候选的减毒活疫苗和重组疫苗诱导的抗2型登革病毒保护性免疫力比较

作者将２型登革（ＤＥＮ－２）病毒的Ｅ基因克隆于穿梭载体ｐＶＬ－９４１－ｐｏｌｙ，通过在草地夜蛾细胞内同源重组将重组载体转染到苜蓿银纹夜蛾ＲＰ２３－ｌａｃＺ基因组中，从细胞上清提取的重组Ｅ蛋白用ＴＡＬＯＮＴＭ树脂纯化后制成重组疫苗，与ＤＥＮ－２ ＰＤＫ５３ Ｔｈａｉ活疫苗进行了保护性免疫力的对比研究。 将６只抗登革病毒血清阴性的食蟹猴分为３组，分别皮下免疫以明矾作佐剂的１００μｇ重组Ｅ蛋白（Ａ组）、ＤＥＮ－２ ＰＤＫ５３Ｔｈａｉ减毒活疫苗（Ｂ组）和ＰＢＳ（Ｃ组）。Ａ和Ｃ组分别于第１４和５６天加强免疫。…     

TAP2基因的多态性可影响对麻疹活疫苗的抗体应答

与抗原加工有关的转运子(TAP)基因产物位于内质网膜,将具有抗原性的多肽从胞液转移进内质网,与人白细胞抗原(HLA)I类分子及β2微球蛋白进行组装.TAP基因的多态性导致特定的多肽进入内质网膜.从而通过主要组织相容性复合物(MHC)分 子来影响抗原的提呈和针对这些抗原的免疫应答.作者以美国881名15月龄时免疫过麻疹-腮腺炎-风疹(MMR-Ⅱ)疫苗的5～12岁健康儿童作为研究对象,测定了其中32名对麻疹疫苗无应答(IgG抗体阴性)者和28名高应答者的TAP等位基因.还用Fisher提取试验对无应答者和高应答者的TAP基因型、等位基因和纯合率以及两者在已知TAP基因多态性位点上个别氨基酸的频率进行了比较.     

用稳定转化细胞制备的重组JEV颗粒抗原是有效的非感染性抗原和亚单位免疫原

将乙型脑炎病毒 ( JEV) Pr M和 E基因序列插入真核表达载体 p CDNA- 3构建成质粒 p CDJE2 - 7,转化到 COS- 1细胞中 ,经抗生素筛选后得到表达亚病毒颗粒的 JE- 4B细胞。培养 4～ 5天后 ,离心收集胞外颗粒。用1 0 %聚乙二醇 - 80 0 0浓缩沉淀或者390 0 0 rpm 4℃离心 4小时 ,于 TN缓冲液重悬。用 0 .1 % Triton X- 1 0 0对聚乙二醇沉淀的胞外颗粒进行处理后用于抗原捕获ELISA试验。对于细胞培养液离心或聚乙二醇沉淀得到的胞外颗粒、聚乙二醇沉淀的病毒以及 JEV感染的 COS- 1细胞培养液进行两步纯化 :经过蔗糖梯度速率区带离心…     

16S rRNA基因荧光定量PCR与芯片杂交法快速诊断儿童化脓性脑膜炎

目的探索快速诊断儿童化脓性脑膜炎的新技术。方法通过设计细菌16SrRNA基因高度保守区的引物和探针,对疑似化脑的21份脑脊液(CSF)进行荧光定量PCR及基因芯片杂交检测,同时与脑脊液细菌培养结果比较。结果(1)荧光定量PCR发现21份脑脊液标本有8份阳性,阳性率为38.095%(8/21),明显高于脑脊液培养的阳性率19.047%(4/21),差异具有显著意义(P<0.01)。(2)基因芯片杂交结果8份阳性,其中大肠埃希菌探针阳性5份,肠道杆菌科探针阳性2份,金黄色葡萄球菌探针阳性1份;脑脊液培养4份阳性,分别为肺炎克雷伯菌培养阳性1份,阴沟肠杆菌阳性1份,大肠埃希菌阳性2份;基因芯片杂交阳性率为38.095%(8/21),芯片杂交阳性结果与荧光定量PCR大体一致。结论荧光定量PCR结合基因芯片杂交技术检测儿童化脑具有快速、敏感、特异的特点,对儿童化脓性脑膜炎的早期诊断有一定的应用价值。     

口服轮状病毒活疫苗病毒滴度评价国家参考品的制备

目的 制备口服轮状病毒(rotavirus,RV)活疫苗病毒滴度评价的国家参考品.方法 选取检定合格的口服RV活疫苗原液,加入保护剂,1.0 ml/安瓿分装,冷冻干燥,制备病毒滴度参考品.用微量细胞病变法检测参考品的病毒滴度,用Karber法计算半数细胞培养感染量(50％ cell culture infective dose,CCID50).由3家实验室对参考品的病毒滴度进行协同标定,采用单因素方差分析和最小显著差数法对3家实验室的标定结果进行统计学分析.另外,将参考品于-20℃放置1年、4℃放置1年、37℃放置14d、-60℃放置2年,测定病毒滴度,分析参考品的热稳定性和长期稳定性.结果 经单因素方差分析比较,3家实验室检测结果的差异无统计学意义(F=0.379,P=0.686).采用最小显著差数法对3家实验室检测结果的均值进行两两比较,差异亦无统计学意义(s(x)值均为0.078 2,P值均＞0.05).参考品的平均病毒滴度为6.5 lgCCID50/ml,于不同温度放置一段时间后病毒滴度下降均未超过1.0 lgCCID50/ml.长期稳定性试验结果的变异系数为4.9％.结论 制备了可用于口服RV活疫苗病毒滴度检测的国家参考品.     

口服脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸质量评价

目的分析实施国家批签发前后三价口服脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸(TOPV)的质量及存在问题,评价TOPV的质量。方法通过资料审查和实验室检定,对2002~2004年TOPV检定结果作统计和质量趋势分析。同时将1997~2004年检定的TOPV结果进行了比较。结果共对320批TOPV批记录摘要进行资料审查,其中85批进行实验室检定,结果符合规定。在《中国生物制品规程》(2000年版)及国家批签发实施后,TOPV质量有了明显提高。结论近年来中国TOPV质量稳定。实施国家批签发对TOPV的生产和管理起到规范及监督作用,促进了疫苗质量的提高,但尚存在一些问题。     

日本麻疹疫苗效力测定中的蚀斑形成试验参数

本文作者用蚀斑形成试验对麻疹疫苗效力进行了研究,发现病毒接种量和不同病毒株对培养温度的敏感程度是影响病毒滴度的关键.作者分别用不同来源的Vero细胞和四种麻疹疫苗(AIK-C、Schwarz FF8、CAM70和TD97)及日本“内部”标准疫苗T-1988.8进行蚀斑试验.此外,分别用不同孔径的培养板进行比较.将疫苗病毒作10倍倍比稀释,室温下吸附60分钟,加含琼脂的培养基覆盖,分别在33℃、35℃和37℃于5%CO_2条件下,倒置培育5～7天后加含中性红的琼脂培养基覆盖并计数,观察到第13天,每天计算蚀斑形成单位(PFU)/ml.     

从二名急性暴发性糖尿病患儿胰腺组织中未能检测出病毒基因组序列

二名患儿被诊断为致命的急性暴发性胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)。在以往的研究中,通过流行病学、血清学研究以及对致命病毒感染的胰腺的组织学分析都支持病毒感染可导致胰腺β细胞的破坏,从而引起IDDM。本次实验应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Southern印迹杂交研究了被认为是潜在的致糖尿病的病毒因子(尤其是巨细胞病毒、流行性腮腺炎、风疹和柯萨奇病毒)的核酸序列在胰腺组织中的存在情况,从五名非糖