两种抗补体蛋白对脂多糖致急性肺损伤的保护作用比较研究

目的通过比较两种不同的补体干预方式对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用,进一步认识补体在LPS致ALI中的作用,并探讨补体不同成分在ALI中的作用。方法造模前将抗补体蛋白眼镜蛇毒因子(CVF)和Atrase A分别给予对应组别的大鼠,抑制补体。通过大鼠尾静脉注射LPS(5 mg.kg-1),造成ALI模型。在给予LPS后1、6、12 h采集标本,分别测定血清补体溶血活性、肺含水量、肺组织匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性,取支气管肺泡灌洗液(BALF)测定细胞数、蛋白含量以及TNF-α和P-selectin的含量,取肺组织行病理切片检查。通过对实验结果的分析比较,评价两种抗补体蛋白对LPS致大鼠ALI的保护作用。结果在LPS致ALI的早期伴随有明显的血清补体活性下降。模型组的血清补体活性在给予LPS后的1 h内下降了47%。采用Atrase A抑制了50%补体活性的实验组其MPO、TNF-α、P-selectin水平未上调。完全去除补体活性的CVF组其MPO活力在1 h时与正常对照组相当,在6、12 h时则上升至与模型组相当,而TNF-α和P-selectin水平则介于模型组和正常组之间。病理切片检查表明两种抗补体蛋白均能有效减轻肺组织病理损伤,其中Atrase A明显优于CVF。结论补体明确参与了LPS致ALI的病理过程。采用抗补体干预能减轻ALI炎症和相关病理损伤,但两种抗补体蛋白的保护作用有明显区别。采用CVF完全去除补体C3、C5-C9仅在ALI早期有明显的保护作用,而仅部分抑制了补体活性的Atrase A则明显优于CVF,提示Atrase A作用的补体成分可能在ALI中具有重要作用。     

长寿地区73例结节性甲状腺肿患者MTHFR基因C677T和A1298C多态性研究

目的研究重庆长寿地区人群中结节性甲状腺肿(NG)与亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T(rs1801133)、A1298C(rs1801131)位点单核苷酸多态性的关系。方法选取重庆市长寿区人民医院73例NG患者(病例组)和76例体检健康者(对照组),采用一代Sanger测序技术对受试者的全血标本进行DNA测序。结果病例组中年龄>30岁的患者占96.05%,>60岁的占23.68%。对照组中年龄>30岁的占97.56%,>60岁的占19.51%。病例组与对照组年龄、性别比较,差异无统计学意义(P>0.05)。病例组、对照组及病例组+对照组基因型C677T、A1298C男女分布比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。MTHFR(A1298C)C等位基因(OR=0.397,95%CI:0.161~0.981,P=0.041)和CC基因型(OR=0.116,95%CI:0.014~0.978,P=0.027)降低NG发生的风险,MTHFR C677T多态性与NG的发生没有相关性。结论A1298C基因多态性与NG发生风险有关;MTHFR基因C677T位点的多态性与NG发生风险无关。     

PABA/NO抗人鼻咽癌细胞株CNE细胞增殖和迁移的作用

目的探讨PABA/NO对体外培养人鼻咽癌细胞株CNE增殖和迁移的影响及其机制。方法将体外培养的处于对数生长期的CNE细胞随机分为PABA/NO组及对照组,PABA/NO组分别予0-6～10-10mol/L浓度的PABA/NO进行干预,对照组不干预。48 h后采用MTT比色法和细胞计数法检测CNE细胞增殖情况;Transwell小室法检测CNE细胞迁移情况;硝酸酶还原法检测细胞培养液中一氧化氮（NO）浓度;RT-PCR法检测细胞血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达。结果与对照组比较,PABA/NO干预后CNE细胞增殖和迁移均受到抑制（P〈0.05）,且该效应在10-6～10-8mol/L范围内具有较好的浓度依赖关系,细胞培养液中的NO浓度明显提高,VEGFmRNA表达下调。结论 PABA/NO能抑制CNE增殖和迁移,其机制可能通过提高NO浓度,抑制肿瘤血管生成,从而发挥其抗肿瘤作用。     

脂多糖激活补体诱导内皮细胞释放黏附分子和凋亡

目的在细胞水平上研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活血清补体对内皮细胞的作用和影响。方法研究LPS激活血清补体的作用方式和特点,观察LPS激活补体对内皮细胞表达黏附分子和凋亡的影响。采用ELISA检测内皮细胞释放P-selectin、E-selectin和ICAM-1的变化,化学发光法检测Caspase-3/7活化情况,SRB法检测LPS激活补体对内皮细胞生长的影响。结果 LPS能够激活血清补体,这种激活呈现量效、时效性。LPS激活血清补体可诱导内皮细胞瞬时明显释放P-selectin,E-selectin和ICAM-1表达也明显上调,同时可导致Caspase-3/7活化。在本实验条件下,LPS激活血清补体对内皮细胞生长未产生抑制。结论 LPS激活血清补体可损伤内皮细胞,导致内皮细胞明显表达黏附分子以及发生凋亡。