5-ALA-PDT联合放疗对常氧与乏氧人卵巢癌SKOV3细胞的杀伤作用

目的:探讨5-氨基酮戊酸(5-ALA)介导的LED-光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)联合放疗对人卵巢癌SKOV3细胞的杀伤作用。方法:常氧与乏氧下SKOV3细胞各实验组经不同浓度的5-ALA培养4 h后,由不同功率密度的635 nm红光和6 Gy X线照射,48 h后MTT法检测细胞存活率。结果:常氧与乏氧下0.1~0.7 mmol·L^-1范围内,5-ALA无细胞毒性与放射增敏性(P>0.05);5-ALA>0.1 mmol·L^-1,随着药物浓度与红光功率密度的增加,细胞存活率呈明显的下降趋势;X线与5-ALA-PDT联用,R_a×R_b/R_c比值分别为2.13、1.49,且常氧下联用与顺序无关,乏氧下有关(P<0.01)。结论:常氧与乏氧下X线与PDT联用都是协同作用,但乏氧下联用效果弱于常氧,且先X线照射后PDT可能会是一个更好的联用方式。     

醋酸曲安奈德温敏凝胶药效学及滞留性

目的：制备关节腔注射用醋酸曲安奈德TAA温敏凝胶,考察其药效学和滞留性。方法：采用物理混合法制得TAA温敏凝胶,建立老鼠皮下气囊炎症模型,给予不同组分药物治疗后,通过对比皮下囊物理特征、组织切片的相关评价以及elisa试剂盒检测炎性因子TNF-α水平等来考察所制备的TAA温敏凝胶药效学及缓释性能,并通过小动物活体成像实验评价其滞留性。结果：药效学结果显示制备的TAA温敏凝胶相比于市售TAA混悬液对于气囊滑膜炎模型的炎症抑制作用更强、作用时间更持久。小动物活体成像实验结果显示制备的TAA温敏凝胶在体内滞留时间能达到9 d以上,能够达到缓释药物的目的,适用于关节腔局部用药的要求。结论：所制备的TAA温敏凝胶的炎症抑制作用强且持久,缓释效果及滞留性良好,有望成为新的关节腔给药传递系统。     

放疗联合光动力疗法治疗肿瘤的研究进展

放疗联合光动力疗法(PDT)在治疗肿瘤方面日益受到人们的关注,从细胞水平、动物水平及临床应用等方面的研究进展来看,放疗联合传统PDT可以提高肿瘤治疗效果,降低放疗剂量,减少不良反应的发生。尤其近年发展起来的自发光光动力疗法可以不再需要额外的光源,与放疗的联合应用在降低辐射剂量的同时,亦有效解决了外部光源穿透力弱、诱发PDT效应差的弊端。自发光光动力疗法比放疗与传统PDT的简单联合应用更具优势,是目前研究的热点。就放疗联合光动力疗法治疗肿瘤的研究进展予以综述。     

肿瘤乏氧放射增敏剂的研究进展

摘 要 改善肿瘤细胞的乏氧,可有效减少其对放疗的抵抗,从而提高治愈率。目前用于改善肿瘤细胞缺氧减少放射抵抗的化合物已经不仅仅局限于原有的亲电性放射增敏剂,许多具有靶向性的乏氧放射增敏剂也成为研究重点。本文在介绍肿瘤乏氧机制的基础上,对新型靶向制剂、亲电性乏氧细胞放射增敏剂、生物还原剂与植物天然提取物这四类乏氧细胞放射增敏剂的研究进展进行了综述。     

间苯三酚颗粒在家兔体内的药动学研究

目的:建立间苯三酚血药浓度的测定方法,并研究间苯三酚颗粒在家兔体内的药动学特征。方法:取6只健康家兔ig给予间苯三酚颗粒(80 mg/kg)溶液,于给药前和给药后0.083、0.17、0.25、0.3、0.33、0.42、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6 h分别自耳动脉采血1.5 ml。采用高效液相色谱法检测其血药浓度,色谱柱为Welchrom C18,流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(3.5∶96.5),流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为267 nm,进样量为20μl,内标为对苯二酚。采用DAS 2.1.1药动学软件计算其药动学参数。结果:间苯三酚在0.12~3.0μg/ml质量浓度范围内与其峰面积与内标峰面积的比值呈良好的线性关系(r=0.999 3),提取回收率为86.02%~91.33%,RSD为4.9%~5.3%(n=3),日内RSD为4.5%~5.6%(n=3),日间RSD为4.9%~5.8%(n=3);间苯三酚在家兔体内的药动学参数t1/2β、tmax、cmax、AUC0-6 h分别为(1.05±0.16)h、(0.25±0.05)h、(1 076.01±19.62)μg/L、(919.02±34.00)μg·h/L。结论:该法专属性强、精密度好,符合血浆样品测定要求,可用于间苯三酚家兔体内的药动学研究。间苯三酚颗粒在家兔体内代谢过程符合一室模型。     

放疗增敏研究中人卵巢癌SKOV3乏氧细胞模型的建立方法

目的 探讨适用于放疗增敏研究中人卵巢癌SKOV3乏氧细胞模型的建立方法.方法 将人卵巢癌细胞株SKOV3分为常氧对照组、二氯化钴组和环境乏氧组,各组均在X射线单次照射(0、2、4、6、8 Gy)后72 h,应用噻唑蓝法检测细胞增殖.结果 与常氧对照组未照射细胞相比,二氯化钴组和环境乏氧组未照射细胞的细胞增殖率均显著降低(t=24.789、196.960,P均＜0.01);与同组未照射细胞相比,常氧对照组与二氯化钴组接受不同剂量的X射线单次照射后,其细胞存活率均显著性下降(F=2263.039、3672.044,P均＜0.01),且放射剂量越大,其细胞存活率越低,而环境乏氧组无显著性变化(F=1.412,P＞0.05);与常氧对照组、二氯化钴组的同剂量照射细胞相比,环境乏氧组细胞存活率均显著升高(2Gy:F=61.125; 4Gy:F=181.825;6Gy:F=373.830; 8Gy:F=2425.510,P均＜0.01).结论 环境乏氧组的细胞对射线产生了强烈的抵抗性,即放射敏感性显著性降低,射线对其杀伤力减弱,且所获得的乏氧细胞模型明显优于二氯化钴组,因此环境乏氧比二氯化钴更适合作为放疗增敏研究中人卵巢癌SKOV3乏氧细胞模型的建立方法.     

5-ALA-PDT联合放疗对常氧与乏氧人卵巢癌SKOV3细胞的协同杀伤作用机制

目的：探讨在常氧与乏氧下5-氨基酮戊酸（5-ALA）介导的光动力疗法（PDT）（5-ALA-PDT）联合放疗对人卵巢癌SKOV3细胞的协同杀伤作用机制。方法：实验分为常氧组与乏氧组,两组再各设正常对照组（N）、单纯药物组（0.3 mmol·L^-1）、放射加药组（0.3 mmol·L^-1+6 Gy）、光动力组（0.3 mmol·L^-1+0.5 J·cm^-2）及联合组（6 Gy+0.3 mmol·L^-1-0.5 J·cm^-2）,采用荧光显微镜观察5-ALA转化为原卟啉IX的荧光强度,倒置显微镜结合台盼蓝单染法检测细胞膜破损率,荧光显微镜结合Hoechst 33342单染法检测细胞凋亡,流式细胞仪结合试剂盒检测ROS含量。结果：4 h后细胞膜附近明显出现红色荧光,常氧下的荧光强度显著强于乏氧。24 h或48 h后,联合组细胞膜破损率常氧高于乏氧（P<0.01）,随着时间的延长细胞膜破裂增多（P<0.01）;同时间点同组内联合组细胞膜破损率比单纯放射加药组、光动力组都要高（P<0.01）。24 h或48 h后,联合组细胞凋亡率24 h常氧低于乏氧（P<0.01）,48 h不显著（P>0.05）,随着时间的延长凋亡率不断降低（P<0.01）;同时间点同组内联合组24 h细胞凋亡率比单纯放射加药组、光动力组都要高,而48 h却都要低（P<0.05）。0 h、12 h或24 h后,联合组ROS含量常氧低于乏氧（P<0.01）,随着时间的延长ROS含量先升高后降低（P<0.01）,12 h含量最高;同时间点同组内联合组ROS含量都比单纯放射加药组、光动力组都要高（P<0.05）。结论：常氧下5-ALA-PDT与放疗联用表现出协同作用,可能与产生的ROS导致细胞膜破损造成细胞大量坏死有关;而乏氧下表现出协同作用可能与ROS导致细胞大量凋亡有密切联系。     

替加氟温敏凝胶含量测定方法的建立

目的:建立以高效液相色谱法测定替加氟温敏凝胶含量的最佳方法。方法:通过对中国药典和参考文献中测定替加氟温敏凝胶含量的HPLC方法进行比较,并根据凝胶剂特点考察检测条件、样品处理方法,测定替加氟温敏凝胶含量,对各方法回收率进行考察,做出综合评价。 结果:在流动相为:0.02 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液-甲醇(60:40)的条件下,替加氟在2~15 μg·ml^-1范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均加样回收率为99.71%,精密度RSD低于2%,符合要求。3批样品中替加氟的平均含量为标示量的(99.90±0.78)%。结论:本检测方法简便、快速、结果准确、重复性好,可为替加氟温敏凝胶的质量控制提供分析依据。