高龄维持性血液透析患者成功行ERCP1例

患者,男,86岁,以“维持性血液透析6年,发热、呕吐、皮肤黄染1周”之主诉入院。入院查体体温36．4℃,脉搏74次／min,呼吸20次／min,血压140／70mmHg（1mmHg=0．133KPa）,神志清楚,自动体位,查体合作。     

血吸虫基因组计划

对血吸虫基因组计划的建立、发展和现状进行简述,并介绍了基因组研究中用到的一些生物学技术。     

人GDDR基因启动子的克隆和报告基因载体构建

目的:克隆人GDDR基因的启动子;构建GDDR启动子的报告基因载体并进行活性分析.方法:设计合成GD-DR启动子引物,采用PCR技术从人基因组DNA中扩增GD-DR启动子;将扩增片段插入T载体并利用酶切与测序进行鉴定;亚克隆该基因至pGL3-Basic荧光报告基因载体;瞬时转染细胞,用双荧光素酶报告基因系统检测报告基因载体的活性.结果:PCR扩增得到人GDDR基因启动子;成功构建pGL3-GDDR-promoter 报告基因载体,测序结果表明启动子序列正确;双荧光素酶报告基因检测系统证实构建的报告基因载体具有启动子活性.结论:成功地构建人GDDR基因启动子的克隆及其报告基因载体的构建,为深入研究GDDR转录表达的调控机制提供基础.     

曼氏血吸虫缺乏DNA甲基化

DNA甲基化是一种真核生物体内的转录后修饰方式。大部分无脊椎动物的转录修饰不存在甲基化,但仍有一些低级的真核生物如枯氏锥虫、恶性疟原虫、海胆等存在DNA的甲基化。Tweedie等根据DNA甲基化的情况不同,把生物分为非甲基化、部分甲基化、完全甲基化等3组,并且假设DNA甲基化水平反映了机体的复杂程度,而甲基化本身则与精细调节机制的产生有关,即使是极低水平的甲基化也表明了精细调节机制的存在。     

青年人肾病综合征28例分析

目的:分析青年人肾病综合征的临床和病理特点,以期提高诊治水平.方法:分析28例青年肾病综合征患者的临床、病理及治疗情况.结果:28例患者病理表现为IgA肾病的17例,非IgA系膜增生性肾炎的8例,局灶节段性肾小球硬化性肾炎1例,另2例未行肾活检.其中,28例均使用足量强的松+环磷酰胺冲击.辅于ACEI、潘生丁等综合治疗.3个月完全缓解率50%(14/28),部分缓解率35.7%(10/28),总缓解率85.7%(24/28).6个月完全缓解率42.8%(12/28),部分缓解率39.2%(11/28),总缓解率82.1%(23/28).半年复发率74.0%(20/27).结论:青年人肾病综合征患者中IgA肾病居多,通过激素+环磷酰胺治疗后可有效缓解,但半年复发率高.     

骨髓间充质干细胞移植对急性肺水肿大鼠血清IL-6与SP-A的作用研究

目的:通过肺组织形态学及血清细胞因子(IL-6、SP-A)水平观察骨髓间充质干细胞对大鼠急性肺水肿的防治作用。方法:80只SD大鼠随机分为肺水肿组、干细胞治疗组、干细胞预防组、空白对照组、干细胞对照组(各16只)。腹腔注射氯化铵建立急性肺水肿组织模型,预防组及治疗组于模型建立前后移植MSCs1×105/只,移植后30min、2h、1d、7d光镜及电镜扫描观察肺组织病理,测定血IL-6、SP-A水平。结果:移植后2h时肺水肿组病变明显,治疗组肺水肿病变减轻。治疗组2h时IL-6明显低于肺水肿组(P<0.01),在30min SP-A水平明显高于肺水肿组(P<0.01),而预防组与肺水肿组无差异(P>0.05)。结论:MSCs移植治疗减轻急性肺水肿,预防性移植不减轻肺水肿。     

开展课外科研活动，提高医学生的综合素质

根据近年来在指导学生课外科研活动过程中积累的经验。探讨了课外科研活动对提高学生综合素质的重要性并从以下几方面对如何开展课外科研活动展开了讨论：①做好课外科研活动的动员。让学生充分了解课外科研活动的意义。②在开展课外科研活动的过程中，教师与学生应注意的几个方面。③课外科研活动开展过程中存在的问题及解决办法探讨。     

RNA结合蛋白QKI在心肌肥大中的作用

目的探讨RNA结合蛋白QKI在血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大中的作用。方法将H9C2细胞分为对照组与心肌肥大组(AngⅡ组),AngⅡ组采用血管紧张素Ⅱ(10-7 mol/L)刺激H9C2细胞建立肥大模型;2组均采用转染小干扰RNA抑制QKI的表达,腺病毒感染H9C2细胞过表达QKI5和QKI6,应用Western blot检测H9C2细胞中QKI水平,应用实时定量RCR检测对照组及AngⅡ组作用6,12,18,24,36h时心房利钠多肽表达水平。结果与对照组比较,AngⅡ组作用12h总QKI增加,其中QKI6升高明显(P<0.05);AngⅡ+siQKI组心房利钠多肽水平较AngⅡ+NC组增加(P<0.05);AngⅡ+Ad-QKI5组心房利钠多肽水平与AngⅡ+Ad-Ctrl组比较差异无统计学意义(P>0.05),AngⅡ+Ad-QKI6组心房利钠多肽水平较AngⅡ+Ad-Ctrl组降低(P<0.05)。结论 QKI6可抑制心肌肥大。     

活化T细胞核因子对组成性启动子SV40的调控作用

目的:利用双荧光素酶报告系统探讨活化T细胞核因子(NFAT)能否调控常见组成性启动子CMV,SV40和TK,为不同条件下选择合适双荧光报告系统内参提供依据。方法:用限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ分别从质粒pCDNA3.1和pRL-TK中切下CMV和TK启动子,克隆至pGL3-basic载体中,构建成pCMV-Luc和pTK-Luc载体。将构建pCMV-Luc和pTK-Luc以及商品化的pGL3-control(SV40启动子驱动),分别与SV40(pBIND)和TK(pRL-TK)两种启动子驱动的两种内参质粒共转染入HEK293细胞;观察过表达组成性活化NFAT后相对荧光素酶活性读数的改变。结果:成功构建了pCMV-Luc和pTK-Luc质粒,荧光素酶活性检测发现,常见组成性启动子SV40启动子对过表达组成性活化的NFAT存在一定的反应。结论:T细胞活化过程中重要的转录因子NFAT能够调控SV40启动子活性;表明常见组成性启动子SV40并非真正、绝对的组成性不变。因此,在荧光素酶报告系统内参选择时需要充分考虑该问题,本研究为合理选择内参质粒提供了一个可行策略。     

日本血吸虫真核生物翻译起始因子2α亚基全长cDNA的克隆与功能分析

目的 对用表达序列标签(EST)策略从日本血吸虫(Schistosoma japonicum)尾蚴cDNA文库中筛选出的新基因进行全长cDNA克隆及功能预测。方法 将插入于pTriplEx2质粒上的cDNA进行测序，测序结果经BLAS Tn程序搜索，发现该插入cDNA序列与曼氏血吸虫真核生物翻译起始因子2α亚基(eukaryotic translation initiation factor 2 alpha subunit，elF2α)基因高度同源。根据该EST序列设计与pTriplEx2质粒上的5′端测序引物相匹配的PCR下游引物，从该cDNA文库中扩出包含eIF2α全长ORF的cDNA片段。将PCR产物纯化后克隆到pGEM-T载体上，并对此克隆进行测序得到其全长cDNA序列。用NCBI站点的BLASTx及BLASTn程序对所获得的新基因序列进行同源性搜索；用blast two sequence程序对同源性高的基因进行核苷酸及氨基酸水平的同源性比较。同时用网上分析软件进行基序和保守区域的搜索。结果 发现一个与曼氏血吸虫eIF2α亚基mRNA高度同源的日本血吸虫新基因，核苷酸与氨基酸水平的同一性分别为87％和79％，编码由327个氨基酸组成的蛋白序列。结论 用EST策略筛选到一个日本血吸虫新基因，编码eIF2α亚基，全长编码序列与曼氏血吸虫eIF2α亚基mRNA高度同源。