头孢丙烯微生物限度检查方法的验证

目的 建立头孢丙烯原料的微生物限度检查方法,并对其进行方法学验证。方法 按中国药典2010年版方法对3 个批号的头孢丙烯原料进行微生物限度检查方法验证。细菌的计数方法和控制菌检查均采用低速离心-薄膜过滤-酶中和联用法;霉菌和酵母菌计数采用平皿法。结果 各试验菌的回收率均高于70%,稀释液回收率也均高于70%,控制菌检查具有专属性,满足中国药典2010 版验证试验的要求。结论 本品的微生物限度检查方法有效可行,可用于头孢丙烯原料的微生物限度检查。     

基于多种微生物鉴定技术的制药企业环境微生物鉴定结果分析和应用研究

目的 运用多种微生物鉴定技术建立制药企业无菌制剂高风险生产区环境微生物鉴定信息库。方法 连续4个季度对中间体、制药用水、洁净空间、人员设备表面等收集微生物,采用VITEK生化鉴定、MALDI-TOF MS蛋白鉴定和16S rRNA/ITS基因鉴定技术进行鉴定,结合微生物形态学和来源信息进行分析,建立相应的微生物鉴定信息库。结果 共收集获得89株细菌和5株真菌的鉴定结果,开展相关形态学分析：在收集的94株菌中,革兰氏阳性球菌和革兰氏阳性芽孢杆菌共占比60.6%,是洁净区常见污染菌;B级环境收集到46株微生物,葡萄球菌是主要优势菌属,占比45.7%,其次是芽孢杆菌(17.4%)、微球菌(6.5%)和酵母菌(4.3%),B级还分离到1株洋葱伯克霍尔德菌;制药用水收集到29株微生物,主要为革兰氏阴性菌(58.6%)。结论 本研究建立了融合生化、蛋白、基因鉴定结果的微生物鉴定信息库并开展相关分析,为制药企业开展风险控制,加强对不可接受微生物的管理,开展微生物数据偏差调查和溯源分析提供依据;企业还可利用鉴定结果建立环境微生物地图,有针对性地控制并消除微生物污染,提高无菌保障水平,确保药品质量安全。     

冬虫夏草微滴式数字聚合酶链式反应定量检测方法的建立及应用

目的 建立一种定量检测冬虫夏草菌的微滴式数字聚合酶链式反应（ddPCR检测方法，探讨其定量检测冬虫夏草的可行性。方法 使用冬虫夏草菌特异性引物和探针建立dd PCR检测方法，对冬虫夏草及其常见伪品进行鉴别，对其特异性和自制混伪品进行检测和评估，并采用该方法对市场流通的冬虫夏草产品中的冬虫夏草菌成分进行检测。结果 ddPCR检测方法对冬虫夏草菌具有良好的检测特异性，且在掺伪0%～70%范围内定量检测的准确性高；此外，对冬虫夏草及其制剂市售样品的检测结果显示，该方法可用于冬虫夏草的定量检测。结论 ddPCR检测方法可成功检测市售冬虫夏草产品中的冬虫夏草菌成分，具有市场应用价值，可为含冬虫夏草成分的保健食品和药品提供定量和鉴伪检测依据。