皱落假丝酵母脂酶的研究Ⅱ,酶的性质的研究

对来源于皱落假丝酵母(Candida rugosa)SIPI2.230的脂酶的性质,进行了较为系统的研究,发现该酶能在常温下于短时间内完全水解底物为甘油和脂肪酸,可用于酶联试剂盒测定血清甘油三酯。     

甘油激酶的纯化与性质的研究

由嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus SIPI1.687)的粗提取液,经液-液双相抽提、DEAE-Toyopearl 650 M 离子交换柱层析及 SIPI-Ⅱ蓝色(?)料配基层析等分离提纯,可得甘油激酶(81U/mg),PAGE 鉴定为单带。用 Sephacryl 400凝胶过滤测得分子量为209,000道尔顿,SDS-PAGE 测定结果表明该酶由四个分子量均为50,000道尔顿的相似亚基组成。酶作用最佳 pH 9.4,pH 5.8～11.2时稳定;最佳温度为50℃,有较好的热稳定性。以甘油为底物时米氏常数为6.25×10~(-5)M。     

α—磷酸甘油脱氢酶的提纯及性质的研究

应用液-液双水相提取、DEAE-纤维素层析及SIPI-I红色染料配基层析等方法提纯兔肌匀浆粗提取液中的α-磷酸甘油脱氢酶,其比活15u/mg蛋白,为原酶的50倍,总收率约50％。并对其分子量、米氏常数、酶作用的最适pH、最适温度,对pH和热的稳定性等性质作了测定。     

皱落假丝酵母脂酶发酵及分离纯化工艺的研究

在皱落假丝酵母SIPI2.230发酵时,如在培养基中加入少量吐温-80及脂类物质,可使脂酶发酵单位从原来的1.6u/ml提高到100u/ml。脂酶提纯时,采用DEAE-纤维素搅拌吸附与洗脱、Bulyl-Toyopearl650 M疏水层析及交联葡聚糖G-100凝胶过滤层析工艺,可提高酶纯度66.8倍。     

酶法制备半合成青霉素的研究

本文主要介绍以6-APA为母核、d-苯甘氨酸甲酯盐酸盐(或p-羟基-d-苯甘氨酸甲酯盐酸盐)为侧链,用酶缩合法制备氨苄青霉素(或羟氨苄青霉素)的研究概况,并分别阐述了温度、pH、配比、酶量和侧链化合物结构对酶促反应的影响。附参考文献33篇。     

固定化细胞制备6-氨基青霉烷酸(6-APA)新工艺

6-APA是生产半合成青霉素的关键中间体,由于半合成新青霉素已广泛应用于临床,而且在许多资本主义国家基本上已取代了青霉素,使6-APA的需要量日益增长。目前制备     

酶法制备头孢菌素Ⅳ的研究——Ⅱ.分离与精制的研究

前曾报道用固定化大肠杆菌(UR 160)的头孢菌素酰化酶,使7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)与苯甘氨酸甲酯盐酸盐(PGME)缩合制备头孢菌素Ⅳ。本文介绍缩合反应后的分离与精制的研究。头孢菌素的分离精制方法有树脂吸附法、活性炭吸附法和复合物法等。我们进行酶法缩合制备头孢菌素Ⅳ系采用大孔吸附树脂方法进行分离精制,该工艺不但可分离头孢菌素Ⅳ(收率90％),而且可回收缩合液中未反应的7-ADCA和苯甘氨酸(PGA)。     

链激酶第三国际标准品的标定

用英国国家生物标准品和对照品研究所（NIBSC）提供的链激酶第二国际标准品样品A标定另3个样品B，C，D，测得其效价分别为452．8，1046，1024IU／支，其中C，D实际是同一样品，拟作为链激酶第三国际标准品，NIBSC最终公布的标定值为1030IU／支。     

酶法制备头孢菌素Ⅳ的研究 Ⅰ 缩合条件的研究

本文叙述了酶法缩合制备头孢菌素Ⅳ工艺中各种条件的试验研究,主要有:pH、温度、底物浓度、原料配比和纯度、不同菌种和不同固定化方法对缩合反应的影响。综合各种因素表明用明胶戊二醛交联的大肠杆菌UR160,在pH6.7、15℃时进行7-ADCA和PGME(配比1∶2～3,底物浓度为2％)缩合反应,制备头孢菌素Ⅳ,总收率可达60％左右。工艺简单,收率较高,固定化酶可重复使用,不需特殊设备,无三废,可用于工业化生产。     

心肌黄酶的提纯工艺及其部分性质的研究

通过热变性处理、硫酸铵分级沉淀、DE-AE-Toyopear1650M柱层析及K_2BP-Agarose染料配基层析等方法从猪心肌组织匀浆提取液中分离与纯化了心肌黄酶。应用此工艺,酶活力的总回收率为16.9％,纯化倍数为26.4。用Sephadex G-100凝胶过滤法测得心肌黄酶的分子量为85,000道尔顿;以NADH为底物时其米氏常数为1.0×10~(-3)M;最适作用PH为10.6,在pH5-10时稳定;最适作用温度为65℃,有较好的热稳定性,在75℃保温3小时仍可保留80％的酶活性,提纯的酶溶液在4℃保存六个月未见活性明显损失。