维生素C浸泡羊膜对眼碱烧伤后移植的可用性研究

目的探讨维生素C浸泡羊膜的特性和生物活性物质的改变,以求为维生素C浸泡羊膜在眼碱烧伤羊膜移植中的合理应用提供依据。方法维生素C浸泡新鲜羊膜、保存1月羊膜,分别观察其大体物理特性、光学显微镜观察组织特性、免疫组织化学检测细胞因子的表达。结果维生素C浸泡羊膜与非浸泡羊膜的大体物理特性及光学显微镜观察组织特性无显著差别、部分细胞因子的活性表达无改变。结论维生素C浸泡羊膜不改变羊膜的组织学特性及部分细胞因子的活性,可以方便、安全地应用眼碱烧伤的移植治疗。     

泪道内镜下治疗泪道阻塞性疾病的初步观察

Objective To evaluate the therapeutic efficacy of lacrimal endoscope treatment for lacrimal passage obstruction, and to compare the effectiveness of endoscopically controlled laser surgery and micro-drill surgery for lacrimal passage obstruction. Methods It was a prospective random controlled trial. Eighty nine patients (104 eyes) with lacrimal passage obstruction, including presaccal canalicular obstruction (PSCO) and nasolacrimal duct obstruction (NLDO), were collected from September 2006 to December 2006 in Department of Ophthalmology, Union Hospital of Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology. Patients were examined by endoscopy of the lacrimal drainage system under local anesthesia to detect the obstruction and changes of lacrimal mucous membrane. The obstructions were treated with laser or microdrill. Irrigation was performed to prove the recanalization of the lacrimal passage followed by injected ointment with 0.3% tobramycin and 0.1% dexamethasone into the lacrimal passage. All patients were followed up after the operation for 9-12 months. The difference between the laser and the microdrill treatment was observed. Chi-square test was used to evaluate the curative effect and complications differences between these two groups. Results The obstruction scene in the lacrimal passage of 89 patients could be observed effectively. All obstructions (104/104 eyes) were eliminated after the operation. Through the follow-up, the cure rate reached 78.85% (82/104 eyes). The cure rate of PSCO group and NLDO group, reached 77.78% (42/54 eyes) and 80.00% (40/50 eyes), respectively (χ2=0.077,P=0.782). The cure rate of laser group and micro-drill group, was 80.43% (37/46 eyes) and 77.59% (45/58 eyes), respectively (χ2=0.125,P=0.724). The cure rate of laser treatment was 89.66% (26/29 eyes) in the PSCO group and 64.71% (11/17 eyes) in the NLDO group (P=0.040). The cure rate of micro-drill treatment was 64.00% (16/25 eyes) in the PSCO group and 87.88% (29/33 eyes) in the NLDO group (χ2=4.664,P=0.031). Hemorrhage and palpebral edema occurred in 10.87% (5/46 eyes) and 4.35% (2/46 eyes) after laser treatment, respectively. Percentage of hemorrhage and palpebral edema after the micro-drill treatment was 55.17% (32/58 eyes) (compared to the laser group, χ2=21.969,P=0.000) and 6.90% (4/58 eyes) (compared to the laser group, χ2=0.017 ,P=0.896). Conclusions Lacrimal passage obstruction can be observed and treated directly through the endoscopy of lacrimal drainage system. Choosing an appropriate surgical procedure according to the locations of the obstruction can be helpful for improving the effectiveness of the operation.     

第15例——双眼疼痛并畏光流泪数日

病历摘要 患者女性,30岁.因双眼疼痛、畏光、流泪,右眼20余天,左眼5 d,于2008年4月23 日来华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科就诊.患者既往无外伤史;4年前曾有眼红病史,但诊治情况不详;偶患鼻炎.患者20余天前,于野外活动后无明显诱因,突发右眼红肿、畏光、流泪、眼痛,分泌物稀少,伴有打喷嚏、流涕及咽部不适等表现,在外院诊断为急性结膜炎,行抗细菌联合抗病毒等治疗1周,症状一度好转后又加重;     

HIF-1α在大鼠角膜碱烧伤后的作用研究

目的检测大鼠角膜碱烧伤后缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达变化,探讨其在角膜碱烧伤损伤机制中的作用。方法建立大鼠角膜碱烧伤模型,采用免疫组织化学与原位杂交技术,检测角膜碱烧伤后不同时间HIF-1α在角膜各层中的表达变化。结果在正常角膜组织中,角膜各层均未见HIF-1α免疫染色,碱烧伤后1d时HIF-1α免疫活性增强,且3d时表达最强,15d时明显下降,30d时仍有高于正常水平的弱表达。原位杂交检测中正常角膜组织有极弱的HIF-1α mRNA表达,碱烧伤后HIF-1α mRNA表达增强,在伤后3d、7d时表达最明显,15d后表达强度恢复至正常组织水平。结论HIF-1α参与碱烧伤后角膜的损伤病理机制,其表达变化影响新生血管形成过程,为寻找角膜碱烧伤新的治疗途径提供了理论依据。     

抑肽酶对翼状胬肉成纤维细胞肿瘤坏死因子-α的抑制作用

目的 探讨抑肽酶对由过氧化氯诱导的体外培养的翼状胬肉成纤维细胞存活率及分泌肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的影响.方法 翼状胬肉成纤维细胞原代、传代培养,取第3到第5代细胞做实验.本实验分5组,以不加抑肽酶为对照组,实验组分别加入1500U/ml、3000 U/ml、6000 U/ml、12000 U/ml的抑肽酶,且每组都用过氧化氢诱导,根据作用时间的不同,再分为不同的亚组,分别作用15 min、30 min、60 min、6 h、24 h.以四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测不同质量浓度抑肽酶对细胞存活率的影响;应用ELISA法检测用不同浓度的抑肽酶作用24 h后上清液中TNF-α的含量.结果 ELISA法显示只有当抑肽酶浓度为1500 U/ml、3000 U/ml时能够明显地抑制过氧化氯诱导的翼状胬肉成纤维细胞分泌的TNF-α的量,在过氧化氢作用30min、60 min、6 h、24 h时,其抑制量分别为19.36 pg/ml、38.46pg/ml、56.15 pg/ml、13.84 pg/ml和10.2 pg/ml、31.46 pg/ml、46.15 pg/ml、4.62 pg/ml（P＜0.05）;且在该浓度时MTT法显示抑肽酶对细胞增殖无促进作用.结论 抑肽酶可有效地抑制翼状胬肉成纤维细胞TNF-α的分泌而无促进增殖作用.     

粉防己碱对大鼠角膜新生血管HIF-1α和VEGF表达的影响

目的研究粉防己碱（tetrandrine，Tet）对大鼠角膜新生血管（corneal neovascularization，CNV）缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表达的影响。方法建立大鼠角膜碱烧伤诱发CNV模型，采用裂隙灯照相、免疫组化和RT-PCR等方法，分别检测使用Tet前后HIF-1α和VEGF在SD大鼠CNV中的表达情况。结果在正常角膜，HIF-1α和VEGF没有表达或在上皮基底膜有微弱表达；在新生血管对照组，角膜全层HIF-1α和VEGF表达明显增强，其表达部位主要分布在新生血管形成区域和上皮全层；用药组角膜新生血管密度明显减低，HIF-1α和VEGF相应在角膜基质层新生血管形成区域表达减少。经SPSS软件分析，3组间具有统计学差异。结论Tet可以有效地抑制大鼠角膜碱烧伤诱发CNV的生长，降低角膜新生血管HIF-1α和VEGF的表达。[眼科新进展2007；27（2）：102—105]     

吡格列酮对鼠角膜碱烧伤后新生血管抑制作用的研究

目的:探讨吡格列酮对大鼠碱烧伤后角膜血管内皮细胞生长因子(VEGF),碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)表达的调节作用,以及对碱烧伤后角膜新生血管生长的抑制作用。方法:建立大鼠角膜碱烧伤模型,结膜下注射吡格列酮,观察烧伤后不同时期的角膜新生血管的数量、长度,应用免疫组化和Western blot方法检测碱烧伤后及烧伤治疗不同时期的VEGF,b-FGF的表达变化情况,并与对照组比较。结果:大鼠角膜碱烧伤后2d角膜新生血管开始生长,7～10d达到高峰,吡格列酮治疗后的角膜新生血管的发生延迟,血管的生长受到抑制,VEGF,b-FGF随时间发生变化,表达较对照组下降。结论:局部应用吡格列酮对由碱烧伤引起的鼠角膜新生血管的发生、发展有明显的抑制作用,其机理可能是通过下调促血管生成因子VEGF,b-FGF的表达而实现的。     

反义寡核苷酸对转化生长因子β2刺激的人眼球筋膜囊成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的 研究结缔组织生长因子(CTGF)在滤过泡瘢痕化形成中的作用.方法 对照实验研究.应用二甲基四氮唑盐(M1Tr)法检测脂质体对人眼球筋膜囊成纤维细胞(HTF)活性的影响;用脂质体包裹CTGF的反义寡核苷酸(ASODN)处理经转化生长因子β2(TGF-β2)刺激的HTF,然后用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫细胞化学法检测纤维连接蛋白(Fn)的合成,用RT-PCR和免疫印迹法检测CTGF的表达.结果 3个不同浓度组的脂质体作用HTF后,其吸光度(A)值分别为0.178±0.069、0.196±0.071、0.141±0.036,与正常对照组(0.202±0.073)比较,差异无统计学意义(F=1.65,P＞0.05);单纯的TGF-β2刺激组(T组)与加入了脂质体的TGF-β2刺激组(D组)分别从基因和蛋白水平比较CTGF和Fn的表达,差异无统计学意义(t=0.90,2.32,0.75,2.11;P＞0.05);转染12 h后CTGF与Fn的Mrna水平比较,脂质体介导的CTGF反义寡核苷酸治疗组(A组)的相对灰度RI值明显高于脂质体介导的CTGF正义寡核苷酸对照组(S组)和D组(F=15.25,19.73;P＜0.05);CTGF与FN的蛋白表达水平与Mrna表达水平相一致.结论 CTGF的ASODN能够抑制TGF-β2对HTF表达CTGF和Fn的刺激作用.     

HIF1α在大鼠碱烧伤角膜新生血管形成中的表达

目的探讨碱烧伤后角膜新生血管形成过程中缺氧诱导因子1(HIF1α)的表达及作用。方法使用碱烧伤诱导大鼠角膜新生血管模型,将25只SD大鼠随机分成5组:每组5只,右眼作为正常对照组,左眼作为实验组,每日用裂隙灯显微镜观察角膜新生血管,分别计算角膜新生血管面积,并行免疫组织化学检测和统计学分析。结果正常大鼠角膜HIF1α、VEGF没有表达或在上皮基底膜有微弱表达,新生血管组角膜全层HIF1α、VEGF表达明显增强,其表达部位主要分布在形成的新生血管区域和上皮全层。结论本实验HIF1α表达水平与角膜新生血管有明显相关性。     

TGF-β1诱导体外培养角膜成纤维细胞结缔组织生长因子的表达

目的观察转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)对体外培养的角膜成纤维细胞结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)的诱导表达作用。方法体外培养的角膜成纤维细胞分实验组和对照组,对照组弃原培养液,加无血清培养液继续培养,实验组用不同浓度的TGFβ1(0.1μg·L-1、1μg·L-1、10μg·L-1)处理24h,用RTPCR方法检测角膜成纤维细胞CTGFmRNA的表达情况。结果1μg·L-1和10μg·L-1TGFβ1处理组CTGF/GAPDH像素比值分别为0.35±0.05和1.25±0.10,均较对照组高(0.13±0.02),差异具有统计学意义,同时CTGF/GAPDH比值随TGFβ1浓度增加而增加。结论TGFβ1可以诱导角膜成纤维细胞CTGF的表达,在角膜成纤维细胞中CTGF也可能是TGFβ1对细胞起作用的下游信号分子。