β-内酰胺酶抑制剂研究进展

细菌耐药问题日益严峻,已经引起了公众的广泛关注。β-内酰胺类抗生素是应用最广的抗生素,但是细菌对此类药物的耐药严重降低了药物的治疗效果,而产生β-内酰胺酶是β-内酰胺类药物耐药的主要机制,研制β-内酰胺酶抑制剂,以此作为增效剂与β-内酰胺类抗生素联用,可有效恢复细菌对β-内酰胺类药物的敏感性。临床上广泛传播的β-内酰胺酶有丝氨酸β-内酰胺酶和金属β-内酰胺酶。目前,在增效剂的研究中,已经获得了多种有效的丝氨酸β-内酰胺酶抑制剂,许多金属β-内酰胺酶抑制剂仍处于研究阶段。此外,为了应对由多种β-内酰胺酶引起的多重感染,研发丝氨酸β-内酰胺酶/金属β-内酰胺酶双重抑制剂也是逆转β-内酰胺类抗生素耐药性的新思路。本文综述了β-内酰胺酶抑制剂的研究进展,为研制新型β-内酰胺酶抑制剂提供借鉴。     

细菌多重耐药外排泵抑制剂研究进展

细菌耐药性，尤其是多重耐药性（multi-drug resistance，MDR）已经成为非常严重的医疗问题，而多种类型细菌外排泵（efflux pumps）的存在是细菌多重耐药的重要机制，因此寻找有应用前景的外排泵抑制剂（efflux pump inhibitors，EPI）是十分必要且迫切的。目前已经发现外排泵抑制剂的作用机制分为：（1）干扰外排泵组装；（2）阻断外排泵能量来源；（3）阻碍底物通过外排通道；（4）机制未知。本文按照作用机制对已经发现的细菌多重耐药外排泵抑制剂的特点进行分述。     

一种新型KPC-2抑制剂:PHT427（英文）

KPC-2型β-内酰胺酶对超广谱头孢菌素和碳青霉烯类抗生素具有耐药性,并已成为治疗革兰氏阴性菌感染的全球重大威胁,因此寻找新型抗菌剂和新的抗感染策略非常重要。我们前期经筛选发现PHT427是一种有效的NDM-1抑制剂,进一步研究发现其对KPC-2也有明显的抑制活性。结果显示PHT427能够显著抑制KPC-2,IC50值为2.04μM,并且与美罗培南联用对大肠杆菌BL21(DE3)/p ET28a(+)-bla KPC-2具有明显的协同作用。荧光淬灭和SPR结果表明PHT427能够与KPC-2发生相互作用。分子对接与定点突变的结果进一步表明Arg220、Thr235和Thr237是促进这种相互作用的关键氨基酸残基。研究表明PHT427是一种具有潜力的KPC-2抑制剂并且能够协助碳青霉烯类抗生素抑制KPC-2产生菌。     

以聚酮合酶13为靶点的新型抗结核先导化合物的发现

摘要：目的 发现结核分枝杆菌Pks13(MtPks13)的抑制剂,为后续针对以MtPks13为靶点开发抗结核药物奠定了基础。方 法 表达MtPks13-TE蛋白并优化其酶活测定方法,构建MtPks13抑制剂高通量筛选模型;与海分枝杆菌表型筛选方法联用,对5 万个化合物进行筛选,将获得的抑制剂IMB-7142进行IC50以及酶动力学性质的测定;表面等离子共振(surface plasmon resonance, SPR)实验以及分子对接模型研究阳性化合物IMB-7142与MtPks13-TE蛋白是否能发生相互作用及其作用位点;用菌液稀释法评 价IMB-7142对结核标准株的抗结核活性。结果 成功构建了MtPks13抑制剂筛选模型,并发现了一个对MtPks13有抑制作用, 同时抑制海分枝杆菌生长的化合物IMB-7142,该抑制剂能与MtPks13-TE蛋白发生相互作用,具有较好的体外抗结核活性。结 论 成功构建了稳定的MtPks13抑制剂高通量筛选模型,并且应用该模型筛选得到的一个抑制剂同时具有抗结核活性,为后续 开发以MtPks13为靶点抗结核药物提供了思路。     

抗耐药性结核病新药的先导化合物筛选

目的 采用结核分枝杆菌(Mtb)H37Rv对从上海陶塑生物科技有限公司购买的生物活性化合物库L4000进行抑制剂筛选,以获得具有成药前景的抗结核先导化合物.方法 采用已经建立的Mtb H37Rv细胞水平的抑制剂高通量筛选模型对化合物库L4000的7285个样品进行筛选,并测定初筛阳性化合物对H37Rv以及临床多药耐药结...     

抗分枝杆菌海洋微生物的分离与鉴定

目的 从海洋微生物中发现具有抗分枝杆菌活性的细菌,并对其进行鉴定.方法 从印度洋热带地区的海底沉积物中分离海洋微生物.通过纸片法活性测定,发现了一株具有抗耻垢分枝杆菌活性的细菌.光学显微下观察细菌形态和菌落.测定细菌的理化特性,提取其基因组,荧光法测定基因组的Tm值,扩增其16S rDNA并进行测序.将序列提交NCBI...     

结核分枝杆菌泛酸合成酶抑制剂的实验研究

目的:获得特异性靶向结核分枝杆菌泛酸合成酶的抑制剂,为开发针对该靶点的新型抗结核药物奠定基础。方法:重组表达结核分支杆菌H37Rv的泛酸合成酶,以酶活测定体系为基础构建高通量筛选模型,对筛选到的酶抑制剂进行酶促动力学研究,并运用分枝杆菌微量直观快速药敏试验法测定其体外抗结核活性。结果:得到了具有天然活性的泛酸合成酶,建立并优化了酶活测定体系及筛选模型,应用模型筛选得到了具有新结构的抑制剂。评价结果显示,该抑制剂具有显著的体外抗结核活性。结论:获得了具有显著体外抗结核活性的新型泛酸合成酶抑制剂。     

靶向结核耐药机制的抗结核药物增效剂的研究进展（英文）

结核病(Tuberculosis, TB)是一个全球性的健康问题,由于耐多药结核病(multidrug-resistant tuberculosis, MDR-TB)菌株的出现,抗结核药物出现防治困难。针对耐药机制开发抗结核药物的增效剂可以减少耐药性的出现和缩短治疗时间。本文从靶向细胞壁、外排泵和β-内酰胺酶的增效剂与抗结核药物的联合应用进行综述,为后续开发活性更好、毒性更小的新型增效剂提供参考。