多指标综合评分法优选抗感胶囊提取工艺

目的优化抗感胶囊提取工艺。方法采用单因素考察结合正交试验设计法,以方中金银花和连翘的有效成分绿原酸、木犀草苷、连翘酯苷A的含量和浸膏得率为综合评分指标,考察溶剂用量、提取时间、提取次数3个因素对抗感胶囊水提工艺的影响,并进行验证试验。结果最优提取工艺为:加12倍量水,回流提取2次,每次提取1.5h。结论本研究优选的提取工艺简单、稳定可行,对抗感胶囊的生产工艺制定具有一定的指导意义。     

微量元素与缺血性脑血管病患者相互关系探讨

本文测定７５例ＩＣＶＤ患者血清Ｚｎ、Ｃｕ、Ｓｅ、Ｃｒ的含量。脑动脉硬化组２０例，脑血栓形成组５５例，同期选择性别年龄相匹配的健康人２０例作为对照组。研究结果表明：ＩＣＶＤ患者血清Ｚｎ含量及Ｚｎ／Ｃｕ比值高，Ｃｕ、Ｓｅ、Ｃｒ含量下降。经统计学处理，除脑动脉硬化组Ｚｎ含量升高与对照组比较差异无显著性外，其余各项指标差异均有显著性（Ｐ＜０．０５～０、０１）。测定ＺＵ／Ｃｕ比值在病人组较单一元素Ｚｎ、Ｃｕ更有意义（Ｐ＜０．０５）。     

人源抗人免疫缺陷病毒1型噬菌体抗体库的构建及筛选

目的构建人免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）特异性噬菌体抗体库，制备人源抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０单克隆抗体。方法以半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）从ＨＩＶ－１感染者外周血单个核淋巴细胞中扩增抗体重链Ｆｄ和轻链（ｋ）基因，与噬菌体载体ｐＣｏｍｂ３连接，构建噬菌体抗体Ｆａｂ组合文库。对抗体库进行３轮吸附－洗脱－扩增的亲和选择后，以ＥＬＩＳＡ法筛选抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０噬菌体抗体，并进行ＤＮＡ序列分析和Ｆａｂ的可溶性表达。结果半巢式ＰＣＲ有效地扩增出Ｆｄ和ｋ基因，以此构建成容量为１９５×１０７的噬菌体抗体库。３轮亲和选择使特异性抗体得到高度富集，抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０噬菌体抗体阳性克隆占３２％。对一阳性克隆抗体基因ＣＨ１和ＣＬ部分ＤＮＡ序列进行了测定，并在大肠杆菌表达出可溶性Ｆａｂ。结论抗ＨＩＶ－１特异性噬菌体抗体库的构建和人源抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０单克隆抗体的制备为今后筛选抗ＨＩＶ中和抗体奠定了基础，具有重要的应用价值。     

SARS病人外周血T淋巴细胞的动态变化及其在发病进程和发病机理中的意义

目的 :通过研究严重急性呼吸综合征 (SevereAcuteRespiratorySyndrome,SARS)患者外周血免疫细胞的动态变化 ,探讨外周血免疫细胞在SARS发病进程中的意义 ,初步探讨SARS的发病机理 ,并为SARS的诊断和治疗提供有力的实验室依据。方法 :回顾性动态观察我院收治的已治愈SARS病例和SARS死亡病例外周血CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞 ,评估外周血免疫细胞在SARS发病进程及预后中的作用。实验方法为流式细胞术检测和分析免疫细胞表面特异性荧光抗体标记 ,T细胞表面标志组合为CD3 CD8 CD4 5 CD4。结果 :所有治愈的SARS病人的CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞都有不同程度的可逆性下降 ,而所有的死亡病例有不可逆性显著下降 ,直至死亡。T细胞下降程度和维持的时间与病情密切相关。普通型SARS病例最低CD4 + T淋巴细胞数为 30 5± 15 0cells μl(P <0 .0 0 1)、重型为 139± 6 9cells μl(P <0 .0 0 1) ,普通型SARS病例最低CD8+ T淋巴细胞数为 2 2 3± 89cells μl(P <0 .0 0 1)、重型为 171± 92cells μl(P <0 .0 0 1)。所有普通型病例和大部分重型病例T淋巴细胞恢复正常 ,个别重型病例低于正常或接近正常 ,恢复后普通型平均为 991± 2 86cells μl,重型平均为 5 4 5± 2 2 5cells μl。恢复时间有所不同 ,普通型平均为 17± 5天     

利用统计学方法消除检验延误对大鼠致癌试验凝血指标的干扰

目的利用析因分析、偏相关和多元回归分析判断与消除检验延误(时间因素)对大鼠致癌试验凝血指标的干扰。方法对照、低、中、高剂量4个实验组共168只Wistar雌性大鼠致癌试验期满后(104周)以磁珠法检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)。采用析因分析方法并结合偏相关和多元回归分析对采血后3~24 h内完成检测的数据进行分析。结果析因分析显示,APTT分别受时间和剂量的独立影响,TT受时间影响并与染毒剂量存在交互作用,PT亦受时间影响。偏相关和多元回归分析显示,APTT、TT分别与时间有相关性,并入选APTT、TT的回归模型;PT与时间无相关性,亦无法建立回归模型,由此判断因检验延误延长了APTT和TT,产生干扰的时间节点为5 h。剔除问题数据后对照、低、中、高4个实验组APTT均值分别下降了1.85%、4.56%、20.08%和30.45%,TT分别下降了4.01%、6.78%、11.76%和16.64%。结论联合使用析因分析、偏相关和多元回归分析可识别和消除检验延误对大鼠致癌试验凝血指标APTT和TT的干扰。     

孤立性肺结节影像特征和误诊分析

目的探讨误诊的孤立性肺结节CT的影像特征,与病理结果对照,并分析误诊原因。方法选取CT诊断错误的30例孤立性肺结节病例,回顾性分析病灶的位置,大小,形状,内部密度,强化特点及影像学特征,以此分析其发生误诊的原因。CT误诊为恶性肿瘤为假阳性组,反之为假阴性组。结果1)结节分布:假阳性组病灶位于右肺上叶3例,右肺下叶4例,左肺上叶4例。假阴性组累及右肺上叶6例,右肺中叶1例,右肺下叶4例,左肺上叶4例,左肺下叶4例;2)强化特点:假阳性组表现为轻度强化4例,中度强化1例,重度强化1例。假阴性组表现为轻度强化1例,中度强化2例,重度强化1例;3)影像特征:假阳性组表现为分叶征7例,毛刺征8例,血管征象6例,胸膜牵拉3例,空泡征0例。假阴性组出现分叶征6例,毛刺征9例,血管征象15例,胸膜牵拉5例,空泡征5例。结论假阳性组误诊原因为病灶出现较多恶性征象,可通过对一些恶性征象的良性特征进行分析,假阴性组多因较少表现出明显的恶性征象而误诊,对血管有无侵犯以及空泡征等早期征象可以辅助诊断,但仍需穿刺活检以明确诊断。     

丙型肝炎病毒不同基因型核心蛋白对肝母细胞瘤细胞凋亡影响的比较

目的比较HCV不同基因型核心蛋白(core)在肝母细胞瘤细胞凋亡中的作用。方法构建6a基因型HCV core的表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)-core(6a)[pCore(6a)];分别将1b、3a和6a基因型HCV core质粒以及空质粒pcDNA3.1/myc-His(-)(pNC)瞬时转染HepG2细胞,48小时后利用流式细胞术检测细胞凋亡发生的情况;利用Real-time PCR检测胱冬肽酶-3的mRNA水平变化;利用化学发光法检测胱冬肽酶-3的活性变化,比较HCV不同基因型core对细胞凋亡作用的差异。结果成功构建了6a基因型HCV core的表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)-core(6a)[pCore(6a)];与pNC组相比,表达1b、3a和6a基因型HCV core的HepG2细胞中,Annexin V+细胞数均显著减少,其中6a基因型core较1b和3a基因型core作用显著(P=0.000、0.001);同时实验组中凋亡效应分子胱冬肽酶-3的mRNA水平及其活性较对照组均降低;其中与1b和3a基因型core相比较,6a基因型core显著降低胱冬肽酶-3的mRNA水平,而在抑制胱冬肽酶-3活性方面无显著差别。结论 HCV不同基因型core对细胞凋亡的作用不同;基因6a型core对细胞凋亡的抑制作用更为显著;HCV基因6型核心蛋白可能更易导致肝癌的发生,有待进一步研究。     

胰腺癌表观扩散系数与纤维化含量、成纤维细胞活化蛋白表达相关性研究

目的：探讨高场磁共振扩散成像表观扩散系数（ADC ）值与纤维化含量、成纤维细胞活化蛋白（FA P ）表达评分的相关性。方法对18例经病理证实的胰腺癌患者进行3．0T MRI平扫及扩散加权成像（DWI）扫描,使用单一层面法选取感兴趣区（ROI）测量癌区ADC值,并对胰腺癌患者的蜡块进行Masson染色及FAP免疫组化染色,采用 Pearson相关分析检验ADC值与纤维化含量、FA P染色评分的相关性。结果胰腺癌区的ADC值与纤维化含量呈负相关（ r＝－0．459）,但无统计学意义（ P＝0．056）,中～高分化组ADC值与纤维化含量呈负相关（ r＝－0．564,P＝0．044）。ADC值与 FA P染色评分呈负相关（ r＝－0．479,P＝0．036）。结论胰腺癌的ADC值与其病理参数间呈负相关,DWI有望对胰腺癌的病理特征实现定量成像,有助于进一步了解其病理特征。