情志护理干预对老年骨折手术患者应激反应及睡眠质量的影响观察

目的:评价情志护理对老年骨折手术患者应激反应和睡眠质量的影响。方法:选取2016年9月至2018年7月福建中医药大学附属人民医院收治的老年骨折手术患者100例作为研究对象,采用摸球法随机分为对照组与观察组,每组50例。对照组患者接受常规护理干预,观察组采用情志护理干预。比较2组患者的睡眠质量、并发症与应激反应发生率。结果:观察组的应激反应发生率、并发症发生率低于对照组,睡眠质量高于对照组。结论:对老年骨折手术患者实施情志护理干预,可控制应激反应,提升其睡眠质量。     

生长分化因子15蛋白在宫颈上皮内瘤变和鳞癌中的表达及意义

目的:探讨生长分化因子-15(growth differentiation factor-15,GDF-15)蛋白在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和鳞癌中的表达及其在宫颈鳞癌发生和发展中的意义。方法 :采用免疫组织化学法分别检测45例宫颈癌(宫颈癌组),90例CIN(CIN1、CIN2、CIN3各30例),30例正常宫颈组织(对照组)的GDF-15的表达情况。结果 :GDF-15在对照组、CIN组、宫颈癌组的阳性率分别为10.0%(3/30)、45.6%(41/90)和80.0%(36/45),CIN组中,阳性率CIN1组为26.7%(8/30),CIN2组为53.3%(16/30),CIN3组为56.7%(17/30)。统计发现GDF-15在CIN组中阳性表达率明显高于对照组中的表达(Z=870.0,P=0.000),CIN2和CIN3的阳性表达率均明显高于CIN1(分别Z=330.0,P=0.037;Z=315.0,P=0.019),宫颈癌组中的阳性率明显高于CIN3组(Z=-2.16,P=0.031)。结论:GDF-15蛋白在正常宫颈组织、CIN、宫颈鳞癌中随着宫颈病变的进展其阳性表达率呈明显上升趋势,检测GDF-15表达可能有助于预测宫颈高度病变的转归。     

低氧微环境增强MACC1调控PI3K/AKT信号通路促进结直肠癌肿瘤干细胞样特性

目的探讨低氧微环境和结肠癌转移相关基因1(MACC1)对结直肠癌(CRC)肿瘤干细胞(CSC)样特性生物学行为的影响及机制。 方法将空载体(LV-ctrl组)、MACC1过表达载体(LV-MACC1)转染结肠癌细胞HCT116,同时在低氧微环境条件下培养LV-MACC1细胞(LV-MACC1+hypoxia组)。分别应用CCK-8法及免疫细胞化学法、划痕实验、Transwell侵袭实验、肿瘤球形成实验检测细胞增殖、迁移能力、侵袭能力及体外肿瘤形成能力。免疫印迹法检测MACC1、CD133、CD44、AKT和p-AKT蛋白的表达,740 Y-P验证PI3K/AKT在MACC1诱导的肿瘤干细胞样特性中的作用。 结果与LV-ctrl组比较,LV-MACC1组的细胞增殖、迁移和侵袭能力均增强,肿瘤球形成增多,CD44、CD133和p-AKT蛋白的表达水平增高(P＜0.05)。与LV-MACC1组比较,LV-MACC1+hypoxia组的细胞增殖、迁移和侵袭能力增强,肿瘤球形成增多(P＜0.05)；CD44、CD133和p-AKT蛋白的表达水平增高(P＜0.05)。与对照组比较,740 Y-P增加了细胞CD133和CD44蛋白表达水平(P＜0.05)。 结论低氧微环境增强MACC1调控PI3K/AKT信号通路促进结直肠癌细胞出现肿瘤干细胞样特性。     

p16 INK4A、Ki－67检测在宫颈液基细胞学疑难病例鉴别诊断中的应用

目的探讨p16INK4A、Ki-67检测在宫颈液基细胞学疑难病例鉴别诊断中的临床应用价值。方法宫颈细胞学诊断疑难病例54例,其中绝经25例;液基细胞学技术(TCT)初诊后制片,进行p16INK4A、Ki-67免疫细胞化学检测。结果反应性不成熟鳞状化生18例,p16INK4A、Ki-67均为阴性表达,组织活检或TCT复查均未见上皮内病变;ACS-H或HSIL 11例,p16INK4A、Ki-67阳性表达分别为11例和10例,病理活检证实为CINⅡ或CINⅢ。25例绝经患者中上皮萎缩鳞状7例,p16INK4A、Ki-67均阴性,活检结果或TCT复查未见上皮内病变或恶性病变;HSIL 12例,p16INK4A、Ki-67均阳性,病理活检CINⅢ8例、鳞癌4例;鳞癌6例,p16INK4A、Ki-67均阳性,病理活检结果均为鳞癌。结论 TCT结合免疫细胞化学在诊断疑难宫颈细胞学病例中具有重要临床意义,p16INK4A、Ki-67对非上皮内病变和上皮内瘤变有鉴别诊断价值。     

良性前列腺增生及前列腺癌的ADC值与PAP、P504S、PSA表达的相关性研究

目的：探讨良性前列腺增生和前列腺癌的ADC值与前列腺相关标志物PAP、P504S、PSA表达的关系。方法收集经病理证实的65例前列腺疾病患者,其中良性前列腺增生30例,前列腺癌35例。病理检查前3个月内均行前列腺MRI、DWI检查,采用单次激发EPI序列,b值为0 s/mm2和800 s/mm2,并采用免疫组化检测组织标本中PAP、P504S、PSA的表达,分析ADC值与PAP、P504S、PSA表达的关系。结果良性前列腺增生和前列腺癌的ADC值分别为（1.73±0.21）×10-3 mm2/s和（1.34±0.15）×10-3 mm2/s,差异具有统计学意义（t=8.545,P=0.000）。PAP和PSA在良性前列腺增生和前列腺癌中均表达,差异无统计学意义（P均＞0.05）,P504S在前列腺癌中的表达显著高于良性增生（Z=-7.055,P=0.000）,双变量相关分析显示ADC值与P504S的表达呈显著负相（Spearman's相关系数r=-0.654,P=0.000）;结论 PAP和PSA不能区别前列腺良恶性病变;P504S可以作为前列腺癌标志物;ADC值可以定量评价良性前列腺增生和前列腺癌,且与P504S存在负相关,可以作为前列腺良恶性病变MRI诊断的参考指标。     

MACC1在大肠癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的探讨结肠癌转移相关基因-1(MACC1)在大肠癌患者癌组织、癌旁正常黏膜组织以及不同转移潜能大肠癌细胞系中的表达情况,探讨MACC1表达与大肠癌侵袭转移的关系。方法采用免疫组织化学法检测77例大肠癌患者癌组织及其癌旁正常黏膜组织中的MACC1的表达情况,分析大肠癌患者癌组织的MACC1表达与淋巴结转移、神经侵犯和临床分期等的关系;采用免疫细胞化学法检测不同转移潜能大肠癌细胞株中的MACC1的表达情况。结果大肠癌患者癌组织的MACC1阳性表达率显著高于癌旁正常黏膜组织,差异有统计学意义(P 0. 05)。发生淋巴结转移的大肠癌患者其癌组织的MACC1阳性表达率(97. 3%)显著高于无淋巴结转移患者(55. 0%),有神经侵犯的患者其癌组织的MACC1的阳性表达率(100. 0%)显著高于无神经侵犯的患者(60. 4%),Ⅲ期患者其癌组织的MACC1的阳性表达率(90. 0%)显著高于Ⅰ、Ⅱ期患者(60. 0%,50. 0%),差异均有统计学意义(P 0. 05)。患者癌组织MACC1的表达与其性别、年龄、肿瘤大小、组织学分级、浸润深度无关(P 0. 05)。MACC1在高侵袭转移潜能SW620细胞中的表达明显强于在低侵袭转移潜能SW480细胞中的表达(P 0. 05)。结论大肠癌患者癌组织MACC1高表达,发生淋巴结转移、神经侵犯和高级别临床分期患者癌组织MACC1高表达,MACC1在高侵袭转移潜能SW620细胞中的表达较强,MACC1的表达情况与癌细胞的侵袭和转移能力密切相关。     

二甲双胍对高葡萄糖环境下结肠癌细胞增殖和侵袭的影响

目的观察二甲双胍在高葡萄糖环境下对人结肠癌细胞系SW480增殖和侵袭的影响,并探讨其可能的机制。 方法通过Western blot方法检测SW480细胞在高葡萄糖及不同浓度二甲双胍干预后E-cadherin和Vimentin的表达水平,并应用CCK-8法及Transwell侵袭实验检测细胞增殖及侵袭能力的变化。 结果高葡萄糖作用不同时间后均能促进结肠癌细胞增殖,二甲双胍能抑制结肠癌细胞的增殖,并呈时间——剂量依赖性。20 mmol/L浓度二甲双胍干预48 h后,Transwell侵袭实验结果显示细胞穿膜数为（40.18±2.22）%,明显低于高糖组和对照组（F=49.403,P<0.001）;Western blot结果显示E-cadherin表达明显增强,Vimentin表达明显减弱。 结论高葡萄糖环境能促进结肠癌细胞生长,二甲双胍能明显抑制有或无高葡萄糖环境下结肠癌的增殖和侵袭能力,其机制可能与调节上皮——间质转化（EMT）过程有关。     

VEGF诱导对翼状胬肉成纤维细胞血管生成拟态影响的研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)诱导对人翼状胬肉成纤维细胞血管生成拟态(VM)的影响。方法收集在广州市增城区人民医院行翼状胬肉手术的6例新鲜的初发性人翼状胬肉标本(年龄41~58岁)。将人翼状胬肉新鲜组织剪碎后进行体外贴壁细胞常规培养,并采用波形蛋白(Vimentin)免疫细胞化学染色和广谱细胞角蛋白(CK)染色对人翼状胬肉成纤维细胞进行鉴定。分别设置对照组和不同浓度的VEGF(1 ng/ml、10 ng/ml及100 ng/ml)组,取生长良好的3~5代翼状胬肉成纤维细胞进行分组培养。采用细胞计数试剂盒-8法检测各组成纤维细胞的增殖能力。应用细胞三维培养技术和糖原染色法观察各组VM的进展情况,采用蛋白质印迹法检测各组细胞的基质金属蛋白酶(MMP)-2和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的表达。各组吸光度(OD值)、MMP-2及HIF-1α的描述均采用均数±标准差(x珋±s)表示,对照组与不同浓度VEGF组的比较采用单向方差分析,当差异有统计学意义时,进一步两两比较。双变量相关性分析采用Spearman's等级相关分析。结果人翼状胬肉成纤维细胞鉴定结果显示,细胞爬片经苏木精-伊红染色后,在显示镜下细胞呈长梭形、三角形、扇形或不规则状。细胞免疫化学染色结果显示,细胞的胞浆呈Vimentin阳性表达,广谱CK阴性表达。细胞计数试剂盒-8法检测细胞增殖结果显示,对照组、1 ng/ml组、10 ng/ml组及100 ng/ml组细胞的OD值分别为0.57±0.023、0.59±0.012、0.77±0.024及1.014±0.035。对照组和1 ng/ml组比较差异无统计学意义(t=1.21,P>0.05);10 ng/ml组和100 ng/ml组的OD值均明显高于对照组和1 ng/ml组(t=14.78,12.34;P<0.05);100 ng/ml组的OD值最高,与对照组、1 ng/ml组及10 ng/ml组比较,差异有统计学意义(t=20.12,19.45,13.41;P<0.05)。细胞三维培养及糖染色显示,10 ng/ml组和100 ng/ml组均出现VM结构,而对照组和1 ng/ml组未发现VM结构。10 ng/ml组和100 ng/ml组VM结构的密度分别为4.40±1.14和12.40±2.07,差异有统计学意义(t=-7.899,P<0.05)。对照组、1 ng/ml组、10 ng/ml组及100 ng/ml组细胞的MMP-2值分别为0.26±0.038、0.29±0.013、0.39±0.013及0.73±0.014;对照组、1 ng/ml组、10 ng/ml组及100 ng/ml组细胞的HIF-1α值分别为0.087±0.0086、0.087±0.0031、0.15±0.0016及0.37±0.026。对照组和1 ng/ml组中MMP-2和HIF-1α灰度值的差异均无统计学意义(t=1.21,0.01;P>0.05);10 ng/ml组中MMP-2和HIF-1α灰度值均显著高于对照组和1 ng/ml组(t=7.92,6.85,17.64,17.82;P<0.05);100 ng/ml组的中MMP-2和HIF-1α灰度值均显著高于其他3组(t=28.48,26.45,18.72,25.31,24.78,15.45;P<0.05)。翼状胬肉成纤维细胞的血管生成拟态密度与MMP-2和HIF-1α表达呈显著正相关(r=0.509,0.503;P<0.05)。结论 VEGF能够增强人翼状胬肉成纤维细胞的增殖能力、促进VM出现及促使MMP-2和HIF-1α表达增高。提示VEGF因素可能是翼状胬肉出现VM的分子机制,并协同增强MMP-2和HIF-1α表达一起影响翼状胬肉的进展。     

结直肠癌组织中肿瘤相关中性粒细胞和IL-17a的临床病理意义

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中肿瘤相关中性粒细胞(TAN)和白细胞介素-17a(IL-17a)的临床病理意义及CRC预后的危险因素。 方法回顾性选取本院接受手术治疗的100例CRC患者作为研究对象,收集患者术中切除肿瘤组织,并通过HE染色法检测肿瘤标本TAN浸润情况；通过免疫组化法检测肿瘤组织中IL-17a表达水平,并分析TNA浸润和IL-17a与CRC临床病理特征的关系,Kaplan-Meier法分析TNA浸润和IL-17a与结直肠癌患者生存期之间的关系；Logistic多因素分析患者预后影响因素。 结果TAN浸润和高表达的IL-17a与高临床分期、发生淋巴结转移和短的生存时间相关(P＜0.05)。TAN浸润和高表达IL-17a的CRC患者总生存率低于无TAN浸润和低表达IL-17a者(P＜0.05)。高年龄、中高分化程度、淋巴结转移、临床分期Ⅲ~Ⅳ期,TAN浸润、IL-17a高表达是CRC总生存期的独立危险因素。 结论TAN浸润与高表达IL-17a与CRC肿瘤分期、淋巴结转移和较低的总生存率相关,对于判断CRC患者治疗效果及预后具有一定临床价值。     

简易细胞块和细胞芯片的制作方法及应用价值

目的介绍一种石蜡包埋细胞块及细胞芯片的简易制作方法及验证其应用价值。方法收集临床送检细胞学标本,采用简易方法制作成石蜡包埋的细胞块及细胞芯片,HE染色、免疫细胞化学染色及TUNEL检测法验证其应用价值。结果此方法能简易制作出细胞块及60个点阵左右的细胞芯片,经HE染色、免疫组化染色及TUNEL凋亡染色证实,染色效果良好,结果可靠。结论本方法制作的石蜡包埋细胞块及细胞芯片的操作容易,设备简单,细胞形态和抗原保持良好,值得推广应用。