三叉神经节细胞电压门控通道研究中的钙电流振荡活动

目的 :探讨三叉神经节细胞电压门控性钙通道电流特性。方法 :在急性分离的三叉神经节细胞膜上 ,阻断电压门控性延迟整流钾通道和电压门控性钠通道 ,在 - 70mV的钳制电位下 ,给予 1 0mV步幅递增、80ms步宽的去极化脉冲刺激 ,进行全细胞膜片钳记录。结果 :在仅阻断电压门控性延迟整流钾通道时 ,- 1 0mV的去极化脉冲刺激激活了三叉神经节细胞膜上继快钠电流之后的慢内向电流 ,呈重复开闭的振荡特性 ;同时阻断电压门控性延迟整流钾通道和电压门控性钠通道 ,在 - 2 0mV的去极化脉冲刺下 ,也可记录到呈振荡特性的慢内向电流。振荡电流可被细胞外喷射的 1mmol·L-1 尼福地平所阻断。结论 :三叉神经节细胞膜上高电压激活的重复开闭慢内向电流可能为电压门控性钙电流 ,其振荡特性可能与感觉信息中枢传入的初级加工有关。     

黑斑蛙不同器官超微结构扫描电镜观察( I)

目的探讨黑斑蛙（Ｒａｎａｎｉｇｒｏｍａｃｕｌａｔａ）肺、胃及肝的超微结构特点,为两栖类的进化地位提供部分超微水平上的依据。方法将蛙麻醉后,于０．９％Ｎａｃｌ中取蛙肺、胃及肝组织。组织块大小约１ｍｍ×１ｍｍ×５ｍｍ,即刻投入１％锇酸内,４℃固定。而后依照ＤＭＳＯ冷冻割断法进行洗涤、割断、软化、导电、脱水、干燥等处理,金属镀膜,ＳＥＭ观察。结果蛙肺、胃及肝的超微结构类似于陆生脊椎动物,结构特点增强了机体陆地生活能力。结论两栖类超微结构特点是与其进化地位相适应的     

血竭总黄酮对三叉神经节细胞河豚毒素不敏感型钠电流峰值的浓度依赖性抑制：血竭镇痛效应的有效部位

目的：三叉神经节细胞河豚毒素不敏感型钠通道与颜面部痛觉产生有关，是外周镇痛药物作用的理想靶点。观察血竭总黄酮对其的干预效应，以阐明血竭产生镇痛效应的有效部位。方法：实验于2004-01在中南民族大学生物医学工程研究所膜片钳实验室完成。选择1月龄左右的昆明种小鼠，酶解消化法急性分离小鼠三叉神经节细胞，应用全细胞膜片钳技术，在小鼠三叉神经节细胞膜上观察不同浓度（0．01，0．1，1g/L）血竭总黄酮对河豚毒素不敏感型钠通道电流的影响。结果：血竭总黄酮对河豚毒素不敏感型钠通道电流的峰值具有浓度依赖的抑制作用，质量浓度为0．01，0．1，1g／L时其抑制率分别为（13．90&;#177;2．15）％，（31．61&;#177;3．03）％，（50．12&;#177;3．72）％，半数抑制浓度，IC50为0．9216g/L，且抑制作用可逆；高浓度（1g/L）的血竭总黄酮加速该类钠通道电流的失活过程（半失活电压向超级化方向偏移11．72 mV），延迟其复活过程，而对激活过程无显著影响（半激活电压向去极化方向偏移0．99 mV）。结论：血竭总黄酮是血竭抑制三叉神经节细胞河豚毒素不敏感型钠通道电流的有效部位，且这种抑制效应发生在通道的失活过程而非激活过程，并具有浓度依赖性。     

血竭总黄酮对三叉神经节细胞河豚毒素不敏感型钠电流峰值的浓度依赖性抑制血竭镇痛效应的有效部位

目的三叉神经节细胞河豚毒素不敏感型钠通道与颜面部痛觉产生有关,是外周镇痛药物作用的理想靶点.观察血竭总黄酮对其的干预效应,以阐明血竭产生镇痛效应的有效部位.方法实验于2004-01在中南民族大学生物医学工程研究所膜片钳实验室完成.选择1月龄左右的昆明种小鼠,酶解消化法急性分离小鼠三叉神经节细胞,应用全细胞膜片钳技术,在小鼠三叉神经节细胞膜上观察不同浓度(0.01,0.1,1 g/L)血竭总黄酮对河豚毒素不敏感型钠通道电流的影响.结果血竭总黄酮对河豚毒素不敏感型钠通道电流的峰值具有浓度依赖的抑制作用,质量浓度为0.01,0.1,1 g/L时其抑制率分别为(13.90±2.15)%,(31.61±3.03)%,(50.12±3.72)%,半数抑制浓度IC50为0.921 6 g/L,且抑制作用可逆;高浓度(1 g/L)的血竭总黄酮加速该类钠通道电流的失活过程(半失活电压向超级化方向偏移11.72 mV),延迟其复活过程,而对激活过程无显著影响(半激活电压向去极化方向偏移0.99mV).结论血竭总黄酮是血竭抑制三叉神经节细胞河豚毒素不敏感型钠通道电流的有效部位,且这种抑制效应发生在通道的失活过程而非激活过程,并具有浓度依赖性.     

龙血素B对三又神经节河豚毒素不敏感型钠通道电流的调制作用

目的研究血竭重要成分龙血素B对小鼠三叉神经节河豚毒素不敏感(TTX-R)钠电流的作用。方法采用酶解法分离小鼠三叉神经节细胞,应用全细胞膜片钳技术,观察龙血素B对单个三叉神经节(trigem inal ganglion TG)细胞TTX-R钠电流幅值的影响。结果龙血素B对TTX-R钠电流呈浓度依赖性抑制,且抑制作用可逆;高浓度的龙血素B(0.2mmol/L)加速TTX-R钠通道电流的失活过程,延迟其复活过程,对激活过程无显著影响。结论龙血素B显著抑制TTX-R钠电流,且这种抑制作用发生在钠通道的失活过程而非激活过程,这种作用可能是其镇痛作用的机理之一。