大黄素对重症急性胰腺炎急性期细胞因子及胰腺腺泡细胞凋亡的动态影响（摘要）

目的 :本研究通过动态观察大黄素对重症急性胰腺炎(ＳＡＰ)大鼠血清淀粉酶、ＴＮＦａ、ＩＬ - 6、胰腺组织学变化程度的作用 ;同时观察其对ＳＡＰ大鼠急性期胰腺腺泡细胞凋亡的动态影响 ,以进一步了解大黄素治疗ＳＡＰ的作用机理。方法 :用ｃｈｅｔｔｙ法制作大鼠ＳＡＰ模型 ,术后 0ｈ 2 4ｈ 30ｈ 36ｈ测定假手术组、ＳＡＰ组及大黄素治疗组血清淀粉酶、血清ＴＮＦａ.ＩＬ -6浓度及胰腺腺泡细胞凋亡指数 ,并取胰组织作病理学检查 ;同时应用ＴＵＮＥＬ技术 ,分析各组各时相大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的变化。结果 :①血清淀粉酶浓度 :术后 0ｈ假手…     

多药耐药相关蛋白2与肝胆疾病的关系

多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance associated protein2,MRP2)或cMOAT(the canalicular multispecific organic anion transporter)属于ABC超基因家族,编码管状多特异性有机阴离子和多种药物转运蛋白[1].缺乏时易发生淤胆性疾病(cholestatic biliary disease),增高时易导致肝癌对化疗不敏感,产生多药耐药(multidrug resistance,MDR)现象.本文就MRP2结构、分布特点、影响因素及在肝癌多药耐药和淤胆性疾病中的作用.     

急性胆囊炎患者腹腔镜胆囊切除术中腹腔引流方法改进的作用

目的 探讨改进腹腔引流方法 在急性胆囊炎腹腔镜胆囊切除术中的作用.方法 2004年1月～2007年10月急性胆囊炎行腹腔镜胆囊切除术患者共297例,其中,改进放置腹腔引流177例,传统放置引流方法 120例,对比分析两组患者的自觉症状、肠功能恢复、术中出血量、手术时间、住院时间及并发症发生率.结果 两组患者出血量、手术时间、住院时间及并发症发生率差异无显著性(P＞0.05);改进放置腹腔引流患者自觉症状、肠功能恢复及肝下积液方面优于传统放置引流方法 患者(P＜0.05).结论 改进腹腔引流是一种可靠、简单、易行的方法 .     

大鼠急性坏死性胰腺炎外周血中的TNFa,IL-6浓度的动态测定及意义

目的：探讨急性胰腺时外周血清TNFa，IL—6的动态变化及其意义。方法：用chetty法制作大鼠的ANP模型，术后动态测定对照组、ANP组及大黄素治疗组血淀粉酶，并取胰组织作病理检查，同时动态检测外周血清中TNFa，IL—6的情况。结果：血清淀粉酶在0h三组间无差别；24h治疗组、ANP组与对照组间有显著差异(P＜0．01)；36h治疗组与ANP组之间无显著差异(P＞0．05)；二组与对照之间有显著差异(P＜0．01)；24h治疗组、ANP组与对照组间有显著异(P＜0.01)；TNFa，IL-6在0h三组间无差别；24h时治疗组与ANP无统计学差别与对照组比较有明显的升高(P＜0．05)；30h及36h治疗组与ANP组之间有显著差异(P＜0．01)。结论：细胞因子参与急性胰腺炎的发病过程，又与其病情严重程度呈正相关，表明细胞因子在ANP的发生和发展过程中起着一定作用。     

高龄患者上消化道大出血手术时机再认识及处理

目的 探讨高龄患者上消化道大出血手术时机的选择及术中处理方法。 方法 回顾性分析2010年1月～2012年12月该院51例高龄患者（>70岁）上消化道大出血行手术治疗,手术时机的选择及术中处理方式。 结果 3例患者死亡。45例患者经过手术治疗痊愈。手术时机的选择应在出血早期,血红蛋白大于5.0 g,全身情况较好时及时手术;手术方式以能够确切止血,简单有效的手术方式为宜,术中结合胃镜寻找出血部位。 结论 高龄患者上消化道大出血应及时手术,手术方式以简单有效的方式为宜。     

不同细胞因子活化的NK细胞形态及功能的研究

目的 研究白细胞介素-2(IL-2),IL-2及白细胞介素-12(IL-12),IL-2及白细胞介素-18(IL-18),IL-2、IL-12及IL-18活化的自然杀伤细胞(NK细胞)的形态及对黑色素瘤细胞的杀伤率.方法 提取NK细胞,IL-2 6 000 IU/mL,IL-2 6 000 IU/mL+IL-12 10 ng/mL,IL-2 6 000 IU/mL+IL-18 100 ng/mL,IL-2 6 000 IU/mL+IL-12 10 ng/mL+IL-18 100 ng/mL活化,3 d后流式细胞仪检测其前向角散射(FSC)值,酶联免疫吸附法(ELISA)检测干扰素γ(IFNγ)含量,以B16黑色素瘤细胞为靶细胞检测NK细胞对肿瘤细胞杀伤率.结果 IL-2+IL-12、IL-2+IL-18、IL-2+IL-12+IL-18活化的NK细胞FSC值明显比仅用IL-2活化的NK细胞大(P<0.05),并且分泌的IFN量高(P<0.05),但对B16黑色素瘤细胞杀伤率低.结论 同时应用IL-12及IL-18与IL-2活化的NK细胞能够分泌较高的IFNγ,但是对肿瘤细胞的杀伤作用较低.     

重组腺病毒Ad-EGFP-mdr-1转染大鼠骨髓细胞模型的构建

目的 构建转染多药耐药基因-1 （multidrug resistance gene-1,mdr-1）的骨髓细胞.方法 将重组腺病毒Ad-EGFP-mdr-1转染大鼠骨髓细胞.RT-PCR法和Western blot法检测mdr-1 mRNA及蛋白的表达水平 柔红霉素排出试验检测转染mdr-1基因后的骨髓细胞有无功能表达.结果 骨髓细胞病毒转染率为30.14%,存活率为89.25%,转染后骨髓细胞mdr-1的mRNA及蛋白质水平都存在功能性表达,导入的mdr-1表达产物P-gp有药物外排泵功能.结论 转染mdr-1的大鼠骨髓细胞模型的成功构建,为进一步研究肿瘤的多药耐药提供实验基础.     

NK 细胞上清液提高CTL 细胞对肝癌细胞杀伤力的研究

目的：研究用白细胞介素2（IL‐2）联合IL‐12、IL‐18以及三者共同活化NK细胞所提取的上清液与肝癌细胞共培养是否能提高AFP特异性的细胞毒性T细胞（CTL）对小鼠肝癌细胞的杀伤性。方法提取NK 细胞,分别用IL‐26000 IU／mL、IL‐26000 IU／mL＋ IL‐1210 ng／mL、IL‐26000 IU／mL＋IL‐l8100 ng／mL、IL‐26000 IU／mL＋IL‐1210 ng／mL＋IL‐18100 ng／mL活化NK细胞,3 d后提取上清液,ELISA检测上清液IFNγ表达量,然后将上清液与Hepa1‐6细胞培养过夜,流式细胞仪检测肿瘤细胞表面I类组织相容性抗原（M HC I）表达,以其为靶细胞检测AFP特异性的CTL细胞对 Hepa1‐6细胞杀伤率。结果NK＋IL‐2＋IL‐12、NK＋IL‐2＋IL‐18、NK＋IL‐2＋IL‐12＋IL‐18上清液的IFNγ含量高于NK＋IL‐2上清液的IFNγ含量（P＜0．05）,并且上述三组能有效提高小鼠 Hepa1‐6细胞表面M HC I的表达（P＜0．05）,从而显著提高了AFP特异性的CTL细胞对靶细胞的杀伤活性,然而阻断IFNγ分泌,AFP特异性的CTL细胞对靶细胞的杀伤活性降低。结论 NK 细胞上清液能够增强AFP特异性的CTL对肝癌细胞的杀伤作用。     

携带反义多药耐药相关蛋白的重组腺病毒微球的构建

目的 构建携带反义多药耐药相关蛋白(MRP)基因的重组腺病毒微球并进行理化性质的鉴定,以用于肝癌多药耐药的基因治疗研究.方法 采用可降解的生物材料聚乳酸-聚乙烯醇(PELA)包被携带反义MRP基因的重组腺病毒制成微球,体外测定微球的粒径、载病毒量、包封率及释放规律,并用其转染人肝癌耐药细胞株HepG2/ADM,48 h及120 h后检测转染细胞荧光强度.结果 成功地构建了携带反义MRP基因的重组腺病毒微球,直径约1.765 μm,包封率为52.4%,载病毒率为5.5× 108 efu/mg,在120 h内释放病毒量为49.2%,总的释放时间长于240 h.释放出的病毒保持活性,10 mg微球48 h释放病毒滴度为1.0× 108 efu/ml,对HepG2/ADM细胞株转导效率町达90%以上.结论 聚乳酸-聚乙烯醇共聚物(PELA)包载反义RNA重组腺病毒制备的微球,包封率较高,载病毒量较大,能保持病毒活性,较长时间释放,转导效率高,可望有效地将反义MRP导人人肝癌耐药细胞株,为进一步研究肝癌耐药机制及其逆转方式提供实验基础.