PAI－1糖基化位点突变体的构建及其在哺乳动物细胞中表达

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡＩ－１）是一种Ｍｒ为５０×１０３的单链糖蛋白，有３７９个氨基酸残基，３个Ｎ型糖基化位点。构建ＰＡＩ－１糖基化突变体，以便研究糖链的功能。用寡核苷酸定位突变技术将３个糖基化位点２０９，２６５，３２９位进行突变，把３个糖基化位点都发生了突变的ＰＡＩ－１ｃＤＮＡ组装到真核表达载体ｐＳＶ２中，得到真核表达质粒ｐＺＨ－ｐ１－Ｍ３Ｅ；在二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯｄｈｆｒ－）中进行短暂表达，用发色底物法和夹心ＥＬＩＳＡ方法检测培养液中ＰＡＩ－１的活性和含量。结果：糖基化位点突变的ＰＡＩ－１能在ＣＨＯ细胞中表达，但表达水平及活性较低。非糖基化ＰＡＩ－１的活性和抗原分别为４．３４ＩＵ／ｍｌ和３．１５μｇ／Ｌ结论：用寡核苷酸定位突变方法获得了ＰＡＩ－１糖基化突变体，并且在ＣＨＯ细胞中得到表达。     

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA表达质粒的构建及其在哺乳动物细胞中的表达

建立Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡⅠ－１）ｃＤＮＡ哺乳动物细胞表达体系。用人工合成的６个寡核苷酸连接成编码ＰＡⅠ－１Ｎ－端１０个氨基酸和２３个氨基酸的信号肽顺序；将构成的完整ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ插入真核表达质粒ｐＳＶ２ｄｈｆｒ中，获得真核表达质粒ｐＺＹＳ－１；将ｐＭＡ２１２中的ｈＭＴ－ⅡＡ的起动子再插入ｐＺＹＳ－１，使ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ受ＳＶ４０和ｈＭＴ－ⅡＡ双启动子控制，得ｐＺＹＳ－２。２个表达质粒分别在ＣＯＳ－７细胞中进行表达。结果：获得两个真核表达质粒，在ＣＯＳ－７细胞中得到表达，在培养液中的ＰＡⅠ－１活性和抗原含量分别为２３４．７ＩＵ／ｍｌ和３０μｇ／Ｌ。结论：ｐＺＹＳ－１和ｐＺＹＳ－２两株ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ真核表达质粒在ＣＯＳ－７细胞中能有效表达和分泌。     

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA表达质粒的构建及其在哺乳动…

建立Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂ｃＤＮＡ哺乳动物细胞表达体系。用人工合成的６个寡核苷酸连接成编码ＰＡＩ－１Ｎ端１０个氨基酸和２３个氨基酸的信号肽顺序；将构成的完整ＰＡＩ－１ｃＤＮＡ插入真核表达质粒ｐＳＶ２ｄｈｆｒ中，获得真核表达质粒ｐＺＹＳ－１。     

PAI—1糖基化位点突变体的构发起家主其在哺乳动物细胞…

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑剂是一种Ｍｒ为５０×１０＾３的单链糖蛋白，有３７９个氨基酸线基，３个Ｎ型糖基化位点。构建ＰＡＩ－１糖基化突变化，以便研究糖链的功能。用寡核苷酸定位突变技术将３个糖基化位点２０９，２６５，３２９位进行突变。     

生殖器感染继发输卵管盆腔积脓10例临床分析

<正> 临床资料本组39例,其中因生殖器感染而继发的输卵管、盆腔积脓10例,占10%.发病年龄21～36岁.未婚2例,均有性生活史.已婚8例,其中4例有月经期不洁或同房     

妊娠末期合并腹内疝、肠扭转1例

患者20岁,住院号22203.孕1产0,妊娠40周,因食不洁饮食,上腹部疼痛伴恶心、呕吐10小时,自觉胎动消失1小时于1990年8月6日急诊入院.查体:T36.5℃,P76次/分,R20次/分,Bp15/9kPa     

804例停经患者HCG RIA

本文对近一年内来自妇科门诊的804例停经患者进行了HCG测定,现将结果进行探讨。材料和方法一、材料:804病例均来自妇科门诊,无其它滋养层细胞疾病史,停经时间为32～90天,年龄20～40岁。二、方法:HCG RIA kit由北京原子能所提供。检测仪器为西安二六二厂生产的全自动γ免疫计数器。患者采血后立即分离血清置4℃冰箱每周检测二次,药盒正常值为100mIU/ml以下。结果按停经时间分为4组,HCG值>正常值者判为