关于改进组织学实验教学的几点思考

组织学是一门研究机体微细结构及相关功能的重要学科，是学习其它医学课程的基础。其课程分为理论课和实验课两部分，其中实验课是学习该门课程的重要部分，其教学水平的高低，教学效果的好坏直接影响和制约着整个学科的教学质量。为此，我们必须大力提高实验教学质量，就笔者参加本学科实验教学的亲身经历，总结以下几点体会：     

组织学实验教学中融入互动式教学法探讨

组织学是一门重要的医学基础课程,它为学习其他基础医学课程和临床学科奠定了必要的形态学基础,而实验教学是整个教学过程中的重要环节.为加强组织学实验教学效果,在组织学实验教学过程中融入了互动式教学法,通过多种方式加强师生互动,有利于激发学生学习兴趣,培养学生自主学习的能力和创新能力,明显提高了组织学教学质量.     

关于加强组织学小专业实验课教学的几点体会

组织学与胚胎学是基础医学中的一门主干课程,对于初学者而言,其内容抽象,知识繁杂,且难学难记,许多学生都感到难于理解。今年我院2008级小专业入学学生有接近半数为文科生;以前从未学过生物;加之入学时间较晚,故教学学时相对不足（仅为14周）,教学进度较快,学生对于理论知识的理解就更不容易,因此,在实验教学中通过观察切片强化理论知识、增强形态观念、理论联系实际就成为了一项更加重要的环节。经过全体师生的共同努力,切片考试平均成绩显著提高,为此,实验教师总结了在小本科教学中的几点体会,希望能为提高教学质量提供一点思路。     

大鼠非酒精性脂肪肝模型构建的方法探讨

目的建立大鼠非酒精性脂肪肝动物模型,为深入探讨非酒精性脂肪肝的发病机制及药物治疗提供实验参考。方法取Wistar大鼠60只,随机分为对照组15只（常规饮食喂养）,模型组45只（高脂、高胆固醇饮食组）喂养,12周后处死动物取出肝脏,经H-E染色、组织化学与免疫组织化学染色观察造模情况。结果模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,eNOS免疫组化显示肝中央静脉和门管区内皮细胞呈强阳性。结论高脂、高胆固醇饮食是诱导非酒精性脂肪肝形成的重要诱因,降低其摄入是有效预防该疾病的重要措施,此外eNOS在病变早期起到减轻肝损伤的作用。     

组织学考试方法改革探索

为正确评价学生应用知识解决问题的能力,突出培养具有创新能力的医学人才,教研室通过平时阶段性考试、绘图作业、随堂抽问、综合性实验考试、理论闭卷考试等多元化考试形式,以基础知识为主、突出学生综合能力与创新能力的考核内容为导向,总成绩等于综合理论考试占70％（期末理论占60％,课堂提问10%）＋综合标本考试占30％（期末多媒体标本考试10％,组织芯片考试10％,平时随堂考核与绘图作业10%）的评价方式,创立了科学的组织学考试模式,使成绩结构多样化、考试形式多元化,能更真实地反映学生的学习情况,也提高了教学质量。     

神经干细胞培养及其影响因素

背景：神经干细胞移植治疗是中枢神经系统损伤性、难治性疾病研究的热点。如何有效提高神经干细胞存活率、克隆形成率将是其应用的重要基础和前提。目的：探讨影响神经干细胞培养质量的可能因素,为神经干细胞的基础和临床应用研究提供参考。方法：①神经干细胞分离和培养：分离出生24h内SD大鼠的大脑,剪碎离心后以1×108L-1的浓度接种,经含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基预培养4h后改用无血清条件培养基（DMEM/F12,碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、B27）培养,2d或3d换液1次,6d时传代。②神经干细胞鉴定：倒置显微镜下观察细胞形态及生物学特性;免疫组化检测第3代细胞神经巢蛋白表达和诱导分化后神经元特异性烯醇化酶和神经胶质酸性蛋白的表达。结果与结论：出生24h的新生大鼠可获得足量的神经干细胞;血清预培养可提高神经干细胞的增殖和存活率;免疫组化结合血清诱导分化可对培养的神经干细胞进行定性鉴定。取材时间、细胞接种密度、传代时间、细胞因子、血清等多种因素都将影响神经干细胞的培养质量。     

卵泡发育与其细胞凋亡

凋亡是生物体内普遍存在的一种生理性细胞死亡.增殖与凋亡的相互平衡是维持组织器官生理功能所必须的,过度增生或不适当的凋亡都将对生物体产生影响,卵泡在其发育过程中,有99%要出现闭锁,现在的研究发现细胞凋亡是卵泡闭锁的根本机制[1].     

关于加强医学发育生物学教学的几点思考

医学发育生物学是研究人体从胚胎发生、生长发育至衰老死亡的生命过程中所发生的变化和规律的科学，是传统胚胎学的深入和发展，也是发育生物学的一个重要组成部分。我院从2002年开始开设了《医学发育生物学》这门课程，目前，这门学科的教学模式尚处于探索过程中，课程建设这一重要问题已摆在我们面前，笔者参加了这门学科的教学工作，总结以下几点体会。     

小鼠精原干细胞染色体G带显示及其影响因素

背景:精原干细胞技术的快速发展为生殖工程带来了新希望,而在体外维持染色体数目及结构的稳定性是其使用的关键问题之一。目的:探索精原干细胞染色体G带显示技术及其影响因素,为如何鉴定培养状态下干细胞的染色体核型提供实验参考。设计:观察实验。单位:泸州医学院材料:实验于2004-03/2005-04在泸州医学院医学分子生物学实验室完成。生后10d左右的昆明系小白鼠(雌雄均可)由泸州医学院动物科提供(许可证号:川实动管质第17号),低糖DMEM,10mg/L丝裂霉素C,IMDM培养基,1×10-5mol/L秋水仙素(磷酸缓冲液配置),7.5mmol/L低渗氯化钾,甲醇:冰醋酸(3∶1)固定液,Giemsa染液,0.25%胰蛋白酶。方法:取小白鼠股骨骨髓,进行饲养层细胞的制备。取生后7～8d左右雄性小白鼠睾丸并制成细胞悬液,调整细胞密度为3×105L-1,接种到预先制备好的骨髓基质细胞饲养层上,细胞在37℃、体积分数0.05的CO2、70%湿度的二氧化碳培养箱中培养。待细胞生长到15～20d时,吸出克隆细胞团,吹打分散后滴加秋水仙素处理4～6h。收集细胞悬液,再经低渗处理后滴片染色。选择染色体分散良好,无重叠的分散中期的细胞进行记数,观察染色体形态。主要观察指标:骨髓基质及精原干细胞的培养及染色体显色与计数。结果:精原干细胞的核型与正常小鼠体细胞的染色体形态一致,染色体呈粒状、棒状,核型为20对,40条。在油镜下镜检可见3种染色体形态,一种呈高浓缩状态的染色体,可计数染色体总数,但不能显出带纹;第2种是已完全展开并铺于赤道板上的处于分裂中期的染色体,染色体总数和带纹显示都非常清楚;第3种是染色体已折转并向两极移动,并逐渐开始浓缩,染色体总数可以计数,带纹不能清楚显示。结论:小鼠精原干细胞染色体受到细胞所处的分裂时期、低渗处理的效果、滴片时细胞的分散程度及胰酶浓度及消化时间等因素的影响。     

不同宫内缺氧时程对胎鼠神经干细胞增殖的影响及当归保护作用

目的 探讨不同宫内缺氧时程对胚胎大鼠神经干细胞增殖的影响及当归注射液的保护作用. 方法将孕15 d的SD大鼠随机分为9组:对照组、缺氧3 h组、缺氧6 h组、缺氧9 h组、缺氧12 h组、当归3 h组、当归6 h组、当归9 h组和当归12 h组,每组5只.所有当归组孕鼠经尾静脉注入当归注射液,然后用低张性缺氧模型致胎鼠宫内缺氧;所有缺氧组用生理盐水代替当归注射液,其余同当归组;对照组只注盐水,不缺氧.取胎鼠大脑组织,作Nestin免疫组织化学染色、图像分析.结果 缺氧3 h组、缺氧6 h组和缺氧9 h组阳性细胞较对照组染色增强,数量增多,缺氧12 h组阳性细胞较对照组减少,各缺氧组间比较有统计学差异;除当归12 h组外,其余各当归组阳性细胞较相应缺氧组染色减弱,数量减少;当归12 h组与缺氧12 h组间比较无统计学差异(P＞0.05).结论 一定时程、一定浓度的缺氧可以刺激神经干细胞进入增殖状态,其增殖的强弱与缺氧时程有关,缺氧6 h时达到增殖高峰,缺氧9 h开始降低;长时程缺氧(12 h)会导致神经干细胞减少;当归对一定时程缺氧的胚胎大鼠神经干细胞有一定保护作用,而在缺氧12 h时失去保护作用.