幽门螺杆菌ureB基因表达产物的反应原性

目的：克隆幽门螺杆菌ureB基因，并进行表达，验证表物的反应原性。方法：应用PCR技术从技术临床分离株中扩增出ureB基因，克隆入载体pGEM-7zf( ）进行测序，进一步转到友大肠杆菌表达载体pBV220进行诱导表达，以Western blot实验验证重组蛋白的反应原性。结果：测序后经同源性比较，证实扩增后得到的片断确为ureB基因，并原核表达出可被抗Hp抗体识别的非融合重组蛋白。结论：获得了有反应原性的重组ureB蛋白。     

骨组织恶性肿瘤与癌基因mdm2、c-myc和抗癌基因p53关系的研究

作者采用分子分杂交技术分析了１８例骨组织恶性肿瘤及瘤旁组织中癌基因ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ和抗癌基因ｐ５３的变化，使用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术分析了ｐ５３基因第７外显子点突变，结果显示，骨组织恶性肿瘤中ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ癌基因有扩增与过表达，抗癌基因ｐ５３有突变、重排、缺失。在１０例骨肉瘤标本中发现ｍｄｍ２扩增仅存在于转移的病例中。这些结果表明：癌基因ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ与抗癌基因ｐ５３参与骨组织恶性肿瘤的发生和发展，其中ｍｄｍ２扩增与骨肉瘤转移密切相关。     

多重斑点金免疫法快速检测乙型肝炎病毒抗－HBs，抗－HBe和抗－HBc抗体

多重斑点金免疫法快速检测乙型肝炎病毒抗－ＨＢｓ，抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ抗体肖乐义，阎小君，陈远鑫，苏成芝，徐德忠，李陕区，阎永平，郭晏海（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３全军基因诊断技术应用研究所流行病学教研室）关键词斑点金免疫法，乙型肝炎...     

HIV－1Protease在大肠杆菌中的高表达

艾滋病的致病因子为人免疫缺陷病毒。该病毒的蛋白酶在病毒复制和成熟中具有决定性的意义。由于目前国内外尚未获得艾滋病病毒蛋白酶高效表达的重组子及简便的活性检测系统，限制了它的研究与应用。本文将用ＰＣＲ技术修饰的ＨＩＶＰｒ基因克隆入原核高效表达载体ｐＴＴＱ１８的ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ酶切位点之间，并用豆芽核酸酶将ＥｃｏＲⅠ的粘端削平，构建了读框正确的表达载体，ＩＰＴＧ诱导表明，该重组子在大肠杆菌中获得了高表达，激光扫描结果表明：重组的ＨＩＶＰｒ占细菌总蛋白８．９％以上。     

人类α型叶酸受体基因的克隆及其真核表达载体的构建

目的 探讨如何以人类α型叶酸受体(FOLR-1)基因为基础构建核酸疫苗。方法 应用RT-PCR技术，从人类卵巢癌细胞系-SKOV3细胞中扩增FOLR-1基因，插入克隆载体pGEM-T Easy，经DNA自动测序仪测序证实后，以亚克隆法构建于真核表达载体pcDNA3．1( )，并使用限制性内切酶酶切鉴定。结果 从卵巢癌细胞系SKOV3中成功扩增出FOLR-1基因，并克隆人pcDNA3．1( )载体。结论 成功构建FOLR-1的重组克隆及真核表达载体，为今后利用FOLR-1进行卵巢上皮性肿瘤的免疫及导向治疗研究打下了基础。     

PCR检测慢性胃炎患儿胃液中幽门螺杆菌DNA

目的检测慢性胃炎儿童胃液中幽门螺杆菌DNA，探讨其在临床诊断中的实用价值。方法应用PCR检测胃液中幽门螺旋菌DNA，应用Warthin-Starry银染色检测胃粘膜组织中的幽门螺旋菌。结果胃炎组与非胃炎组比较，敏感性为75.0％，特异性为96．2％，两组有显著性差异（P＜0．01）。PCR与Warthin－Starry银染色比较，PCR优于Warthin—Starry银染色法。结论PCR检测患儿胃液中的幽门螺旋菌DNA，具有敏感、快速、特异、高效等优点，是基因水平上检测幽门螺旋菌一项新技术，用于慢性胃炎的早期诊断，具有较好的实用价值，值得推广应用。     

新型TaqMan-MGB探针法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的探讨新型MGB探针在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌快速检测中的临床应用价值。方法以TaqMan-MGB探针技术为基础,用已克隆的mecA基因作参比品,实时检测临床标本和阴性参考品。结果所建立方法的最低检测限度为1个基因拷贝/反应,在100~109范围内,CT值(C代表Cycle,T代表阈值)同DNA量的对数呈线性关系;用该方法检测20例MRSA培养阳性的临床标本,结果均为阳性;用该方法检测20个非MRSA细菌株,结果均为阴性。结论所建立的方法适用于临床MRSA快速诊断。     

胃粘膜组织中Hp的感染与癌基因ras及抑癌基因p53、p16的关系

胃粘膜组织中Ｈｐ的感染与癌基因ｒａｓ及抑癌基因ｐ５３、ｐ１６的关系张沥１阎小君２白西平１韩锋产２张玲霞１苏成芝２Ｓｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｇａｓｔｒｉｃｍｕｃｏｓａ／ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ；ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ／ｅｄ...