医药拉丁语的教学体会

拉丁语是现代医药科学的生要工具之一。医学科学的临床用语、药物名称及解剖学、生理学、微生物学等学科中的名词术语均统一以拉丁语命名，而标准处方学更是拉丁语在医学界的一个具体应用。但是拉丁语专业性很强，相对其他外语或学科而言，较为死板枯燥，因而在教学过程中如何引导学生学好拉丁语，是任课教师必须思考的问题。笔者通过教学实践，从以下几方面入手，取得了较好的教学效果。     

原癌基因USP22启动子的克隆及转录活性分析

 目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列,探讨其转录活性。方法应用cDNA 5忆末端快速扩增（5'RACE）方法定位
USP22基因转录起始点;在此基础上针对其5'端非编码区处包括转录起始点在内的-2 828~+52片段进行PCR扩增,产物克隆
入荧光素酶表达载体pGL3-Basic。重组质粒与内参质粒pRL-TK共转染HepG2 与Hela 细胞,双荧光素酶活性检测确定其转录
活性。结果成功确定USP22基因转录起始位点,酶切及测序结果证实USP22基因5'端非编码区2 880 bp 序列正确插入到荧
光素酶报告基因载体pGL3-Basic。重组质粒pGL3-USP22 promoter 转染HepG2 细胞和Hela 细胞后,检测到荧光素酶的高表达
（ P<0.05）。结论成功构建具有转录活性的USP22启动子片段,为进一步研究USP22表达调控机制奠定基础。     

Sp1真核表达载体的构建及对USP22基因转录活性的影响

目的 克隆人sp1基因,构建真核表细胞达载体pVAX-Sp1,研究其对USP22基因转录活性的影响.方法 Trizol试剂快速提取人肝癌细胞株HepG2总RNA,经RT-PCR扩增Sp1基因序列,与pVAX1真核表达载体连接;测序、酶切鉴定重组载体;pVAX1-Sp1与含USP22启动子的萤光素酶报告质粒共转染Hep...     

粟米草皂甙对血管平滑肌细胞增殖的影响及机制探讨

目的观察粟米草皂甙对血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的影响,并探讨其机制。方法将原代培养大鼠胸主动脉VSMCs分为两组,观察组加入不同浓度（1、3、9、27μmol/L）粟米草皂甙,对照组加入等体积稀释后的DMSO培养24、48、72 h。采用MTT法检测VSMCs的增殖抑制率,采用RT-PCR法检测VSMCs中的线粒体转录因子A（mtTFA）mRNA。结果与对照组比较,观察组VSMCs增殖抑制率明显升高（P均〈0.05）,mtTFA mRNA表达下降（P均〈0.05）,且呈一定浓度、时间依赖性。结论粟米草皂甙对大鼠VSMCs细胞增殖有显著的抑制作用,其机制可能与下调mtTFA mRNA表达有关。     

SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞原代培养及鉴定

目的:研究SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞(RASMC)的培养方法及其生物学特性.方法:运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定.结果:组织块贴壁法成功培养出SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞,培养的细胞呈典型"峰-谷"样生长,HE染色细胞呈梭形,胞浆丰富,核大而圆或椭圆,免疫组化S-P法检测a-平滑肌肌动蛋白单克隆抗体(a-SMActin)呈强阳性表达.传代纯化,细胞生长特性未见异常改变.结论:组织块贴壁法培养的SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞生长稳定,培养和纯化可同步进行,简单,方便.     

USP22基因克隆及其融合蛋白真核表达载体的构建

目的 克隆人类泛素水解酶22(ubiquitin-specific processing enzyme 22,USP22)基因,构建与绿色荧光蛋白融合表达的真核载体.方法 利用RT-PCR技术以HeLa细胞总RNA为模板分别扩增USP22基因cDNA序列两片段,依次插入真核表达载体pEGFP-N1;重组质粒转染HEK293T细胞,观察融合蛋白表达及绿色荧光的分布.结果 测序结果显示USP22序列与GenBank收录数据一致,酶切显示重组质粒pEGFP-USP22构建无误,质粒转染后有80 %左右HEK293T细胞表达绿色荧光,且在胞质与胞核中广泛分布.结论 成功克隆USP22基因并构建与GFP融合表达的真核载体,为进一步深入研究USP22基因的生物学功能奠定了基础.     

百令胶囊抗小鼠体力性疲劳作用的实验研究

目的:研究百令胶囊的抗疲劳作用.方法:小鼠随机分为对照组和百胶囊组,灌药14d后观察小鼠的负重游泳时间和常压耐缺氧时间,并测定小鼠血尿素氮、血乳酸及肝糖原的含量.结果:与对照组相比,百令胶囊组的负重游泳时间及常压耐缺氧时间均显著延长(P＜0.01),血尿素氮、血乳酸含量明显下降(P＜0.05),肝糖原明显升高(P＜0.05).结论:百令胶囊具有显著的抗疲劳作用.     

专科生和本科生对药理学认知水平的比较分析

目的：分析比较专科医学生和本科医学生对药理学认知水平，为教学改革提供依据。方法：采用写纸条反应问题的方式收集资料，并分析归纳，用EXCEL软件建库分析。结果：学生们反应的问题主要集中在药物疗效方面，但专科和本科问题侧重有所不同，专科生反应的药物疗效及其影响因素方面的问题占总数的57．1％，本科生反应的药物疗效及作用机制的问题占总问题的53.2％。结论：专科生和本科生对药理学认知水平有一定的差别。     

粟米草提取物对自发性高血压大鼠的降压作用

目的观察粟米草(MP)提取物对自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响。方法将24只SHR大鼠随机均分为4组,MP高、中、低浓度组(生药浓度的60%、30%、15%),每组均按0.3ml/kg一次性腹腔注射MP;阳性对照组腹腔注射等量生理盐水;另设6只正常大鼠(WKY)作为对照(WKY组),给药方法同MP中浓度组。用尾动脉容积法测定各组血压,观察给药前及给药后1、4、8、12小时血压变化及MP提取物对盐酸肾上腺素(Adr)和去甲肾上腺素(NA)升压作用的影响。结果MP中、低浓度组血压显著低于其他组;中浓度MP可抵抗Adr和NA的升压作用。结论MP提取物可降低SHR的血压(P<0.01),可抵抗Adr和NA的升压作用并使血压降低。     

泛素特异水解酶22基因RNA干扰真核表达载体的构建及鉴定

目的 构建泛素特异水解酶22基因(USP22)RNA干扰(RNAi)的真核表达载体,并观察其对肝癌细胞株HepG2增殖的影响.方法 根据USP22 mRNA序列,合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入质粒载体pMSCV/Hyg/U6.酶切和测序鉴定重组质粒pMSCV/Hyg/siUSP22.脂质体介导重组质粒转染HepG...