微波骨髓活组织快速半薄石蜡切片的制备

骨髓穿刺活组织检查（骨髓活检）是确诊血液疾病的主要技术之一。微波骨髓活检组织快速半薄石蜡切片的制备，把微波辐射应用到骨髓活检组织的固定、脱水、透明、浸蜡及其切片染色等主要步骤中，结果仅需２～３ｈ即可完成切片制作，而且制片质量近似骨髓组织塑料包埋切片技...     

早期肝癌中端粒酶活化与细胞增殖相关性研究

目的：研究早期肝癌中端粒酶基因蛋白(hTRT)与细胞增殖核抗原（PCNA）表达及其相关性。方法：在20例早期肝癌中用原位杂交检测hTRT基因,免疫组化方法检测PCNA的表达。结果：hTRT阳性信号检出率80．0％,PCNA强阳性率为55．0％;癌中hTRT阳性信号、PCNA表达强度显著高于癌旁非癌组织（P＜0．05）;癌不则分化组中PCNA表达有显著差异（P＜0．05）;癌中hTRT阳性信号分布有模型和浆型两种形式,其分布形式、 信号强度均与PCNA阳性强度密切相关（P＜0．01）。结论;肝癌发生与细胞增殖密切相关。端粒酶活化是肝癌发生的早期事件,是肝细胞增生和恶性转化所必需,其检出结果对鉴别肿瘤恶变有重要意义。     

脑星形胶质细胞瘤增殖与分化

 本文应用免疫组化方法在40例呈形胶质细胞瘤中研究PCNA和GFAP两种标记表达，原位观察与比较瘤细胞的增殖与分化。结果表明脑星形胶质细胞瘤中PCNA与GFAP表达率均为100％，PCNA表达强度与肿瘤分级呈正相关（P＜0．05），GFAP表达强度与肿瘤分级呈负相关（P＜0．01）。提示PCNA与GFAP的表达对于判断脑星形胶质细胞瘤的增殖活性，分化程度及判断肿瘤的恶性程度有一定的价值。     

胰腺癌胆囊收缩素受体蛋白表达的研究

目的探讨胆囊收缩素受体在正常胰腺组织、胰腺癌组织、胰腺癌细胞株SW1990中的表达，以明确胆囊收缩素受体与胰腺癌的关系。方法应用免疫组织化学法和免疫细胞化学法分别检测正常胰腺组织、胰腺癌组织、胰腺癌细胞株SW1990中胆囊收缩素受体A、B亚型的表达。结果在正常胰腺组织中缺乏胆囊收缩素受体A、B亚型的表达；在胰腺癌组织、人胰腺癌细胞株SW1990中也不表达胆囊收缩素受体A亚型，但可见胆囊收缩素受体B亚型的表达；胆囊收缩素受体在癌细胞株SW1990中的表达主要位于细胞膜上，细胞质内也可见。结论胆囊收缩素受体B在胰腺癌组织、腺癌细胞株SW1990中表达；胆囊收缩素受体B亚型主要位于细胞膜上；胆囊收缩素受体B亚型在胰腺癌细胞生长中可能发挥重要作用。     

5-脂氧合酶特异性抑制剂对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

流行病学和动物研究表明，胰腺癌的发生发展与亚油酸、花生四烯酸（AA）等多聚不饱和脂肪酸的摄人有关。5-脂氧合酶（5-lipoxygenase，5-LOX）是催化AA转化为5-羟二十碳四烯酸（5-HETE）和白三烯（Ⅱ）的关键酶。齐留通（zileuton）其化学名为N-[1-（苯并[b]噻吩基）-2-乙基]-N-羟基，通过抑制5-LOX活性而抑制AA转化为LTB4，是特异性5-LOX抑制剂。我们应用齐留通阻断5-LOX代谢途径，研究对胰腺癌细胞SW1990凋亡及凋亡相关基因bcl-2 mRNA和bax mRNA的影响，从而为胰腺癌的治疗寻找一种新的有效途径。     

胰腺癌细胞中5-脂氧合酶mRNA和蛋白的表达

胰腺癌预后差,早期诊断困难,发病率于近年来逐步上升,且传统治疗效果不理想.因此,深入研究胰腺癌的发病机制对探索更为有效的预防、诊断和治疗方法具有重要意义.近年来研究结果表明,5-脂氧合酶(5-lipoxygenase, 5-LOX)代谢途径与胰腺癌的发生和发展关系密切.为此,我们应用RT-PCR和免疫组织(细胞)化学技术检测胰腺癌细胞株SW1990和Capan2中5-LOX的表达情况.     

ＮＥＴ-１表达与胃癌发展和预后关系

目的:研究NET-1基因蛋白在胃癌中表达及与胃癌临床病理因素和预后的关系.方法:通过自行设计制备的NET-1抗体,用免疫组化SP法检测86例胃癌组织中NET-1基因蛋白表达,结合临床病理因素和随访资料进行统计学分析NET-1表达对胃癌预后的影响.结果:NET-1在胃癌组织中均有表达,其强阳性表达率为56.98%,在癌中表达显著高于正常黏膜.NET-1强阳性表达与癌分化(P＜0.01)以及患者生存率呈显著负相关(P＜0.05),其中3年、5年生存率与中位生存期均显著低于其弱阳性组(P＜0.05).结论:NET-1基因表达能较好地反映胃癌细胞群体增殖活性,是一个重要的生物学标记,能显著上调和促进癌进展.实验设计制备的NET-1抗体将能较好的用于临床肿瘤的研究.     

端粒酶基因在脑胶质瘤中的原位表达

目的 :研究端粒酶基因 (hTR)在脑胶质瘤中的原位表达状况及其与分型、分级的关系 ,评估其对胶质瘤诊断的价值。方法 :用原位杂交技术检测了 79例甲醛固定、石蜡包埋的胶质瘤蜡块标本中端粒酶基因 (hTR)的表达状况并分析与组织学分级、WHO分型之间的关系。用ABC法检测PCNA的表达。 6例正常脑组织作对照。结果 :端粒酶基因 (hTR)在脑胶质瘤中的检出率为 5 9 2 % (4 7/ 79)。端粒酶基因 (hTR)在胶质瘤组织学分级中的分布为Ⅱ级 11/ 32 ,Ⅲ级 12 / 2 0 ,Ⅳ级 2 4 / 2 7,各级胶质瘤组间比较 ,差异有显著意义 ,P <0 0 5。端粒酶基因 (hTR)的表达强度与胶质瘤的组织学分级、WHO分型之间有相关性 ,P <0 0 5 ,Ⅲ级、Ⅳ级的检出率明显高于Ⅱ级。正常脑组织中未检出端粒酶基因。端粒酶阳性组与阴性组PCNA阳性细胞密度差异有显著意义 ,P <0 0 5。结论 :胶质瘤中端粒酶基因 (hTR)表达状况可能与胶质瘤的分化程度、组织学分级相关 ,提示端粒酶基因的过表达可能对胶质瘤的演化和进展具有一定重要作用 ,并可能作为胶质瘤的一个新的诊断标志物 ,结合PCNA评价胶质瘤的生物学行为更为可靠。     

多重标记免疫组化技术在消化道肿瘤研究中的应用

目的:探讨消化道肿瘤病理标本切片三重标记免疫组化的方法。方法:采用非同源第一抗体Ki-67、Net-1和CD34,选用辣根过氧化物酶不同底物显色AEC和DAB,运用pH2.2甘氨酸-盐酸缓冲液作阻断剂,配合碱性磷酸酶检测系统作第一标记的方法分步进行免疫组化染色操作。结果:镜下观察在肿瘤组织中,Ki-67定位于细胞核呈蓝黑色, Net-1定位于细胞质呈棕黄色,CD34定位于血管内皮细胞。染色鲜艳,对比鲜明。结论:该法对于运用免疫组化方法研究原位显示3种抗原及其之间的关系具有一定的实用价值。     

病毒性肝炎、癌旁肝硬化和肝癌中bcl-2、c-myc及p63表达

目的：研究肝癌、癌旁肝硬化及病毒性肝炎3种病变中c-myc,bcl-2基因蛋白和p63的表达特征，探讨其对肝癌发生的影响。方法：采用免疫组化（S－P）法检测石蜡包埋组织中c-myc,bcl-2和p63的表达.结果：c-myc,bcl-2蛋白和p63均可表达于胞质和胞核中，c-myc在3种病变中的阳性表达率与表达强度均无差异；bcl-2在3种病变中的阳性表达率虽无差异，但在癌旁肝硬化中，其强阳性率高于肝癌与慢性病毒性肝炎，并在肝癌低分化组阳性表达呈降低趋势；p63阳性主要表达于癌旁肝硬化与肝癌中，并高于慢性病毒性肝炎；c-myc,bcl-2和p63在肝癌中阳性表达的相关性检验显示c-myc与bcl-2阳性率呈正相关（r-0.6742)。结论：c-myc在慢性病毒性肝炎、癌旁肝硬化及肝癌中的持续表达可引起肝细胞增殖和选择性的转化导致癌变。bcl-2的抗凋亡作用在肝癌形成早期并与c-myc具有协同作用。p63在肝癌形成早期可能起促癌作用。