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目的:构建结核分枝杆菌fbpB基因的植物表达载体,为在植物中表达该基因奠定基础。方法:以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,通过PCR扩增fbpB编码基因,然后将其克隆到植物表达载体pBI121上,并进行鉴定。结果:重组载体经菌液PCR鉴定为阳性克隆后再经双酶切鉴定可见约13kb和1kb的2条特异性条带,与预期大小相一致,测序结果表明克隆的fbpB基因序列与Genbank上公布的相一致。结论:成功构建了fbpB基因的植物表达载体,为研制和开发新型的结核疫苗打下坚实的基础。 相似文献
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目的:克隆夏侧金盏花中Actin基因片段并分析其组织部位表达,为以Actin基因为内参研究夏侧金盏花中其它基因的表达和调控奠定基础。方法:通过比较其它植物中Actin基因序列,设计夏侧金盏花Actin基因片段的PCR引物,扩增产物经克隆和测序,获得序列信息;根据获得的序列设计半定量RT-PCR引物,分析Actin基因在夏侧金盏花不同组织部位的表达。结果:克隆获得一长度为1 009bp的夏侧金盏花Actin基因片段,命名为AdACT,并在GenBank注册,登录号为JX436162;半定量PCR研究发现其在不同组织部位的表达无显著差异。结论:本研究初步表明其可作为研究夏侧金盏花基因表达的内参基因。 相似文献
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目的:研究夏侧金盏花中虾青素合成相关基因Adketo和Adkc在不同组织部位的表达,从而从基因表达角度探讨这两个基因与虾青素合成的关系。方法:根据GenBank上的Adketo和Adkc基因以及内参Adactin基因的序列设计荧光定量PCR引物,通过Real-time PCR分析Adketo和Adkc基因的组织部位表达情况。结果:Adketo和Adkc基因均只在花中大量表达(3%),其余组织内只能检测到少量或微量表达(10-5~10-3)。结论:虾青素主要在夏侧金盏花的花中合成具有正相关关系,为证明Adketo和Adkc是虾青素合成相关基因添加了又一证据。 相似文献
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