密花香薷挥发油经活性氧-线粒体途径诱导SMMC-7721细胞自噬性死亡

目的 探讨密花香薷挥发油诱导肝癌SMMC-7721细胞死亡的作用及机理。方法 设置三个处理组,使密花香薷挥发油处理终浓度为20、40μg/ml和60μg/ml,以1% DMSO为对照。采用AO-EB染色和Annexin-V/PI双染流式细胞术分析细胞死亡率;化学荧光法检测细胞内ROS相对含量和线粒体膜电位;通过透射电子显微镜观察细胞超微结构;Western blot检测自噬相关蛋白Beclin 1和LC3的表达量;采用SPSS 17.0进行ANOVA方差分析,Duncan法进行多重比较。结果 AO/EB双染和Annexin-V/PI双染流式细胞术结果表明,随着密花香薷挥发油浓度增加,SMMC-7721细胞的死亡率增高（F=132.100, Ρ<0.001）;SMMC-7721细胞内相对ROS水平升高,差异有统计学意义（F=61.580,P<0.001）,而线粒体膜电位下降（F=64.300,Ρ<0.001）;透射电子显微镜观察SMMC-7721细胞内出现自噬体;Western blot检测结果显示,随着密花香薷挥发油处理浓度的增加,自噬相关蛋白LC3-Ⅰ（F=504.100,Ρ<0.001）、LC3-Ⅱ（F=184.500,Ρ<0.001）和Beclin 1水平上调（F=58.690,Ρ<0.001）。结论 密花香薷挥发油可通过活性氧-线粒体途径诱导SMMC-7721细胞自噬性死亡。