肉鸡源弯曲菌的分离、多重PCR鉴定及其耐药性分析

目的了解肉鸡屠宰加工过程中弯曲菌的污染及其耐药情况。方法根据GB4789．9-2008,采用增菌培养、选择性平板分离、生化鉴定从肉鸡屠宰过程中分离疑似弯曲菌,并以弯曲菌属的16s球NA、空肠弯曲菌的Hip0和结肠弯曲菌的CeuE为靶基因,采用三重PCR方法对疑似菌株进行鉴定。采用琼脂稀释法对弯曲菌阳性菌株进行8种常用抗生素的药敏试验,参考CLSI标准（2010）判定药敏结果。结果根据形态特征、生化指标及PCR鉴定结果,从651份样品中,鉴定出空肠弯曲菌160株、结肠弯曲菌130株,其他弯曲菌11株,弯曲菌总分离率为46．24％;其中屠宰前、屠宰过程中及屠宰后鸡肉中弯曲菌的污染率分别为56．10％、31．00％、17．00％,可能存在由屠宰前向屠宰后传播趋势。药敏试验表明,弯曲菌对环丙沙星、左氧氟沙星、四环素和林可霉素的耐药率较高,分别为93．02％、87．71％、87．71％、80．07％,对庆大霉素、红霉素、链霉素、氟苯尼考的耐药率分别为67．11％、49．50％、31．89％、13．29％。结论肉鸡屠宰过程中弯曲菌的污染及其耐药情况较为严重,应该加强卫生和抗生素使用监督。     

四川省部分地区2010－2011年猪肉生产链中沙门菌耐药特征及分子分型研究

目的 分析2010－2011年四川省部分地区猪肉生产链中沙门菌耐药特性及分子分型特征。方法 对分离的112株沙门菌采用肉汤微量稀释法进行10种抗生素 （组合） 药敏试验,参考CLSI标准 （2010） 判定结果。选取不同菌株来源、 血清型和耐药谱的74株沙门菌,按照美国PulseNet标准进行脉冲场凝胶电泳 （PFGE） 分型。结果 猪肉生产链中沙门菌对四环素耐药率最高 （89.29%）,其次为大观霉素 （36.61%）、 甲氧苄啶/磺胺甲噁唑 （35.71%）、 萘啶酸 （33.93%） 和氨苄西林 （24.11%）,多重耐药率为33.93%,对头孢噻呋敏感,共有19种耐药谱。来自猪肉生产链的74株沙门菌可分为34个PFGE谱型,其相似性为40%～100%。结论 四川省猪肉生产链中沙门菌耐药较为严重,其血清型及耐药谱与PFGE分型有一定相关性; 生产链中沙门菌可能存在自上游生产链向下游生产链水平传播的情况。     

多重PCR检测食源金黄色葡萄球菌nuc、blaZ和mecA基因方法的建立与应用

目的建立快速检测食源金黄色葡萄球菌(Sa)耐热核酸酶基因(nuc)、β-内酰胺酶基因(blaZ)和甲氧西林耐药基因(mecA)的多重PCR方法。方法根据GenBankSa的nuc、blaZ和mecA基因序列,设计3对特异性引物,建立鉴定Sa及分析Sa耐β-内酰胺类抗生素三重PCR方法 ,并对79株食源Sa进行基因检测与表型比较。结果显示供试Sa中检出nuc、blaZ基因阳性率分别为97.47%、73.42%,mecA基因检出为阴性;nuc基因检出与其表型符合率达97.47%;而blaZ扩增结果与β-内酰胺酶试验、青霉素类敏感试验同时符合率为49.37%,前者与后两者符合率分别为60.76%和75.95%;mecA与耐甲氧西林表型符合率为100%;此次79株食源Sa中无耐甲氧西林Sa。结论该方法简便、快捷、准确,为食源Sa鉴定和耐药性分子分析提供了参考依据。     

鸡肉生产链空肠弯曲杆菌的耐药性研究

目的 了解鸡肉生产链(养殖场-屠宰场-市场)中空肠弯曲杆菌分离株的耐药情况。方法 针对成都市及雅安市养鸡场、屠宰场和市场中分离的180株空肠弯曲杆菌,采用微量肉汤稀释法,检测鸡肉生产链中空肠弯曲杆菌对8种抗菌药物的耐药情况;采用错配扩增突变分析PCR(MAMA PCR)技术,检测137株耐环丙沙星的空肠弯曲杆菌的gyrA基因第257位突变情况,对gyrA基因突变进行分析。结果 药敏试验表明,空肠弯曲杆菌分离株对环丙沙星、左氟沙星、四环素和克林霉素的耐药率较高,分别为94.44%、93.89%、91.67%和78.33%;对红霉素(20.00%)、链霉素(20.56%)、庆大霉素(17.78%)、氟苯尼考(12.22%)呈现不同的耐药率。从养殖场到市场,鸡肉生产链中空肠弯曲杆菌对上述8种抗菌药物的耐药率呈持平或上升趋势。MAMA PCR 结果表明,95.62%(131/137)的环丙沙星耐药空肠弯曲杆菌在gyrA基因第257位发生点突变,10株环丙沙星敏感菌株均没有检测出gyrA基因的突变;gyrA基因耐药决定区的测序结果表明,环丙沙星耐药菌株MJF31和MJF53都在第257位碱基发生了ACA→ATA(苏氨酸到异亮氨酸)的突变,而对环丙沙星敏感的菌株JF9和JF136均未发生该类突变。结论 鸡肉生产链中空肠弯曲杆菌耐药性比较普遍,对喹诺酮类药物耐药率较高,多重耐药菌株较突出,应加强对养殖场和食品源空肠弯曲杆菌耐药性的监测。     

国标方法检测肉制品中亚硝酸盐的注意事项

亚硝酸盐常用作肉类制品的发色剂和防腐剂,但肉制品中亚硝酸盐残留量过多,会危及人民健康。因为一是食用量较大可能引起急性中毒;二是亚硝酸盐与肉制品中胺和氨基酸等反应可产生亚硝胺;三是肉制品中残留的亚硝酸盐还可在胃中形成亚硝胺,而亚硝胺是引发人类某些癌症的重要因素。因此,     

鸡肉空肠弯曲杆菌的分离鉴定及耐药性分析

目的 分离和收集食源性空肠弯曲杆菌的优势流行株,了解市场上鸡肉中空肠弯曲杆菌的污染和药物敏感性情况。方法 根据GB/T4789.9-2003、SN0175-2010、ISO10272-1:2006、FDA/BAM:2001、USDA/FSIS:1998等方法优化组合出一套对动物性食品源空肠弯曲杆菌有效的分离鉴定方法,从市场上鸡肉中分离疑似空肠弯曲杆菌,并进一步用生化试验及PCR方法进行准确鉴定。采用微量肉汤稀释法测定了所分离的空肠弯曲杆菌对22种常见抗菌药物（组合）的最低抑菌浓度值（MIC）。结论 根据培养特征、形态特征、生化试验和PCR结果准确鉴定出21株空肠弯曲杆菌,其污染率为11.5%。86%生化试验阳性的菌株经PCR鉴定为阳性。将空肠弯曲杆菌标准菌株和随机选出的分离株的16S rDNA扩增序列进行比对,二者同源率为100%。药敏试验表明,14.3%的分离菌株对氨苄西林具有耐药性;大多数菌株对头孢类抗生素MIC值相对较高;42.9%的菌株对萘啶酸具有耐药性;所有分离株对环丙沙星、四环素、红霉素、氯霉素、庆大霉素、链霉素不耐药。     

雅安山羊乳与牛乳质量性状比较分析

本文对雅安地区山羊乳和牛乳各7个样品进行了感官性状、理化指标的测定,结果表明,山羊乳除感官性状基本符合国家标准外,理化指标符合率低;牛乳基本符合国家标准;雅安山羊乳的干物质、脂肪、比重、酸度均低于牛乳。