猪血清胸腺因子免疫活性的测定

根据哺乳动物循环血液中所含有的血清胸腺因子(STF)能使θ-阴性的玫瑰花瓣状形成细胞(RFC~-)转变成RFC~+,同时提高其对抗θ抗原血清的代用品硫唑嘌呤的敏感性的原理,采用成熟的BALB/C品系小鼠,经摘去胸腺后的鼠脾脏淋巴细胞和绵羊红细胞(SRBC)之间,在STF和硫唑嘌呤同时共存的条件下具有抑制玫瑰花结形成的作用,从而建立了对哺乳动物循环血液中的STF(九肽)的超微量生物活性测定方法。用本方法对猪血清和血浆的检测结果,其活性滴度分别为1:512、1:1024。     

亚硝酸盐法测定超氧化物歧化酶活性

用亚硝酸盐、氰化钾抑制区别法测定样品中的 Cu,Zn-SOD 和 Mn-SOD,灵敏度高,重现性好,操作简便。实验表明,抑制率达50%时所需 SOD 的浓度为0.07 μg/ml,其批内和批间的变异系数分别为6.0%和5.5%,鸡肝 Cu,Zn-SOD 与 KCN 的抑制复合物的表观解离常数 K′为288.6±45.5 μmol。     

多肽、蛋白质药物的聚乳酸及其共聚物微球研究进展

综述了以可生物降解的合成高分子材料-聚乳酸及其共聚物为载体的多肽，蛋白质药物微球的制备方法和影响因素。讨论了蛋白质在制备和释放过程中的稳定性。     

Cu2+、Zn2+胁迫对蛹虫草(Cordyceps militaris) 抗氧化酶活性及脂氧化水平的影响

研究了Cu^2＋、Zn^2＋对蛹虫草菌丝体抗氧化酶活性及脂氧化水平的影响。结果表明：高浓度的Cu^2＋抑制菌丝体的生长和细胞内抗氧化酶的活性；高浓度的Zn^2＋对菌丝体的生长也有抑制作用但抗氧化酶的活性变化不大。脂氧化水平随细胞内过氧化状态的变化而变化。蛹虫草菌丝体对Cu^2＋、Zn^2＋有较高的耐受度。     

生化药物的研究现状及发展思路

人类历史已进入了21世纪,科技进步大大推动了生化与生物技术药物的发展。本文就生化与生物技术药物的发展现状进行了概述,并结合工作实践对今后我国生化药物的研发思路和方法提出了自己的看法。     

胸腺体液因子(THF-γ2)的合成和活性测定

 目的化学合成胸腺体液因子(THF-γ2),并建立纯化、分析和活性测定的方法。方法采用Fmoc固相合成法(SPPS)合成了胸腺体液因子,用中压液相(MPLC)反相柱一步纯化,经HPLC分析纯度,通过质谱和氨基酸序列测定鉴定合成产物。根据THF-γ2促进T细胞产生IL-2的特性检测合成产物的体外活性。结果化学合成胸腺体液因子的产率为95.8%。纯化后其纯度达到95.92%。质谱测定其相对分子质量为918,与理论相对分子质量相符。氨基酸序列测定为NH₂/Leu-Glu-Asp-Gly-Pro-Lys-Phe-Leu,与设计序列一致。当THF-γ2浓度为300μg·L^-1时,小鼠脾细胞产生IL-2的浓度最高,为空白对照的1.9倍。结论在国内首次建立了胸腺体液因子(THF-γ2)从合成、纯化、分析到活性测定的方法,为胸腺体液因子的进一步研究和应用打下了基础。     

蛹虫草菌丝体超氧化物歧化酶的制备

 目的从蛹虫草(Cordyceps militaris)菌丝体中制备Cu,Zn-超氧化物歧化酶。方法超声破碎、硫酸铵沉淀、离子交换。结果10 g湿菌丝体,最佳超声破碎功率400 W,超声时间15 min。粗酶液经55%～95%硫酸铵沉淀,DEAE-FF阴离子交换柱,CM-52阳离子交换柱纯化,酶蛋白收率22.4%,比活达到13 592.1 U·mg(蛋白)^-1,纯化倍数214.1倍。SDS-PAGE电泳分析呈现均一条带。紫外最大吸收峰为266 nm。该酶对KCN和H₂O₂敏感。氨基酸组成和其他来源Cu,Zn-SOD相似。结论本制备工艺切实可行,能获得理想的电泳纯蛋白。     

葡萄糖和Cu2+对蛹虫草Cu,Zn超氧化物歧化酶在E.coli中表达的影响

对含有蛹虫草Cu，Zn-超氧化物歧化酶（cm—SOD）基因的重组E．coli培养条件进行了初步优化。结果表明，LB培养基中含有Cu^2＋可明显提高超氧化物歧化酶比活力；而在菌体培养中补加葡萄糖，可提高重组蛋白表达量和细胞生物量。在含有0．6mmol／L Cu^2＋、Zn^2＋的LB培养基中补加22mmol／L葡萄糖，每200ml培养液可获得1g湿细胞，超氧化物歧化酶比活力达到3305u／mg。     

胸腺体液因子THF-γ2固相合成方法优化

采用Fmoc固相肽合成法合成胸腺体液因子THF-γ2。通过逐步检测确定了手工合成的反应时间，从多肽C端到N端依次为60、120、30、60、45、90和60min。以正交试验优化了仪器合成条件，最佳条件下产物的收率为95．8％，纯度为84％。     

动物肝脏中超氧化物歧化酶分离纯化方法

<正> 超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内一类通过清除O_2,保护机体免受活性氧损害的酶类。不同动物,其SOD的含量不同,即使同一种动物,凡不同组织的SOD含量也各不相同。通常,以肝脏中SOD的含量最为丰富。所以,动物的肝脏很适于作为分离纯化SOD的原材料。早在1973年,Weisiger等就发现鸡肝中含有二种SOD。一种存在于细胞质中,为Cu,Zn-SOD,另一种存在于线粒体基质中,为Mn-SOD。同年,Marklund在牛肝中也同样发现这二种SOD的存在。从那以后,人们已经采用