Raji 细胞系特异性Fab噬菌体抗体库的构建及筛选

目的构建针对B细胞淋巴瘤Raji细胞系噬菌体抗体库并从中筛选出特异性的抗体。方法以Raji细胞免疫BALB/c小鼠,RT-PCR法从脾淋巴细胞中扩增抗体轻链к和重链Fd基因。经SacI/XbaI和XhoI/SpeI双酶切,依次克隆入噬菌体载体pComb3H-SS中,并电转化大肠杆菌XL1-Blue,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染,构建B细胞淋巴瘤Raji细胞系特异性Fab噬菌体抗体库。以Raji细胞为抗原进行筛选,获得抗Raji细胞的抗体,通过ELISA法进行抗原结合活性的测定,并对所得阳性克隆进行基因测序分析。结果构建了容量为2.18×107的抗人B细胞淋巴瘤Raji细胞系的Fab噬菌体抗体库,并筛选获得了与Raji细胞系特异性识别结合的8株阳性克隆。对其中两个阳性克隆进行基因序列分析,结果显示其重链可变区、轻链可变区分别与免疫球蛋白基因库中已注册的鼠源性免疫球蛋白重链可变区和轻链可变区序列具有高度同源性。结论成功地构建Fab噬菌体抗体库并筛选出针对Raji细胞系膜抗原的抗体,为进一步研究B细胞淋巴瘤的免疫治疗提供了实验基础。     

医疗项目叠加法在我院病种成本核算实践中的应用

随着我国医疗卫生体制改革的不断深入,全成本核算的重要性逐渐凸显。新《医院财务制度》、《医院会计制度》也要求医院进行单病种成本核算。笔者探讨了应用医疗项目叠加法核算病种成本的理论基础和框架,列出了实践中的具体应用过程,并与其他病种成本核算方法进行比较,指出了医疗项目叠加法的优缺点。     

2012~2014年医院感染现患率调查分析

目的通过连续性现患率调查分析医院感染管理中存在的问题,以便采取有效反馈措施,降低医院感染率。方法按卫生部全国医院感染监测网制定的医院感染现患率调查方案,采用床旁调查与病历查阅相结合的方法,对2012~2014年住院患者进行医院感染现患率调查。结果2012~2014年共调查住院患者958例,发生医院感染14例,感染率为1.5%;2012~2014年现患率分别为1.39%、2.22%、0.85%,差异无统计学意义;医院感染部位主要为呼吸道感染,医院感染高发科室为ICU、普通内科;抗菌药物使用率为26.10%,以治疗用药为主;分别为34.38%、30.16%、15.67%,治疗使用抗菌药物送检率分别为62.69%、69.12%、78.95%;医院感染病原菌以革兰氏阴性菌为主。结论通过严格执行消毒隔离措施,不断提高手卫生依从性,减少侵入性操作,合理使用抗菌药物,及时病原学送检,是现阶段医院感染控制的重点工作。     

临床耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学特征研究

目的 分析近5年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药特性及其携带碳青霉烯酶基因等分子流行病学特征,为有效控制院内感染提供依据。方法 收集2012年1月-2016年12月苏州大学附属第二医院临床标本中分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,用最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)法、KB法分析菌株对抗菌药物的敏感性,用改良碳青霉烯灭活试验检测产碳青霉烯酶表型,并通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)筛选blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM和blaOXA48碳青霉烯酶基因,通过脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)和多位点序列分型(multiple locus sequence typing, MLST)检测细菌的同源性和相关遗传性。统计分析相关患者临床资料。结果 共分离到82株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,主要来源于呼吸道43株(52.44%),中段尿12株(14.63%),血液10株(12.20%),无菌体液8株(9.76%),分泌物8株(9.76%),导管1株(1.22%),对头孢菌素类和β-内酰胺类抗菌药物表现为高度耐药(85.4%~100%),碳青霉烯灭活试验阳性率为84.1%。PCR检测到71株细菌携带碳青霉烯酶基因,包括KPC阳性56株(78.87%)、NDM阳性10株(14.08%)、IMP阳性4株(5.64%)、VIM阳性1株(1.41%)。感染患者主要集中在重症监护室(ICU)病区(41株,50.00%)和神经外科(14株,17.07%)。2016年检出的32株中有23株(71.9%)PFGE呈高度同源性,且MLST分型均为ST11,其余7株为ST64型(21.9%),2株为ST23型(6.2%)。结论 本院肺炎克雷伯菌主要分布于ICU,以呼吸道标本检出率最高,对碳青霉烯类耐受主要由于产KPC酶,需进一步加强临床耐药细菌的监测,为临床合理使用抗菌药物和严格执行消毒隔离措施提供参考依据。     

个性化优质护理在甲状腺手术患者围手术期的应用效果观察

目的观察个性化优质护理在甲状腺手术患者围手术期的应用效果。方法选择我院2012年个性化优质护理实施后的甲状腺手术患者126例,作为观察组,2011年1至12月121例优质护理实施前的甲状腺手术患者为对照组,采用焦虑自评量表（SAS）、VAS疼痛评分及白行设计的满意度调查表,比较两组护理效果,同时对心率、血压异常情况、并发症发生率进行比较。结果观察组平均术后疼痛评分、术后焦虑评分均低于对照组;观察组术中血压异常、心率异常发生率分别为9．52％、16．67％,对照组分别为27．27％、38．84％,观察组血压异常与心率异常发生率明显低于对照组;观察组满意107例,基本满意18例,总体满意率为99．21％,对照组满意56例,基本满意44例,总体满意率为82．64％,两组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论个性化优质护理使护理T作更具针对性,目的更明确,从而可达到事半功倍的效果,提高患者的满意度。     

畸变产物耳声发射对310例新生儿听力筛查的结果分析

目的: 探讨畸变产物耳声发射应用于新生儿听力筛查的可行性。方法: 用CJY OAE 2000 1耳声发射仪对 310例新生儿进行听力筛查。结果: 310例新生儿中有 272例通过初筛, 35例通过复筛, 总通过率为 99. 03%, ABR确诊听力障碍 1例。结论: DPOAE筛查对新生儿听力是一种快速、有效、简便、客观的方法。     

RNAi的作用机制及抗病毒研究进展

由于RNAi具有特异性的抑制甚至关闭相关序列基因表达的特点,已应用于重大传染病治疗、肿瘤治疗、基因功能研究和新基因的发现等领域．现对近年来有关RNAi的机制、抗病毒应用及前景作一综述．     

2018—2020年多中心腹腔感染分离菌分布及耐药性分析

摘要：目的 了解全国11家三级医院腹腔标本分离细菌的分布和对主要抗菌药物的敏感性变化,为临床治疗提供参考依 据。方法 用WHONET5.6软件分析来自全国11家三级医院2018—2020年腹腔标本分离的菌株资料。结果 3年内从腹腔标本 中共分离细菌18602株,革兰阴性杆菌占57.6%,居前五的细菌分别是大肠埃希菌(23.4%)、屎肠球菌(11.9%)、肺炎克雷伯菌 (11.9%)、粪肠球菌(6.0%)、铜绿假单胞菌(4.5%)。药敏结果显示,肠杆菌目细菌对阿米卡星和碳青霉烯类抗生素敏感性较好, 肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率逐年上升,2020年对厄他培南的耐药率分别达到15.6%和11.1%,大肠 埃希菌对左氧氟沙星和环丙沙星耐药率的耐药率较高(58.0%~69.7%)。非发酵菌中,铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌对常用抗 生素均保持较好的敏感性,鲍曼不动杆菌对大部分抗生素都高度耐药(超过60%)。未发现万古霉素耐药的葡萄球菌,屎肠球菌 和粪肠球菌对万古霉素耐药率分别为0.6%~1.6%和0~0.9%。 结论 全国11家三级医院腹腔标本分离细菌以肠源性病原菌为主, 最常见的是大肠埃希菌、屎肠球菌、肺炎克雷伯菌和粪肠球菌;常见病原菌对多种抗菌药物耐药,临床经验性使用抗菌药物前 应参考耐药监测结果。     

妊娠期中药应用安全性评价的思路与策略

中药在妊娠期女性中应用广泛,其应用安全风险大多未知,这给临床决策带来很多困扰。我国尚未根据中医药的特色建立妊娠期中药应用安全性评价体系,随着中医药的不断发展,对妊娠期使用中药的风险进行评估的方法学问题日渐凸显。该文概述妊娠期使用中药的现状,对中药的临床前研究与临床研究进行分析,结合国外妊娠暴露登记研究的策略,探讨妊娠期中药应用安全性评价的思路,以期为孕妇提供风险评估与用药指导,为中药妊娠期安全性评价体系的建立奠定基础。     

微波治疗儿童慢性咽炎40例

目的:探讨微波治疗儿童慢性咽炎的疗效。方法:慢性咽炎患儿40例,男26例,女14 例,年龄5~15岁,病程3个月~2年,均采用微波烧灼咽部增生淋巴滤泡。结果:治疗1~ 3 次后,治愈28 例,总有效率92.5%。结论:微波治疗慢性咽炎的同时积极治疗并发的鼻炎、鼻窦炎、扁桃体炎等,能取得较好疗效。