奈替米星体液浓度测定的方法学研究

通过对国产硫酸奈替米星注射后人体血尿中药物浓度测定，建立了奈替米星体液浓度测定的微生物法，该方法的检测限为０．０３７５～０．０７５１μｇ，最低检测浓度为０．２５～０．５μｇ／ｍｌ，回收率为８８．８％±３．６３％～９８％±１４．４０％，重复性试验相对标准差为２．２２％～５．３４％；并对１０例健康受试者用药后血标本１００余份进行了微生物法测定和高压液相色谱法测定，对两种方法测定结果的比较发现：微生物法测定的血药浓度明显高于ＨＰＬＣ法（Ｐ＜０．０１），而ＨＰＬＣ法由于需复杂的样品预处理和特殊的色谱条件，测定的血药浓度较低，回收率仅７１．９８％～７６．９６％。不过，两种方法测定结果的相关性较好。本研究结果提示：微生物法测定奈替米星体液浓度简便、易操作、结果准确可信，适用于体液药物浓度测定。     

注射用头孢噻肟/他唑巴坦钠体外药效学研究

采用琼脂二倍稀释法测定了头孢噻肟钠 (CTX)与他唑巴坦钠 (TAZ)分别以 2∶1、3∶1、4∶1联用对临床分离 4 5 5株致病菌 (其中产ESBls 4 4株 ;产酶菌 30 0株 ,非产酶菌 1 1 1株 )的体外抗菌活性 ;并评价其对小鼠实验性细菌感染全身败血症模型的体内疗效 ,同类产品的哌拉西林 /他唑巴坦钠 ( 8∶1 ) ,作为阳性对照药进行比较。此外 ,还进行了头孢他啶 /他唑巴坦钠及其组方成分对标准产酶株的MICs及抑酶作用比较。　　实验结果显示 :大肠杆菌中 1 4株产ESBLs酶 ,占实验Ecoli菌株的 1 9.1 8% ( 1 4 / 73) ,CTX对其MIC50与MIC90 为 1 2…     

甲磺酸加替沙星片剂与环丙沙星片剂治疗皮肤软组织感染随机对照临床研究

目的：评价甲磺酸加替沙星片治疗皮肤软组织细菌性感染的有效性和安全性。方法：采用区组分层均衡随机单盲试验设计．甲磺酸加替沙星片治疗19例及环丙沙星片治疗21例共40例感染患者的临床试验。结果：试验组与对照组病例的一般项目基本相似，甲磺酸加替沙星片与环丙沙星片的临床有效率分别为94．7％和90．5％．细菌学有效率分别为92．9％和100％，细菌清除率为92．9％和100％，不良反应发生率分别为0、14．3％。结论：甲磺酸加替沙星片是一种安全有效的广谱抗菌药物．抗菌活性强，可用于治疗多种细菌引起的皮肤软组织感染。     

临床分离产酶菌对哌拉西林/舒巴坦钠敏感性研究

目的 :比较哌拉西林、舒巴坦、舒巴坦与哌拉西林不同配比 ( 1∶1、2∶1、4∶1、8∶1 )及阿莫西林与哌拉西林以 2∶1比例配合使用时 ,对临床分离的产酶菌的体外抗菌活性及其影响因素。方法 :采用琼脂平板稀释法及肉汤稀释法测定MIC值 ,用Nitrocefin纸片测定细菌产酶情况。结果 :临床分离的 339株细菌中 ,产 β 内酰胺酶率为 77% ,革兰阴性细菌的产酶率高于革兰阳性细菌。对于革兰阴性杆菌及厌氧菌尤其是产酶菌而言 ,哌拉西林与舒巴坦联合时的MIC值明显低于哌拉西林 ,其中以哌拉西林 /舒巴坦 2∶1、4∶1时效果最好。哌拉西林联合 β 内酰胺…     

产AmpC酶阴沟肠杆菌耐药的基础与临床

目的 对四川大学华西医院阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的检出率、耐药性及ampC结构基因序列进行分析．探讨阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的耐药性及临床特点。方法 采用琼脂稀释法对临床标本中分离的阴沟肠杆菌进行产AmpC酶株的筛选，用酶粗提物头孢西丁三维试验结合PCR法检测AmpC酶．并测定产AmpC酶菌株对9种抗菌药物的MIC值。对3株高度耐药阴沟肠杆菌产AmpC酶的结构基因和1株敏感菌进行PCR扩增并对产物序列进行分析，测序的菌株与E。cloacae p99进行核苷酸序列比较和推导的氨基酸序列比较。结果 阴沟肠杆菌产AmpC酶株的检出率为24．6％。产AmpC酶菌株多呈多重耐药，产AmpC酶耐药菌对9种抗菌药物的耐药率由高至低为头孢西丁、头孢噻肟、阿米卡星、氨曲南、头孢他啶、头孢哌酮／舒巴坦、环丙沙星、头孢吡肟、亚胺培南。阴沟肠杆菌耐药株ampC结构基因的核苷酸序列与E.cloacae p99的同源性为99％．推导的氨基酸序列仅Ala-58→Pro发生点突变。结论 四川大学华西医院阴沟肠杆菌产AmpC酶细菌检出率较高。产AmpC酶细菌多呈多重耐药，亚胺培南是治疗产AmpC酶细菌感染的较可靠的药物。阴沟肠杆菌产AmpC酶是其对β-内酰胺类抗生素耐药的原因之一，其ampC结构基因突变可能与其耐药性有关。     

成都地区肺炎链球菌对抗菌药物的耐药性调查

目的 了解成都地区临床分离的肺炎链球菌的耐药性，为肺炎链球菌感染临床合理应用抗菌药物提供理论依据。方法 二倍琼脂稀释法测定11种抗菌药物对肺炎链球菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果 91．94％菌株对青霉素敏感，8．06％中度耐药；88．71％菌株对SMZ／TMP敏感，11．29％中度耐药；肺炎链球菌对头孢呋辛、头孢噻肟、头孢毗肟、氧氟沙星、司帕沙星、美洛培南、万古霉素敏感率为100％；对红霉素、克林霉素耐药率相当高，分别达到62．90％和74．19％。结论 成都地区肺炎链球菌对青霉素耐药率较低，而对大环内酯类和克林霉素类耐药率较高。     

101株阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的：调查分析阴沟肠杆菌对临床常用抗生素的耐药情况。方法：对四川大学华西医院2001年4月－2002年11月从临床分离的101株阴沟肠杆菌采用琼脂平皿对倍稀释法测定12种抗生素的最低抑菌浓度（MIC），分析耐药情况。结果：阴沟肠杆菌对氨苄西林、头孢呋辛的耐药率高达99.00%、87.13%，对第三代头孢菌素、氟喹诺酮类的耐药率高于50％，对关孢哌酮／舒巴坦、头孢吡肟、阿米卡星的耐药率低于40％，亚胺培南对90％以上的分离株具有抗菌活性。氟喹诺酮类药物的交叉耐药严重。结论：阴沟肠杆菌耐药水平高，多重耐药现象普遍存在。亚胺培南对其抗菌活性最强。     

氟喹诺酮类药物对嗜麦芽寡养单胞菌的抗菌活性及羰基氰氯苯腙对其的影响

目的　了解氟喹诺酮类药物 (FQNs)对嗜麦芽寡养单胞菌的抗菌活性及羰基羟基氰氯苯腙(CCCP)对其抗菌活性的影响。方法　采用琼脂二倍稀释法测定抗菌药物的最低抑菌浓度 (MIC) ,同时测定CCCP对 FQNs的 MIC值的影响。结果　 14 4株嗜麦芽寡养单胞菌对多种常用抗生素呈现多重耐药 ,但对SMZ/ TMP、替卡西林 /克拉维酸以及 FQNs的耐药率较低 ,尤其是新型 FQNs具有很高的抗菌活性 ,其中抗菌活性由高到低依次是加替沙星、司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星。主动外排泵抑制剂 CCCP在体外能增强 FQNs的抗菌活性 ,主动外排机制不仅存在于 FQNs耐药菌株 ,而且也存在于 FQNs敏感菌株 ,但是CCCP对 4种 FQNs耐药菌株的影响更大。结论　嗜麦芽寡养单胞菌的感染经验上可选用 SMZ/ TMP或 FQNs治疗 ,对于严重感染可采用 SMZ/ TMP和替卡西林 /克拉维酸联合或用新型 FQNs治疗。主动外排泵抑制剂在体外的确能降低 FQNs对嗜麦芽寡养单胞菌的 MIC,若能保证安全性 ,可望用于临床克服细菌的耐药性。     

337株金黄色葡萄球菌对替考拉宁等的体外抗菌活性研究

目的检测替考拉宁等8种抗菌药物对金葡菌的体外抗菌活性,为临床合理用药提供依据。方法应用琼脂平板稀释法检测了337株金葡菌对8种抗菌药物的耐药性。结果在8种药物中,替考拉宁、去甲万古霉素、万古霉素对MRSA的抗菌活性相似,MIC90分别为1、2、2mg/L;利福平、克林霉素对MRSA的抗菌活性较差,MIC90分别为256、>512mg/L。未发现对替考拉宁、去甲万古霉素、万古霉素耐药的菌株,但发现有3株MRSA分别对对替考拉宁、去甲万古霉素中敏。结论替考拉宁、去甲万古霉素、万古霉素是临床治疗MRSA感染患者的重要药物,合理使用糖肽类抗生素非常重要。     

金黄色葡萄球菌norA基因的研究

目的 研究norA基因介导的金葡菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法PCR法制备DIG-norA基因探针；点杂交及狭线杂交检测细菌nor4基因及其转录水平。结果所有实验菌株均检测到norA基因；诱导耐药菌SA2-16的norA基因转录水平明显高于其亲代株，临床分离耐药菌norA基因转录水平略高于敏感菌，但统计学分析无显著性差异，细菌在环丙沙星1／10MIC浓度中生长，未见norA基因转录增加。结论 norA基因可能为金葡菌的结构基因，诱导耐药菌药物泵出增加的原因在于norA基因转录的增加，norA基因介导的耐药在不同的耐药菌株中所起的作用并不相同。