重组粉尘螨Ⅱ类变应原致敏小鼠肺部变应性炎症模型的建立

目的探讨以重组粉尘螨Ⅱ类变应原(rDerf2)建立小鼠肺部变应性炎症模型的方法。方法将30只6～8周龄雌性SPF级BALB/c小鼠,随机分为PBS组(阴性对照组)、卵清蛋白(OVA)组(阳性对照组)和rDerf2组(实验组)。实验组分别于第0、7、14天用rDerf2对小鼠腹腔进行注射致敏;再于第21天开始,连续7d进行雾化激发;对照组分别用PBS和OVA代替。最后一次雾化激发后24h内处死动物,观察肺组织病理变化、支气管肺泡灌洗液(BLAF)中的白细胞计数及分类,用ELISA测定BLAF和脾细胞培养上清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-17和IFN-γ的含量及血清中IgG1、IgE抗体水平变化。结果实验组和阳性对照组BALB/c小鼠肺组织呈现明显的炎症性病理改变;rDerf2组的BALF中白细胞总数〔(17.39±1.03)×106/L〕及嗜酸性粒细胞(EOS)〔(1.61±0.03)×106/L〕计数,均明显高于PBS组(P<0.01);BALF中IL-4〔(78.92±9.06)pg/ml〕、IL-17〔(201.63±31.26)pg/ml〕与PBS组比较呈明显的高水平表达(P<0.01);而IL-2〔(8.29±1.27)pg/ml〕和IFN-γ〔(51.04±15.85)pg/ml〕的含量则显著下降(P<0.01);上述指标在脾细胞培养上清中出现类似的变化。rDerf2组血清中IgE〔(37.63±6.57)IU/ml〕、IgG1〔(16.68±2.90)μg/ml〕的含量表现为Th2型反应增强趋势;但OVA组和rDerf2组间所有指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论用rDerf2腹腔注射致敏后再雾化激发的方式能够成功构建小鼠肺部变应性炎症模型。     

冷凝集对红细胞及其相关参数检测的影响

正血细胞分析是临床最常用的检测手段之一,红细胞(RBC)是血细胞分析中的重要内容。正常血液中的RBC一般呈单个、可流动状态。在某些特殊条件下RBC可大量聚集,造成RBC假性减少。作者在实际工作中遇到1例,现报道如下。1病例资料患者,女,57岁。因呼吸困难、反复咳嗽伴夜间阵发性加剧入院。患者既往身体健康,无输血史、过敏史等。门诊血常规检查:RBC 0.27×10~(12) L~(-1),血红蛋白(Hb)122g/L,血细胞比容(Hct)3.04%,平均红细胞容积(MCV)111.1fL,平均红细胞血红蛋白(MCH)451.9pg,平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)4     

重组粉尘螨变应原第2组分的研究概况

尘螨是最常见的室内变应原来源之一,约80％以上尘螨过敏性疾病患者血清螨特异性IgE可与尘螨变应原第2组分结合.粉尘螨变应原第2组分Der f 2为螨体的组织成分,被认为是诱导哮喘与变态反应性疾病的最重要变应原之一.近年来,变态反应性疾病的发病率呈现逐年增高的趋势,而重组变应原在过敏性疾病诊断和治疗中具有独特的优势和前景,故正日益成为此领域中研究的热点之一.该文就Der f2的生物学特征、重组变应原的制备、免疫学效果及其在特异性免疫诊治中的应用前景予以综述.     

重组粉尘螨Ⅱ类变应原的原核表达及纯化

目的表达并纯化粉尘螨2类变应原Der f 2蛋白,检测其变应原性。方法用1mmol/L的IPTG诱导含重组质粒pET30a-Der f2的大肠埃希菌BL21(DE3),SDS-PAGE电泳检测并纯化目的蛋白,ELISA检测其与尘螨哮喘患者血清IgE的结合活性。结果 SDS-PAGE电泳检测重组质粒pET30a-Der f 2表达产物,其分子质量单位为15ku,与预期大小相符。ELISA检测纯化的Der f 2蛋白可与尘螨哮喘患者血清IgE反应。结论成功获得并纯化了Der f2重组蛋白,该蛋白具有变应原性,为进行尘螨过敏性疾病的变应原特异性免疫治疗的动物实验奠定了物质基础。