乙型脑炎Vero细胞灭活疫苗毒株的遗传稳定性

目的 研究流行性乙型脑炎Vero细胞灭活疫苗毒种（P3毒株）在生产过程中的遗传稳定性,为疫苗的安全性和免疫原性评价提供依据.方法 检测P3毒株鼠脑传代一代毒株、主种子、工作种子、疫苗及疫苗续传5代后病毒E蛋白基因核苷酸及氨基酸序列,并与GenBank中乙脑病毒P3株（AF036919）进行比对分析,同时比较主种子、工作种子、疫苗及疫苗续传5代后毒株的病毒滴度、抗原含量及效价.结果 以上5代次病毒的E蛋白基因核苷酸及蛋白质序列完全相同,同源性均为100％,与GenBank中乙脑病毒P3株（AF036919）比较显示：核苷酸序列中第E9、E10、E324、E330、E1223、E1338基因位点存在差异,同源性为99.73％,其中只有E1223突变引起相应氨基酸aE408突变（L→S）,同源性为99.80％,但该位点为非毒力相关位点,而其他位点均为沉默突变.4个代次疫苗毒株病毒滴度均≥8.0 lgLD50/ml,且各代次抗原含量及效价较为相似.结论 在生产乙型脑炎灭活疫苗（P3株）过程中建立的以Vero细胞为基质的乙脑毒种库具有良好的遗传稳定性.     

5.12地震后灾民集中安置点甲型流感病毒携带率调查

[目的]了解四川汶川8.O级地震后绵竹灾区灾民集中安置点甲型流感病毒的携带状况,评价前期震后防疫工作效果,为制定灾后重建防疫措施提供建议.[方法]采用随机抽样方法,对绵竹灾区灾民集中安置点采取咽拭子样887份,试剂盒法提取样品RNA,荧光定量PCR法检测甲型流感病毒核酸. [结果]全部样品均为阴性..[结论]震后绵竹灾区防疫工作效果显著,灾后发生流感流行的可能性不大.     

高效液相色谱法测定工作场所空气中对苯二甲酸

目的建立高效液相色谱法测定工作场所空气中对苯二甲酸(PTA)的方法。方法按照《工作场所空气中毒物检测方法的研究规范》要求,对采样、精密度、回收率及样品的保存进行了系统的研究。用玻璃纤维滤纸对空气中气溶胶状态的PTA采样,1 g/L氢氧化钾溶液洗脱、高效液相色谱分离DAD检测。结果方法在1~10 mg/L及10~100 mg/L的浓度范围内均有良好的线性关系,相关系数分别为r=0.999 63及0.999 97,平均相对标准偏差小于5%(n=6),平均回收率为93.7%~98.8%,方法最低检出浓度为0.02 mg/L(S/N=3,进样量10μl),空气中的PTA的检出浓度为0.003 mg/m3(以采样体积75 L计算),为国家卫生标准的0.000 2倍。结论所建立的方法各项指标均符合有关要求,且优于紫外分光光度法,可以满足工作场所空气中PTA的时间加权平均浓度和短时间接触浓度的检测。     

高效液相色谱法测定大鼠血清中4-壬基酚和双酚A

目的 建立高效液相色谱测定血清4-壬基酚和双酚A的方法。方法 大鼠血清样品用正己烷-乙醚混合溶剂(70：30)提取,采用C18色谱柱分离,以乙腈-乙酸铵缓冲液(pH 4．5)(80：20)为流动相,在激发波长227nm、发射波长313nm处用荧光检测器检测。结果 血清中的待测组分的质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,4-壬基酚和双酚A线性范围分别为0．013～5．0 μg／ml,0．004～3．0 μg／ml。本方法的检测限4-壬基酚为13 ng／ml,双酚A为4 ng／ml,加标回收率4-壬基酚为83．8％～100．0％,双酚A为83．3％～100．0％;日内精密度为1．70％～2．70％,日间精密度为2．06％～9．78％。结论 该法适用于血清中双酚A和4-壬基酚质量浓度检测。     

单链探针反向杂交试验技术检测结核分支杆菌链霉素耐药基因

[目的]建立同时检测结核分支杆菌链霉素耐药基因突变的单链探针反向杂交试验技术(PCR-LiPA),同时从分子水平分析结核分支杆菌链霉素耐药性表型与耐药基因rpsL、rrs突变的相关性,评价单链探针反向杂交技术检测结核分支杆菌链霉素耐药性的应用价值.[方法]采集临床标本,按照实验规程培养、鉴定结核分支杆菌,并对分离到的结核分支杆菌进行药敏试验;PCR扩增结核分支杆菌rpsL、rrs耐药基因,单链探针反向杂交试验技术检测耐药基因.将PCR-LiPA方法结果与DNA测序比较验证方法的准确性,将PCR-LiPA方法结果与药敏结果比较.[结果]50株结核分支杆菌传统药物敏感性试验结果显示,15株耐SM.PCR-LiPA方法分析分析结果:耐SM菌株中7株rpsL基因突变、SM敏感株1株rpsl基因突变,rrs基因未发现突变;与DNA测序结果的符合率为100%.[结论]用PCR-LiPA可简便、快速、灵敏、特异地检测出一部分结核分支杆菌链霉素耐药株的rpsL、rrs基因突变,可作为临床结核分支杆菌链霉素耐药性的辅助诊断手段.     

SYBR GreenⅠ实时荧光PCR检测食品中转基因成分方法的初步建立

目的：建赢SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法检测食品中转基因成分35S启动子和NOS终止子,并对样品进行检测。方法：以大豆Lectin基因为内源性基因,以转基因食品中常用的花椰菜花叶病毒启动子（CaMV35S）和根癌农杆菌终止子（NOS）基因为目标基因,设计并合成3对特异性引物,优化反应条件,使用SYBR GreenⅠ染料实时荧光PCR检测35S启动子和NOS终止子,并做熔解曲线分析。同时利用该方法对胡萝卜、青豆、玉米、马铃薯等实际样品进行检测。结果：运用该方法检测8份样品,有4份检出35S基因和NOS基因成分。结论：SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法能有效检测出35S和NOS两种转基因成分,简便、快速。     

绵竹地震灾民集中安置点健康人群脑膜炎奈瑟菌带菌率调查

目的 了解汶川大地震后绵竹灾民集中安置点流行性脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitides,Nm)带菌状况,为预测疫情和制定防治措施提供依据.方法 对绵竹灾区二号桥灾民集中安置点和体育场灾民集中安置点进行单纯随机抽样,采取咽拭子样品887份,采用TaqMan-MGB探针RT-PCR技术以及试剂盒RT-PCR法进行检测.结果 887份咽拭子检出3例阳性.结论 灾区与四川省及全国其它地区往年带菌率相比流脑带菌率较低,发生流脑疫情的可能性不大,说明灾后卫生防疫等相关部实施的防御措施积极有效,但针对灾区实际环境,进一步的卫生防疫工作不可懈怠.     

氢化物发生-原子荧光光谱法测定空气和尿中锡的研究

[目的]建立氢化物发生—原子荧光光谱法测定尿和作业场所空气中锡的方法,研究样品的前处理、载流种类及方法的检出限、线性关系。[方法]微波消解尿样,电热板消化滤膜,用原子荧光光谱法测定锡浓度。[结果]在0～100μg/ml该方法具有良好的线性关系,相关系数r﹥0.999,测定尿液的检出限为0.8μg/L,空气的检出限为0.000 04 mg/m3（以采样量50 L计）,方法相对标准偏差RSD为1.10%～1.85%。[结论]氢化物发生-原子荧光光谱法的方法,灵敏度高,干扰少,线性范围宽,操作简单、快捷,可应用于作业场所空气中锡和尿样中锡的测定。     

基体改进剂在血铅测定中的应用

血铅是诊断铅吸收和铅中毒的一个重要指标。血样是一种基体成分非常复杂的生物材料 ,在血铅测定过程中极易受到基体成分的干扰。为了减少这种干扰 ,人们通常采取消化样品、萃取分离或加入基体改进剂等各种措施[1] 。在石墨炉原子吸收光谱法测定血铅中 ,加入基体改进剂 ,是一种消除基体干扰的简单有效措施。本文以PdCl2 /TritonX 10 0 /HNO3 为基体改进剂 ,不需进行样品的湿消化或酸萃取等复杂的前处理步骤 ,可直接进样 ,用石墨炉原子吸收光谱法测定全血中的铅含量。试验结果显示 ,0 1%PdCl2 / 0 5 %TritonX 10 0 / 0 .1%HNO3 混合液…     

候选无细胞百白破-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗免疫小鼠的效果研究

目的观察候选无细胞百白破-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗(DTaP-sIPV)在小鼠中的免疫原性,为疫苗临床前研究提供依据。方法将候选疫苗分别稀释成5倍、10倍、20倍三组,以相应稀释的无细胞百白破-灭活脊髓灰质炎-b型流感嗜血杆菌联合疫苗(DTaP-IPV/Hib)、无细胞百白破联合疫苗(DTaP)为对照组,每组按0、4、8周3剂免疫程序免疫NIH小鼠(10只/组),检测各组小鼠每剂免疫后28d的血清百白破组分抗体水平。结果候选疫苗三个组完成3剂次免疫后PT抗体的几何平均浓度(GMC)(IU/mL)分别为2 157.29、2 142.51、2 135.17;FHA抗体GMC分别为10 098.30、10 068.33、9 143.30;PRN抗体GMC分别为1 683.86、1 130.29、193.00;DT抗体几何平均滴度(GMT)(1∶)分别为23.48、22.44、22.44;TT抗体GMT分别为22.31、21.24、21.34。候选疫苗三个组PT、FHA、DT、TT抗体水平均高于两种疫苗对照组或者与其无显著性差异,但PRN抗体水平低于DTaP对照组。结论候选疫苗免疫小鼠具有良好的免疫原性。