素密切相关。该研究就近几年国内外关于尿石素的结构特征、类型、分布,以及其改善前列腺、乳腺、结肠相关疾病,抗癌、抗氧化、抗炎等生物活性研究进行了综述,为开发和利用尿石素奠定基础。     

柿蒂总鞣质的抗氧化活性研究

目的研究柿蒂总鞣质提取物的抗氧化活性。方法从柿蒂总鞣质提取物清除羟基自由基（·OH）、超氧离子自由基（O2·-）,抑制脂质体过氧化活性及还原力等方面进行研究。结果柿蒂总鞣质具有较强的还原力,对·OH的清除能力较强,对O2·-的清除能力较弱,能显著性抑制脂质过氧化。结论柿蒂总鞣质是一种抗氧化功能较好的活性物质,具有良好的开发前景。     

预知子化学成分、抗消化系统肿瘤药理作用及其药对临床应用研究进展

预知子(Akebiae Fructus)是武当特色中药,具有抗炎、抗菌、抗肿瘤、抗抑郁等多种药理作用。主要含有三萜皂苷类、绿原酸类等化学成分,在临床使用中多以复方的形式治疗肝癌、胃癌、乳腺癌、前列腺癌等多种肿瘤,尤其是对于消化系统肿瘤,具有很高的使用价值。结合国内外文献对预知子的化学成分、抗消化道肿瘤的药理作用及相关机制、在临床上常用的药对配伍组合进行了归纳总结,以期对明确预知子发挥药理作用的有效成分提供一定参考。对抗消化道肿瘤药理及作用机制的归纳总结,有望对今后预知子抗消化道肿瘤作用机制的深入研究起到一定帮助作用。预知子在临床上常以复方的形式发挥治疗作用,而药对为复方的基本构成单位,对预知子临床上常用药对的归纳总结可为复杂的复方研究提供基础以及对预知子的临床使用提供一定参考。     

黄芩提取物对红细胞抗氧化作用研究

目的：考察黄芩提取物（SBG）对H2O2所致正常人红细胞（RBCs）氧化的保护作用。方法：将RBCs用黄芩提取物SBG预孵育,经H2O2处理后对红细胞溶血作用、脂质过氧化（MDA）、ROS及met—Hb含量进行分析。结果：含有指标成分黄芩苷的SBG对H2O2致红细胞损伤致氧化应激溶血率、MDA、ROS及met—Hb含量均具有改善作用,不同SBG中黄芩苷含量较低时改善作用相对较弱。讨论：SBG中的黄酮类化合物具有潜在的抗氧化活性,且黄芩提取物可能对人体血液系统氧化应激具有改善作用。     

大孔吸附树脂对地榆中总鞣质的纯化

目的：筛选最佳大孔树脂纯化地榆中总鞣质,研究其最佳工艺条件及参数。方法：以鞣质的吸附量、吸附率和解吸率为考察指标,对8种大孔吸附树脂并进行评价。结果：HPD-400型树脂具有较好的吸附分离性能,最佳工艺条件为：上样液浓度4．54mg·ml^-1,吸附流速为4BV·h^-1,上柱量为4BV,以70％的乙醇洗脱,用量为3BV。通过大孔树脂纯化后,终产品中鞣质的纯度为68．52％。结论：HPD-400型树脂可用于地榆中鞣质的富集纯化。     

p53/miR-34a通路介导羽扇豆醇的抑制人膀胱癌T24细胞增殖作用

摘 要 目的：探讨羽扇豆醇对人膀胱癌T24细胞增殖的影响及对p53/miR-34a通路调控机制。方法: 运用CCK-8法检测不同浓度羽扇豆醇（5~120 μmol·L^-1）分别作用24 h和48 h对T24细胞增殖的影响;运用CCK-8法结合Caspase抑制药确证参与羽扇豆醇诱导细胞死亡的Caspase亚型;分别运用荧光定量PCR（qPCR）和蛋白免疫印记评价羽扇豆醇对miR-34a及p53蛋白表达的影响;运用qPCR评价羽扇豆醇对miR-34a下游靶基因Bcl-2、CD44、c-Myc的mRNA表达的影响。结果: T24细胞经羽扇豆醇处理后,其细胞增殖受到明显抑制,且呈一定的剂量依赖性;药物作用24 h和48 h时羽扇豆醇的半抑制浓度（IC₅₀）分别为（77.23±6.78）,（64.58±4.23）μmol·L^-1。与对照组相比,羽扇豆醇能够使T24细胞中p53蛋白表达上调,还能够增加miR-34a表达水平,差异具有统计学意义（P<0.01）;羽扇豆醇处理后细胞内Bcl-2、CD44、c-Myc的mRNA表达量下调,差异具有统计学意义（P<0.01）。结论:羽扇豆醇具有抑制膀胱癌T24细胞增殖能力,其作用机制与调控p53/miR-34a通路有关。