大肠癌转移相关的生物学指标研究进展

大肠癌转移是个复杂的过程，也是肿瘤患者致死的主要原因。因此，预测患者远处转移的风险对于判断预后及指导综合治疗具有重要意义。目前有关大肠癌转移相关的生物学指标的研究进展迅速，据报道已有几十种生物学指标与大肠癌转移相关。现综述几个有代表性指标的研究进展以及这些指标在大肠癌转移过程中的作用机制。     

小儿败血症革兰阳性病原菌构成及耐药性

目的了解湖南地区小儿败血症中革兰阳性病原菌的构成及耐药性。方法对2007年1-11月临床疑为败血症的患儿无菌抽取静脉血,用全自动血培养仪BACTEC9120或BacT/ALERT3D120进行培养,用全自动微生物分析仪VITEK2compact进行病原菌鉴定和药敏试验。结果8 264份不同患儿血液标本有876例检出病原菌,阳性率10.60%,其中革兰阳性球菌有22个菌种,计334株,占检出菌38.13%,排前6位的是人葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、肺炎链球菌。葡萄球菌对青霉素、红霉素、苯唑西林耐药性高,对替考拉宁、万古霉素、亚胺培南高度敏感;链球菌对克林霉素、红霉素、青霉素耐药性高,对苯唑西林、环丙沙星、替考拉宁、万古霉素、亚胺培南高度敏感。结论湖南地区小儿败血症以28 d~1岁组感染率最高,但新生儿败血症以感染凝固酶阴性葡萄球菌为主。加强细菌学检测,减少耐药菌株的产生。     

新生儿感染肺炎克雷伯菌的喹诺酮类耐药株gyrA基因研究

目的了解湖南地区新生儿感染肺炎克雷伯菌染色体介导喹诺酮类耐药基因gyrA基因的流行情况。方法采用PCR法对20株肺炎克雷伯菌进行gyrA基因检测,采用法国生物梅里埃公司生产的VITEK2-COMPACT全自动细菌鉴定检测16种抗菌药物的体外抗菌活性,PCR扩增产物经纯化后测序并进行序列分析。结果 gyrA基因耐药决定区的突变,其中17株都有第83位的改变,3株发现有第87位的改变。结论本省儿童感染肺炎克雷伯菌染色体介导喹诺酮类耐药基因gyrA基因突变情况十分普遍,监测其突变频率、位点对指导临床用药及耐药机制研究十分重要。     

儿童感染肺炎克雷伯菌的喹诺酮类耐药株gyrA及parC基因突变分析

目的 了解湖南地区儿童感染肺炎克雷伯菌的耐药趋势,以及由染色体介导喹诺酮类耐药基因gyrA及parC的流行及变异情况,为治疗儿童肺炎克雷伯菌感染提供依据.方法 以VITEK-2Compact全自动微生物系统检测分离菌株的耐药性,采用PCR法对36株耐喹诺酮类肺炎克雷伯菌进行gyrA及parC基因检测,PCR扩增产物经纯化后测序并进行序列分析.结果 发现36株耐喹诺酮类肺炎克雷伯菌均发生了gyrA基因耐药决定区的突变,其中33株有第83位丝氨酸的改变,3株发现有第87位氨基酸的改变,而parC基因在所有耐药株中均有第80、91位氨基酸的改变.结论 儿童感染肺炎克雷伯菌染色体介导喹诺酮类耐药基因gyrA及parC基因突变情况十分普遍,监测其突变频率、位点对指导临床用药及耐药机制研究十分重要.     

ICU儿童感染肺炎克雷伯菌的喹诺酮类耐药株parC基因研究

目的了解湖南地区新生儿感染肺炎克雷伯菌染色体介导喹诺酮类耐药基因parC基因的流行情况。方法采用PCR法对26株肺炎克雷伯菌进行parC基因检测,采用法国生物梅里埃公司生产的VITEK2-COMPACT全自动细菌鉴定检测16种抗菌药物的体外抗菌活性,PCR扩增产物经纯化后测序并进行序列分析。结果 parC基因在所有耐药株中均有第80、91位氨基酸的改变。结论本省ICU儿童感染肺炎克雷伯菌染色体介导喹诺酮类耐药基因parC基因突变情况十分普遍,监测其突变频率、位点对指导临床用药及耐药机制研究十分重要。     

儿童医院重症监护室分离肺炎克雷伯菌株的耐药性分析

目的了解儿童医院重症监护室(ICU)分离肺炎克雷伯菌及耐药情况,为临床治疗及ICU感染的控制提供依据。方法对儿童医院2007年4月至2008年5月临床检出菌,用法国生物梅里埃系统鉴定及药敏分析,并用双纸片法对ICU分离的肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(extend-spectrumβ-lactamases,ESBLs)检测,同时对产ESBLs及非产ESBLs菌株进行耐药性分析。结果 ICU病房总共检出肺炎克雷伯菌108株,其中检出ESBLs阳性菌株73株,产酶率为67.59%。对12种抗生素进行药敏试验,耐药率最低的是亚胺培南,其次是环丙沙星。结论 ICU病房等免疫力低下的患者是肺炎克雷伯菌的易感人群,且以呼吸道感染为主。治疗感染产ESBLs肺炎克雷伯菌的有效药物为抗生素与酶抑制的复方制剂和亚胺培南。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在鉴定儿童血流感染少见苍白杆菌的应用及耐药情况分析

目的 快速鉴定和分析儿童血流感染少见苍白杆菌及其耐药情况分析。 方法 收集某儿童医院儿童血流感染的临床标本中分离的苍白杆菌26株,运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术,对其进行检测,并结合测序结果分析确定菌株;根据药敏实验结果,用PCR法分析其耐药情况。 结果 26株实验菌株最后通过MALDI-TOF MS和16S rRNA基因测序技术,有25株被鉴定为解糖精假苍白杆菌,药敏结果显示它们对哌啦西林/他唑巴坦、喹诺酮类、氨基糖苷类和复方新诺明的耐药率为0.0%。而对氨曲南耐药率为100.0%,其他β-内酰胺类抗菌药物有不同的耐药率。AmpC和AmpR耐药基因检测均为阴性。 结论 MALDI-TOF MS能够快速鉴定临床少见苍白杆菌,儿童血流感染的解糖精假苍白杆菌不产头孢菌素酶,结合药敏分析结果及儿童用药特点,建议使用哌啦西林/他唑巴坦。     

MALDI-TOF MS在新生儿血流感染恶臭假单胞菌同源性分析中的应用

目的 探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术在新生儿血流感染恶臭假单胞菌同源性分析中的应用。方法 收集湖南省儿童医院新生儿病区7株新生儿血流感染恶臭假单胞菌株,利用VITEK-Compact 2检测药敏结果;运用MALDI-TOF MS及SARAMIS软件检测及分析该批恶臭假单胞菌的同源性;同时运用全基因测序(whole genome sequencing, WGS)的方法来验证MALDI-TOF MS分析结果。结果 7株恶臭假单胞菌对头孢三代以上抗生素及碳青酶烯类抗生素均不敏感,对阿米卡星及左氧氟沙星都敏感。通过运用MALDI-TOF MS及SARAMIS软件发现该7株恶臭假单胞菌为同一型的相对相似度在80%-90%之间。WGS分析发现:该7株恶臭假单胞菌多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)均为128型,平均核苷酸相似度(average nucleotide identity, ANI)>99.9%。结论 本次研究的7株恶臭假单胞菌有相似的耐药表型,MALDI-TOF MS发现他们为同一型的相对相似度在80%-90%之间,WGS验证他们为同一菌株来源;MALDI-TOF MS可以对恶臭假单胞菌进行初步、快速的同源性分析。     

双歧杆菌脂磷壁酸对不同大肠癌细胞株转移能力及VEGF表达的影响

目的 研究双歧杆菌脂磷壁酸(ipoteichoic acid,LTA)对血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)表达及其对大肠癌细胞株侵袭、转移能力的影响.方法 采用噻唑蓝比色(MTT)法检测经双歧杆菌LTA处理前后大肠癌细胞株LoVo和HT-29对人工基底膜(Matrigel)的黏附能力变化;Transwell小室体外侵袭迁移实验检测经LTA处理前后两株细胞侵袭、迁移能力的改变.RT-PCR和Western blot检测经LTA作用前后,VEGF在两株细胞中的表达差异.结果 经20、50、80μg/ml双歧杆菌LTA处理后,LoVo细胞和HT-29细胞在30、60、90、120 min时的黏附率明显低于对照组(P<0.01);经50μg/ml双歧杆菌LTA处理24 h后,LoVo细胞和HT-29细胞的侵袭能力及VEGF的mRNA和蛋白质的表达,与对照组比较有显著性差异(P<0.01).结论 双歧杆菌LTA能抑制大肠癌细胞黏附、侵袭、迁移的能力,下调其VEGF的mRNA和蛋白质的表达.     

湖南地区小儿败血症革兰阴性杆菌构成及耐药性分析

为了解湖南地区败血症患儿中革兰阴性（G）杆菌在病原菌的构成及耐药性，对湖南省儿童医院2007年1—11月收治的临床疑为败血症的患儿无菌抽取静脉血，采用全自动血培养仪BACTEC9120或BacT／ALERT3D120进行培养，并用全自动微生物分析仪VITEK2compact对病原菌进行鉴定和药敏试验。8264份血标本检出需氧菌876株（10．60％），其中G^-杆菌有36个菌种，共计542株，占检出菌的61．87％，居前5位的是溶血不动杆菌、人苍白杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、施氏假单胞菌、大肠埃希菌。溶血不动杆菌对头孢唑林耐药性高，对亚胺培南、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南高度敏感；人苍白杆菌对青霉素类和第一、二、三代头孢菌素耐药，对亚胺培南、环丙沙星敏感；嗜麦芽窄食单胞菌对环丙沙星、头孢吡肟、哌拉西林／他唑巴坦敏感。提示湖南地区小儿败血症病原菌以非发酵菌为主，人苍白杆菌是重要病原菌，并有较高耐药性。