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目的 探究同源异型盒基因 B3(homeobox genes B3, HOXB3)对骨肉瘤细胞增殖、克隆形成、迁移和凋亡的影响及其潜在分子机制。方法 检测 2020年 1月~ 12月在雅安市第二人民医院骨科行手术治疗的 30例骨肉瘤患者病理组织及邻近正常组织中 HOXB3表达;通过转染干扰 siRNA敲低 HOXB3表达,验证其转染效率;采用细胞增殖实验、克隆形成实验、细胞划痕实验及细胞凋亡实验分别探究敲低 HOXB3对骨肉瘤细胞增殖、克隆形成、迁移和凋亡的影响;分析 CDCA3在骨肉瘤中的表达特征及与 HOXB3的相关性,通过染色质免疫共沉淀技术( chromatin immunoprecipitation, ChIP)分析和荧光素酶报告基因实验验证 HOXB3和细胞分裂周期相关蛋白 3(cell division cycle associatedfprotein 3, CDCA3)结合关系;验证 HOXB3和 CDCA3表达调控对骨肉瘤细胞生物学行为的作用机制。结果 30例骨肉瘤临床组织中 HOXB3表达( 41.154±8.626)较邻近正常组织(22.857±7.512)显著升高,差异有统计学意义(t=8.975,P< 0.001)。敲低 HOXB3表达后,骨肉瘤细胞增殖率、克隆形成率和迁移率明显降低( F=37.477~ 399.842,均 P< 0.001),细胞凋亡率显著升高(F=10.556,P=0.011)。骨肉瘤组织中CDCA3表达( 38.624±7.736)明显高于邻近正常组织(21.875±6.482),差异有统计学意义( t=9.090,P< 0.001);HOXB3与 CDCA3表达呈正相关( r=0.736,P< 0.01)。CDCA3是 HOXB3的靶基因;敲低 HOXB3表达显著降低了骨肉瘤细胞中 CDCA3表达( F=694.283,P< 0.001)。HOXB3可结合 CDCA3的启动子区域正调控 CDCA3的表达;在敲低 HOXB3表达的细胞中回补 CDCA3,逆转了 HOXB3对骨肉瘤细胞增殖、克隆形成、迁移、凋亡的抑制 /促进作用。结论 HOXB3在骨肉瘤中表达上调,其可能通过与 CDCA3启动子区域结合,正向调控 CDCA3表达促进了骨肉瘤细胞的增殖、克隆形成及迁移,抑制了细胞凋亡,可作为临床骨肉瘤治疗的潜在药物靶点。 相似文献
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