甲胎蛋白化学发光免疫定量检测试剂的研制与临床应用

目的研制肿瘤标志物甲胎蛋白化学发光免疫定量检测试剂并建立检测方法,进行初步的临床应用评价。,方法将甲胎蛋白单抗包被微孔板．以辣根过氧化物酶标记的甲胎蛋白抗体为二抗．结合鲁米诺化学发光底物系统．建立甲胎蛋白化学发光免疫定量检测方法。用甲胎蛋白检测试剂国家参考品分析所建立方法的准确性、灵敏度、稳定性和重复性等试剂性能．并与西门子公司的甲胎蛋白定量检测试剂同时检测临床血清样本350例,比较检测结果。结果所研制的试剂性能符合甲胎蛋白检测试剂国家参考品各项质量标准要求。批内变异系数4．1％。5.2％、批间变异系数4．7％;试剂盒置37℃考核3d,其稳定性良好。临床样本比对检测结果表明,两种方法相关性良好（相关系数r=0．9823,阴性符合率99．5％、阳性符合率98．7％,总符合率为99．1％,Kappa值为0．98,一致性强度为最强）。结论成功研制了快速、特异、敏感和稳定的甲胎蛋白化学发光免疫定量试剂并建立其检测方法适合临床检验推广应用。     

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-重组蛛丝蛋白/聚乙烯醇支架材料的细胞相容性研究

目的 通过体外细胞毒性实验和细胞与支架材料复合培养实验的研究,评价精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-重组蛛丝蛋白(pNSR16)/聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)支架材料的细胞相容性.方法 通过溶剂浇铸/粒子沥滤的方法制备pNSR16/PVA支架材料及其浸提液.将小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3细胞)与浸提液培养,采用MTT法检测培养1、3、5 d时支架材料的细胞毒件.将NIH-3T3细胞与pNSR16/PVA支架材料复合培养2、4、6 d后行扫描电镜、HE染色观察,并于复介培养6 d后行免疫组织化学检测,观察NIH-3T3细胞在支架材料上的黏附、生长及表达功能情况.结果 MTT法检测显示pNSR16/PVA支架材料的细胞毒性为0级.扫描电镜观察细胞在支架材料复合培养4 d后即可覆盖支架材料表面,细胞呈一定方向排列.HE染色示细胞能存支架表面黏附和生长,且随培养时间的延长,细胞向支架内部迁移.免疫组织化学检测到NIH-3T3细胞分泌的bFGF,细胞能进行正常分化.结论 pNSR16/PVA支架材料具有良好的细胞相容性,有望作为一种较理想的组织工程支架材料.     

乙型肝炎病毒前S1抗原化学发光免疫检测方法的建立及初步临床应用

目的建立乙肝病毒前S1抗原（PreSl-Ag）化学发光免疫检测方法，并分析其临床应用价值。方法采用PreSlAg单抗包被微孔板，以辣根过氧化物酶标记的抗乙肝病毒表面抗原的抗体为二抗，结合鲁米诺化学发光底物系统，建立PreSlAg的化学发光免疫检测方法。研制PreSl-Ag诊断试剂企业参考品，并用于分析所建立方法的特异性、灵敏度、稳定性和精密性等试剂性能。所建立方法与市售的PreSl-Ag诊断试剂盒同时比对检测临床血清样本126份，比较检测结果。结果检测结果表明试剂性能符合企业参考品质量标准。批内变异系数6．5％-8．1％、批间变异系数13．2％；试剂盒置37℃考核3d，其稳定性良好。临床样本比对检测结果表明，两种方法相关性良好（阴性符合率96．0％、阳性符合率100％，总符合率为97．6％，Kappa值为0．951，一致性强度为最强）。结论成功建讧了快速、特异、敏感和稳定的PreSlAg化学发光免疫检测方法，适合临床检验推广应用。     

降钙素原化学发光免疫定量检测方法的建立及临床应用价值

目的 应用化学发光免疫分析技术建立人血清中降钙素原定量检测方法,并分析其临床应用价值.方法 采用固相包被降钙素原单克隆抗体,生物素标记另一降钙素原单克隆抗体,结合鲁米诺化学发光底物系统,建立人血清中降钙素原的双抗体夹心化学发光免疫定量检测方法.应用所建立的方法及罗氏化学发光试剂同时检测临床血清样本142份,比较检测结果.结果 所建立方法的灵敏度为0.02 g/mL,检测范围为0.02～10 ng/mL,批内和批间的变异系数分别为6.8%和9.1%,回收率为90%～110%,与罗氏试剂盒检测结果具有良好相关性（r=0.979）.结论 建立了简捷、敏感、特异和准确的人血清降钙素原化学发光免疫定量检测方法,与进口同类试剂比较,成本低廉,适合临床检验推广应用.