GBSⅢ荚膜多糖-精制破伤风类毒素结合疫苗的制备及其免疫原性研究

目的研究和制备B群链球菌Ⅲ荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗,并对其免疫原性进行评价.方法用亲和层析法纯化荚膜多糖抗原,用获得的结合疫苗皮下注射免疫小鼠,间接ELISA方法检测小鼠血清内型特异性的IgG抗体.结果结合疫苗在小鼠体内诱导产生的免疫反应远比单纯的荚膜多糖强烈.结论破伤风类毒素作为荚膜多糖抗原的载体,能显著提高荚膜多糖的免疫原性.     

B群链球菌荚膜多糖抗原的分离纯化工艺研究

目的为提高荚膜多糖抗原得率,降低荚膜多糖中残余蛋白质含量和核酸含量,提高荚膜多糖抗原纯度,优化B群链球菌荚膜多糖的提取纯化工艺条件。方法研究pH值,沉淀核酸和荚膜多糖的乙醇浓度,乙醇沉淀多糖所需的温度和时间;比较蛋白酶K法、Sevag法和冷酚抽提法去除荚膜多糖中杂蛋白质的效果。结果建立起25%乙醇沉淀去核酸,冷酚抽提法去蛋白质分离纯化荚膜多糖,55%乙醇沉淀多糖的方法。3批GBSⅢ发酵液中获得的荚膜多糖的唾液酸含量为12.4%~14.8%;分配系数(Kav)≤0.5的多糖回收率达90%以上;荚膜多糖得率为0.021~0.027 g/L,抗原纯度较高。结论从发酵液中提取纯化荚膜多糖抗原的工艺是可行有效的。