注射用粉防己碱温敏型缓释原位凝胶的制备

目的 制备以泊洛沙姆407(P407)为基本材料的注射用粉防己碱温敏型缓释原位凝胶,并考察其体外溶出行为.方法 采用冷溶法制备凝胶,以胶凝温度为指标,考察单独使用P407和加入其他辅料F188、PEG1500、HPMC、MC对胶凝温度的影响;采用无膜溶出法考察凝胶的体外溶蚀和释放行为,并采用HPLC测定溶出液中药物的含量,筛选较优处方.结果 胶凝温度随P407浓度的增大而降低;且当P407浓度低于15％时不发生相转变,辅料F188、PEG1500、MC的加入不能制备出符合要求的凝胶;8.0％、8.5％ 、9.0％ HPMC分别与8.0％ P407 混昆合制备凝胶的胶凝温度符合要求;HPMC浓度越高,药物释放越快,8.0％ HPMC和8.0％ P407混合后,胶凝温度和缓释效果均符合实验要求.结论 筛选出的处方中大大降低了P407的浓度,同时胶凝温度和缓释效果均符合实验要求,该温敏性凝胶具有良好的温度敏感性,制备方法简单可行.     

温经通络论治骨伤科风寒湿痹证

骨伤科风寒湿痹证颇为多见。该证外因诸邪夹杂,内有阳气为病,邪处肢体经络。脾肾阳气为病在病机变化中尤为关键,该证治须以温为本,温振脾阳而兼解郁安神,温补肾阳不忘滋养肾阴。经络痹阻导致气血不畅和筋骨失养,疏经通络亦是重要治法,通法可根据具体证候及其病机演变,或祛邪或扶正,或相须为用,或有所侧重。温经通络治疗风寒湿痹证,应考虑年龄、体质、病程、病位等个体差异,方由证化裁,药随证配伍。     

结构修饰对改善药物生物药剂学性质的研究进展

据统计,在新药研发过程中,有近40%的药物由于体内药动学性质不适而被淘汰,其原因主要包括：①口服生物利用度低,达不到有效治疗浓度;②体内半衰期短,作用时间短,治疗浓度低;③靶部位浓度低,达不到治疗效果[1]。在新药设计中,很多优秀药物并不是完全新型结构的化合物,     

二至丸干预去卵巢骨质疏松大鼠骨重建的效应及机制

目的?明确二至丸对去卵巢骨质疏松大鼠骨重建的干预作用,并探究其作用机制。方法?采用卵巢切除术制备绝经后骨质疏松症动物模型,确认造模成功后,将60只模型大鼠随机分为模型组、阿仑磷酸钠组、氟化钠组、二至丸组、女贞子组、墨旱莲组等6组,另设假手术组10只。各组分别予:生理盐水（5?mL/kg）、阿仑磷酸钠（1?mg/kg）、氟化钠（5?mg/kg）、二至丸（2?g/kg）、女贞子（1?g/kg）、墨旱莲（1?g/kg）灌胃,1次/日,连续8周,假手术组给药与模型组相同。采用Micro-CT扫描大鼠股骨;双能Ｘ线吸收法测定模型股骨颈部位的骨密度（BMD）;椎体压缩法检测骨最大载荷量;ELISA法检测血清骨碱性磷酸酶（BALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、骨保护素（OPG）、β链蛋白（β-catenin）及趋化素（chemerin）;qPCR检测骨组织RANKL、OPG、β-catenin及chemerin基因表达。结果?二至丸、女贞子和墨旱莲可显著增加骨量,提升骨最大载荷量,并修复骨微结构。血清中,二至丸、女贞子和墨旱莲可明显降低TRACP-5b、RANKL、chemerin表达水平,并提升BALP、OPG、β-catenin表达水平。骨组织中,二至丸、女贞子和墨旱莲组明显抑制RANKL、chemerin mRNA表达,并促进OPG、β-catenin mRNA表达增加。结论?二至丸可有效改善去卵巢骨质疏松大鼠的骨代谢异常,其作用机制与调控chemerin密切相关。      

寒湿型LDH疼痛-负面情绪的机制研究

目的探讨寒湿型腰椎间盘突出症(LDH)疼痛-负面情绪的潜在机制。方法收集LDH手术患者23例,根据中医辨证标准分为寒湿组、非寒湿组,获取血清样本各11个和12个,病变椎间盘样本各11个和7个。另收集10例健康体检者血清样本为正常组。ELISA法检测血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、5-羟色胺(5-HT)、降钙素相关基因肽(CGRP)、神经肽Y(NPY)、β-内啡肽(β-EP)、P物质(SP)等水平;qPCR、Western blot法检测病变椎间盘5-HT、CGRP、NPY、β-EP等mRNA和蛋白表达。结果与非寒湿组比较,寒湿组年龄、病程、疼痛和麻木积分无明显差异,但失眠、焦虑积分明显升高(P0.05)。血清学检测发现,与正常组比较,寒湿组和非寒湿组均出现CGRP显著降低和NPY显著升高(P0.01)的共性趋势,而寒湿组β-EP也出现特征性显著升高(P0.01);与非寒湿组比较,寒湿组CGRP降低(P0.05),而β-EP显著升高(P0.01)。椎间盘各因子mRNA和蛋白表达比较发现,与非寒湿组比较,寒湿组CGRP mRNA和蛋白表达升高(P0.05),β-EP mRNA和NPY蛋白表达降低(P0.05)。结论与非寒湿证型比较,寒湿型LDH疼痛-负面情绪关系更为密切;CGRP、NPY、β-EP差异性表达于外周血和病变椎间盘,提示上述因子是介导疼痛-负面情绪的重要因子。     

补肾通络方通过抑制chemerin及炎性因子干预骨质疏松症的机制研究

目的评价补肾通络方对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨、成脂分化以及小鼠单核巨噬细胞RAW264.7破骨分化模型的干预作用,并探究其调节骨形成及骨吸收的相关机制。方法分别给予补肾方、通络方和补肾通络方进行干预,采用茜素红染色法鉴定BMSCs成骨分化后各组钙结节形成情况;采用油红O染色鉴定BMSCs成脂分化后各组脂滴形成情况;采用q RT-PCR法检测BMSCs成骨、成脂分化后各组成骨、成脂分化标志基因m RNA表达,成骨、成脂分化过程和炎症模型中chemerinm RNA表达;采用ELISA法检测BMSCs成骨、成脂分化过程和炎症模型中各组chemerin分泌量。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant alkaline phosphatase,TRAP)染色鉴定各组RAW264.7细胞破骨分化程度,并测定各组TRAP活性;采用Westernblotting法检测RAW264.7细胞破骨分化中各组TRAP蛋白表达情况;采用q RT-PCR法及ELISA法检测RAW264.7细胞破骨分化后各组chemerin、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)mRNA表达及分泌。结果与对照组比较,补肾通络方组钙结节显著增多(P0.01),脂滴显著减少(P0.01),成骨分化标志基因表达显著升高(P0.01),成脂分化标志基因表达显著下降(P0.05),chemerin分泌及基因表达在成骨分化第3天及成脂分化第3、7天显著下降(P0.05、0.01)。与对照组比较,BMSCs炎症模型chemerin分泌及基因表达显著升高(P0.01);与BMSCs炎症模型比较,补肾通络方组chemerin分泌及基因表达显著下降(P0.01)。与对照组比较,RAW264.7细胞破骨分化中TRAP阳性细胞、活力、蛋白表达以及IL-6、TNF-α分泌与基因表达均显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,补肾通络方组TRAP阳性细胞、活力、蛋白表达以及IL-6、TNF-α分泌与基因表达显著降低(P0.01)。结论补肾通络方可通过抑制chemerin及炎症因子来调节成骨、成脂分化及破骨细胞分化,从而促进骨形成、抑制骨吸收、改善骨质疏松症。     

补肾通络方对骨质疏松斑马鱼效应评价及破骨细胞自噬机制

目的:评价补肾通络方对斑马鱼骨质疏松模型的干预效应,并明确其对破骨细胞分化的自噬调控机制。方法:选取新生3 d健康斑马鱼幼鱼260尾,25 mmol·L~(-1)泼尼松龙(Pred)干预3 d,通过钙黄绿素染色确认建模成功,分为空白组,Pred组(25 mmol·L~(-1)),依替磷酸二钠组(300 mg·L~(-1)),补肾组(180 mg·L~(-1)),通络组(30 mg·L~(-1))和补肾通络组(210 mg·L~(-1))各40尾。药物干预4 d后采用钙黄绿素染色后拍照,统计斑马鱼脊椎骨荧光面积;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测斑马鱼碱性磷酸酶(ALP),骨形态发生蛋白-2b(BMP-2b),Runt相关转录因子2(Runx2),组织蛋白酶K(CTSK),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)及活化T细胞核因子(NFATC-1)mRNA表达。培养RAW264.7细胞至80%～90%密度后分为空白组,Rankl诱导组(10μg·L~(-1)),补肾组(180 mg·L~(-1)),通络组(30 mg·L~(-1))和补肾通络组(210 mg·L~(-1))。经Rankl诱导细胞破骨分化及药物干预4 d后,采用FITC标记鬼笔环肽染色检测肌动蛋白环表达,Real-time PCR检测RAW264.7细胞TRAP,CTSK和自噬相关基因5(ATG5),自噬相关基因7(ATG7),泛素结合蛋白62(p62)mRNA表达。结果:在体内研究中,与空白组比较,Pred组斑马鱼椎骨面积及ALP,BMP-2b,Runx2表达显著下降(P0.01),CTSK,TRAP,NFATC-1表达显著升高(P0.01)。与Pred组比较,通络组椎骨面积明显增加(P0.05),而补肾通络组椎骨面积显著增加(P0.01),补肾组,通络组及补肾通络组ALP,BMP-2b,Runx2表达均显著升高(P0.01),补肾通络组CTSK,TRAP,NFATC-1表达明显降低(P0.05,P0.01)。体外研究显示,与空白组比较,Rankl诱导组肌动蛋白环数目显著增多(P0.01),CTSK,TRAP和ATG5表达显著升高(P0.01),ATG7,p62表达明显升高(P0.05)。与Rankl诱导组比较,补肾组、通络组及补肾通络组均明显减少了肌动蛋白环数目及CTSK,TRAP表达(P0.05,P0.01),而补肾通络组同时降低了ATG5,ATG7,p62表达(P0.05,P0.01)。结论:补肾通络方能够显著改善泼尼松龙诱导的斑马鱼骨质疏松症,并通过降低自噬相关基因表达抑制破骨细胞分化。     

二至丸对绝经后骨质疏松模型大鼠脂肪组织糖代谢影响

  目的  探讨二至丸对绝经后骨质疏松症大鼠脂肪组织糖代谢的影响。  方法  通过切除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松症大鼠模型, 大鼠随机分为: 模型组、阿仑膦酸钠组、氟化钠组和二至丸组, 每组8只。另设假手术组8只。分别予生理盐水(5 mL·kg-1),阿仑膦酸钠(1 mg·kg-1),氟化钠(5 mg·kg-1),二至丸(1.6 g·kg-1)灌胃8周, 每日1次, 假手术组干预同模型组。采用ELISA法检测血清胰岛素,qPCR、Western blot法检测脂肪组织Glut4、PGC-1α、Sirt1 mRNA及蛋白表达。  结果  与假手术组相比, 模型组大鼠血清胰岛素明显增加(P < 0.05), 脂肪组织Glut4、PGC-1α及Sirt1 mRNA和蛋白表达水平显著减少(P < 0.01)。与模型组相比, 二至丸组血清胰岛素明显减少, 脂肪组织Glut4、PGC-1α及Sirt1 mRNA及蛋白表达水平显著增加(P < 0.01)。  结论  二至丸能够激活Sirt1/PGC-1α/Glut4通路,改善绝经后骨质疏松症状态下脂肪组织糖代谢紊乱。      

中药熏洗治疗跟痛症的临床试验质量评价

目的:采用国际公认的CONSORT-中药复方和改良Jadad评分量表对近10年相关文献进行回顾分析,初步探讨中药熏洗治疗跟痛症随机对照试难(RCT)的质量状况,为今后进行中医药临床试验提供借鉴和思路。方法:计算机检索中国知网、万方、维普三方数据库,对纳入文献中的中药熏洗治疗跟痛症随机对照试验采用CONSORT-中药复方和改良Jadad评分量表进行质量评价。结果:检索得410篇文献,经筛选后共纳入43篇文献。参照CONSORT-中药复方中25条标准,仅有1篇在篇名及关键词中提及随机对照试验,3篇提及盲法,无文献描述样本量的计算,11篇提及随机分配的方法。此次纳入文献的研究结论均为阳性,但均未介绍效应大小及精度,亦无文献进行意向性分析(ITT)。据改良Jadad评分量表,纳入的43篇文献均在0~3分之间。结论:国内近10年中药熏洗治疗跟痛症的随机对照试验质量普遍较低,研究者在参考及引用此类结果时需谨慎考量其真实性和准确性,并在今后中医药临床研究中高度重视和认真参照CONSORT-中药复方和改良Jadad评分量表,提高中医药临床试验质量。