猪血中脱色球蛋白的制备及其功能性研究

比较了几种拆分剂分离猪血红细胞中血红蛋白的效果，其中羧甲基淀粉（ＣＭＳ）得到最佳效果。脱色球蛋白的功能性实验证实其有良好的起泡和乳化性能，氨基酸分析显示其赖氨酸和组氨酸的含量较高，适合作为婴儿的营养强化剂。     

鸡蛋清中卵转铁蛋白的分离提取

采用固定化金属螯合亲和色谱法(IMAC),从蛋清中分离和提取卵转铁蛋白(OVT).结果表明,采用均质处理蛋清液并结合硅藻土过滤澄清的预处理方法,去除了蛋清中的粘蛋白等一些影响柱分离的杂质蛋白,减轻了色谱柱的污染,延长了柱的使用寿命,从而降低了生产成本.SDS-PAGE电泳分析显示,分离提取的OVT纯度达到96%,远高于商品OVT;电喷雾质谱分析显示,OVT的相对分子质量为76 500.     

猪血免疫球蛋白的分离及功能性研究

使用食品级的多聚磷酸钠（以下简称Ｓｐ）絮凝剂分离猪血浆中的免疫球蛋白，配合随机质心映射优化程序（ＲＣＯ）确定分离最佳条件，并用ＥＬＩＳＡ初步测定了粗制ＩｇＧ的各种功能特性。     

降血压肽前体的设计和克隆及其在大肠埃希菌中的表达

目的 降血压肽(antihypertensive peptide, AP)是一类能降低人体血压的小分子肽,是血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin convering enzyme inhibitor, ACEI),可通过抑制体内血管紧张素Ⅱ的生成达到降低血压的目的 .AP通常含有少数几个氨基酸残基,难以直接表达,因此文中设计含多种降压活性肽段的AP前体(antihypertensive peptide precursor, APP),构建原核表达载体,并在所构建的基因工程菌进行表达. 方法 筛选多种已报道的具有高体内降压活性的AP,经胃肠消化酶酶切位点串联成APP.基于大肠埃希菌偏爱密码子,人工合成相应的多肽基因(app),PCR扩增,克隆至表达载体pET-22b,转化E.coli BL21感受态细胞.重组质粒经双酶切和DNA测序鉴定,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(sopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导表达重组APP. 结果 APP基因正确克隆至表达载体pET-22b中.诱导表达产物经SDS-PAGE分析,显示在相对分子质量11000处出现条带,与预期的重组APP大小相符. 结论 人工设计的APP在大肠埃希菌中获得成功表达,为AP的工业化制备打下基础.     

纤维素金属螯合亲和膜用于蛋清中功能性蛋白质的分离纯化

以纤维素滤纸为载体，通过环氧氯丙烷交联活化、亚氨基二乙酸偶联、金属离子螯舍制备得到亲和膜。应用该膜进行的蛋清蛋白纯化试验结果表明，Cu^2＋亲和膜具有较好的吸附性能和纯化效果，只需采用两步洗脱的方式即可得到具有明显纯化效果的蛋清转铁蛋白和溶茵酶。     

活性蛋黄抗体的毒性试验

通过小鼠急性毒性试验、大鼠急性毒性试验、小鼠嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验及大鼠30d毒试验来评估蛋黄抗体的安全性.试验结果表明,7d内小鼠和大鼠均未出现明显中毒症状和死亡,3项致突变试验结果也均为阴性.大鼠30d长毒试验中临床检查、血像、生化、脏器组织病理学等项目测定均无异常.结论为IgY无急性毒性和致突变性,属安全制剂.     

超滤法提取蛋清溶菌酶

对蛋清料液进行前处理:采用磷酸盐缓冲液稀释10倍,在24MPa压力下均质;对超滤工艺进行了研究,采用截留相对分子质量为30000的聚醚砜(PES)膜进行超滤;溶菌酶制品活力为14610U/mg.