反复自然流产患者血清中IgE水平及生殖相关抗体测定的初报

反复自然流产患者血清中ＩｇＥ水平及生殖相关抗体测定的初报王艾丽，齐名，武建国（南京军区南京总医院全军医学检验中心，南京，２１０００２）党洁民，苏延华（南京军区南京总医院妇产科，南京，２１０００２）近年来，ＩｇＥ介导的免疫反应在多种疾病中所起的作用已受...     

用敏感的ELISA法检测脑脊液IL-2

检测IL-2对中枢神经系统感染和炎症的研究有重要意义.但通常脑脊液(CSF)中的IL-2水平很低,不易测出,且测得的CSF IL-2水平可能代表了体循环经血一脑屏障来的渗出液.文章报道的ELISA法可检测脑膜自身合成的IL-2.用含单克隆抗人IL-2抗体的1%明胶PBS液包被聚氯乙烯微孔板,20u/100μl/孔,37℃1小后4℃过夜.以0.05%吐温-PBS洗板4次后,每孔加150μl 2%明胶PBS,室温1小时,洗板同前(可于孔内加     

用溶血法检测C_3肾炎因子的活性及其临床应用

C_3肾炎因子(C_3NeF)是补体旁路途径C_3转化酶 C_(3b)B_b 的自身抗体,常见于一些低补体性肾脏病病人(包括系膜增生性肾小球肾炎、基底膜密集沉着病等)的血清中。其本质为 IgG。通过与 C_(3b)B_b 结合可抑制其内部衰变,并使其不被βIH 及 C_3b 灭活剂(C_(3b)INA)灭活,从而导致 C_3和其他补体因子经旁路途径(Ap)活化。     

三种检测循环免疫复合物方法的比较和评价

<正> 检测循环免疫复合物(CIC)对于自身免疫性疾病发病机理的研究有着重要价值。由于CIC复杂的免疫生物学活性和理化性状,基于不同原理而建立的检测方法甚多,但适用范围多较局限,测定结果也常相距甚远。为了选择一种适于常规应用的敏感、简便、可靠的CIC检测方法,我们对三种CIC测定方法进行了比较研究,现将结果报告如下。     

用SPA夹心ELISA技术测定循环免疫复合物及临床应用

测定循环免疫复合物(CIC)对某些疾病的诊治和发病机理的研究有重要意义。检测CIC的方法已有几十种之多。仅WHO等推荐的方法即有Clq法、固相胶固素法、类风湿因子法、Raji细胞法~([1～6])。这些方法虽有许多优点,但试剂来源困难,操作复杂,难于在临床实验室作为常规开展。国内目前广泛应用的聚乙二醇(PEG)沉淀试验,其特异性也较差。我们利用CIC中Ig可以与金黄     

三种检测抗链球菌溶血素O方法的比较

目的 对3种检测抗链球菌溶血素O（ASO）的方法进行比较。方法 同时用自动化散射比浊法,乳胶凝集试验和溶血抑制法检测120例临床患者的血清ASO。结果 不同方法检测ASO阳性率,溶血抑制法为44．17％（53／120）,比浊法为40．83％（49／120）,乳胶凝集法为34．16％（41／120）,3法检测结果呈平行关系（r=0.988-0.997)。ASO水平较高（＞1000kU/L)或较低水平增高时,乳胶法和溶血抑制法易有误差。结论 比浊法检测ASO敏感性好,结果重复性好,是检测ASO的优选方法。     

钙调素ELISA定量检测方法的建立与实验条件优化

目的 研究ELISA法定量测定钙调素(CaM)的最优条件。方法 用重组人CaM、免抗CaM，通过对聚苯乙烯反应板进行紫外辐照处理，改善抗原因相化条件；通过对抗原包被液、包被时间等条件优化，建立简便、快速、准确的ELISA定量技术。结果 以pH7．4 0．01mol/L的PB为包被液，包被及后续封闭时间为4℃静置72h，CaM包被浓度为5-8g/ml，抗原抗体反应时间为37℃ 60min，可获最佳CaM定量结果。结论 建立的检测CaM的ELISA测定方法，敏感性、重复性均在临床检测可接受的范围内，标准曲线的线性也较好，可用于细胞内外CaM的定量研究。     

氟伐他汀对人脐静脉内皮细胞游离钙离子水平及内皮型一氧化氮合酶活性的影响

目的:观察氟伐他汀对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)游离钙离子水平及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响及可能机制。方法:体外培养HUVECs,随机分为5组:空白对照组,氟伐他汀(10-8,10-7,10-6,10-5mol/L)组。采用硝酸还原酶法测定细胞上清液中NO含量,液体闪烁计数仪测定L-[3H]-精氨酸和L-[3H]-瓜氨酸的含量,用激光共聚焦扫描显像系统检测内皮细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)水平的变化。结果:与空白对照组比较,10-8,10-7,10-6,10-5mol/L氟伐他汀孵育细胞12h后可显著升高HUVECs细胞内eNOS活性,促进NO释放,同时伴有[Ca2 ]i升高,且呈浓度依赖性。另外,10-5mol/L氟伐他汀在0～12h时间段呈时间依赖性增高eNOS活性,作用12h使eNOS活性达到最高(P<0.01)。结论:氟伐他汀呈浓度依赖性升高HUVECseNOS活性和促进NO释放,该作用与其增加内皮细胞内[Ca2 ]i有关。     

TGF-β1 对骨髓间充质干细胞在无氧无血清条件下凋亡的影响

目的:探讨TGF-β1 对骨髓间充质干细胞(MSCs)在无氧无血清条件下凋亡的影响.方法:取大鼠骨髓,体外分离,扩增培养MSCs;TGF-β1腺病毒或对照GFP腺病毒转染MSCs.细胞分为TGF-β1-MSCs组、GFP-MSCs组,MSCs组.RT-PCR检测TGF-β1基因的表达;无氧无血清条件下分别诱导各组细胞 4,8,12 h, 流式细胞仪检测凋亡变化;RT-PCR检测 bcl-2 mRNA的表达.结果:TGF-β1转染的MSCs表达TGF-β1基因水平与GFP-MSCs组,MSCs组相比均增加(P＜0.05);细胞在无氧无血清条件下诱导4,8,12 h,后TGF-β1-MSCs组的凋亡率与GFP-MSCs组,MSCs组的凋亡率相比降低(P＜0.05),且随时间的推移呈升高的趋势(P＜0.05);bcl-2 mRNA在无氧无血清条件下诱导4 ,8,12 h后的表达水平TGF-β1-MSCs与GFP-MSCs、MSCs相比均增加(P＜0.05),且随时间的推移均呈降低趋势(P＜0.05).结论:TGF-β1修饰的MSCs可稳定高效表达TGF-β1基因;TGF-β1-MSCs通过上调bcl-2 mRNA水平抑制无氧无血清诱导的凋亡.     

肝病患者不同Ig类别抗HBs独特型抗体（抗HBs—Ab2）的检测及意义

本文报告用ELISA法检测285例肝病患者IgG、IgA、IgM类抗HBs-Ab_2。结果表明,抗HBs-Ab_2主要存在于HBsAg、HBeAg阳性乙肝患者血中,并与其它血清HBV标志关系密切。提示抗HBs-Ab_2可能通过抑制抗HBs的形成影响HBV清除。