创伤后应激障碍大鼠海马神经元凋亡和Akt/mTOR信号通路的改变

目的 检测创伤后应激障碍（PTSD）模型大鼠海马神经元凋亡和蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉系靶蛋白(mTOR)信号通路的改变,探讨PTSD发病机制。方法 将成年健康雄性SD大鼠60只分为对照组（n=10）和模型组（n=50）。采用改良的单一连续应激方法制备PTSD大鼠模型,在造模后1 d、4 d、7 d、14 d和28 d处死大鼠（每个时间点处死5只）,流式细胞术检测海马神经元凋亡率,Western blot方法检测海马第10号染色体缺失性磷酸酶张力蛋白同源物基因编码产物（PTEN）、磷酸化Akt（p-Akt）、磷酸化mTOR（p-mTOR）的表达水平。 结果 PTSD后1 d、4 d、7 d和14 d大鼠海马神经细胞凋亡率高于对照组（P<0.05）;PTSD后1 d大鼠海马PTEN蛋白表达高于对照组（P <0.05）,4 d达高峰,14 d仍高于对照组（P<0.05）;p-Akt蛋白表达水平在PTSD后1 d即低于对照组（P<0.05）,以后逐渐增高,28 d仍低于对照组（P<0.05）;p-mTOR蛋白在PTSD后4 d低于对照组（P<0.05）,以后逐渐增高,但28 d仍低于对照组（P<0.05）。结论 PTSD模型大鼠海马神经元Akt/mTOR信号通路激活,参与海马神经元凋亡调控。     

案例分析式教学法在病理学实验教学中的应用与探索

病理学是基础医学与临床医学之间的"桥梁学科",实践性很强,传统"灌输式"教学法,不利于学生主观能动性和创新能力的培养。对医学本科生引入案例分析式教学法(case analysis teaching method),来调动学生的学习热情和主观能动性,是一种行之有效的教学方法。     

安神解郁汤对CUMS大鼠海马p-Tau及HPA轴的影响

目的:观察安神解郁汤(ASJYD)对抑郁大鼠海马微管蛋白p-Tau及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的影响。方法:雄性SD大鼠40只分为对照组(Control)、抑郁模型组(CUMS)和ASJYD治疗组(ASJYD),利用慢性不可预测轻度应激(CUMS)建立抑郁大鼠模型,通过灌胃方法给予抑郁大鼠ASJYD治疗;通过糖水偏好实验、旷场实验和Morris水迷宫测试各组大鼠的行为学表现; HE染色观察海马组织结构的变化;用Western Blot方法检测大鼠海马组织中p-Tau的表达水平; ELISA检测大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)和血清促肾上腺皮质激素(ACTH)变化。结果:糖水消耗和糖水偏好百分比模型组低于对照组和药物治疗组(P 0. 01)。旷场实验中行走路程、中央格时间、站立次数和修饰行为模型组低于对照组和药物治疗组(P 0. 01)。水迷宫平均逃避潜伏期模型组高于对照组和药物治疗组(P 0. 01)。HE染色各组海马组织结构发生显著变化。模型组大鼠海马p-Tau蛋白的表达低于对照组,用药治疗后显著提高(P 0. 01)。模型组下丘脑CRF含量和血清ACTH水平明显高于对照组,治疗后有明显改善(P 0. 01)。结论:安神解郁汤对CUMS大鼠抗抑郁作用,可调节p-Tau以及下丘脑CRF和血清ACTH的变化。     

创伤后应激障碍大鼠海马神经元自噬增强

目的:观察创伤后应激障碍(PTSD)模型大鼠海马神经元自噬的改变,探讨PTSD致海马体积异常的可能机制。方法:成年健康雄性SD大鼠20只,随机被分为对照组和模型组。采用改良的单一连续应激后给予不可逃避足底电击方法制备PTSD大鼠模型;采用透射电镜技术观察海马神经元超微结构,Western blot方法检测海马微管相关蛋白轻链3(microtube-associated protein 1 light chain 3,LC-3)和Beclin-1的表达水平。结果:模型组海马神经元自噬体增多;海马组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin-1表达水平高于对照组(P<0.05)。结论:PTSD模型大鼠海马神经元存在明显的细胞自噬,可能与海马体积异常变化有关。     

p-Tau蛋白在抑郁症大鼠海马组织中的表达

目的:观察抑郁症大鼠海马组织中磷酸化微管相关蛋白Tau(p-Tau)的表达水平,探讨p-Tau与抑郁症的关系。方法:40只大鼠随机分为对照组(n=20)和模型组(n=20),模型组大鼠采用慢性不可预见性温和应激(CUMS)建立大鼠抑郁症模型,对照组大鼠每天抓取1次。分别采用糖水偏好实验、旷场实验和Morris水迷宫实验检测对照组和模型组大鼠行为学表现;尼氏染色观察大鼠海马神经元形态学;对照组和模型组造模后1、7、14和28 d分批处死大鼠,采用Western blotting法检测大鼠海马组织中p-Tau蛋白表达水平。结果:糖水偏好实验,模型组大鼠糖水消耗量和糖水偏好百分比低于对照组(P<0.01);旷场实验,模型组大鼠行走总路程、中央活动时间、直立次数和修饰行为次数少于对照组(P<0.01);Morris水迷宫实验,模型组大鼠平均逃避潜伏期长于对照组(P<0.01);CUMS后1 d,模型组大鼠海马组织中p-Tau蛋白表达水平低于对照组(P<0.01),7 d后开始高于对照组(P<0.05),14 d时大鼠海马组织中p-Tau蛋白表达水平最高(P<0.01)。结论:抑郁模型大鼠海马组织中p-Tau蛋白表达水平先降低后增高,这可能影响微管的稳定性,破坏细胞骨架稳态,从而导致海马神经元的结构改变。     

抑郁大鼠海马微管相关蛋白pMAP-2和p-Tau表达的研究

目的:观察微管蛋白p MAP-2和p-Tau在抑郁大鼠海马的表达变化情况,探讨海马微管蛋白与抑郁症的关系和意义。方法:通过利用慢性不可预见性温和应激(chronic unpredicted mild stress,CUMS)建立大鼠抑郁症模型,对照组和模型组分别采用糖水偏好实验、旷场实验以及Morris水迷宫对其行为进行学检测,采用尼氏染色观察海马神经元的形态学变化,对照组和模型组造模后1、7、14、28 d分批处死大鼠,用Western Blot方法检测海马组织中p-MAP-2和p-Tau的蛋白表达水平,免疫荧光双标观察海马组织中p-MAP-2和p-Tau定位分布。结果:糖水偏好实验:模型组糖水消耗量和糖水偏好百分比分别低于对照组(P0.01);旷场实验:模型组行走总路程、中央活动时间、直立次数和修饰行为分别低于对照组(P0.01);Morris水迷宫模型组平均逃避潜伏期高于对照组(P0.01)。CUMS后1 d大鼠海马p-MAP-2和p-Tau蛋白的表达低于对照组,7 d后开始升高,14 d明显高于对照组,28 d仍略高于对照组。p-MAP-2和p-Tau免疫荧光双标结果显示:部分神经元的胞浆内p-MAP-2和pTau同时表达,表明p-MAP-2和p-Tau有部分共定位。结论:p-MAP-2和p-Tau在抑郁模型大鼠海马出现先降低后增高的现象,因此我们推测在应激抑郁症发病过程中,p-MAP-2和p-Tau蛋白表达的变化可能影响微管的稳定性,破坏细胞骨架稳态,从而影响海马神经元的结构改变。