槲皮素对NB4,HL—60细胞形态、PML mRNA及蛋白表达的影响

目的 探讨槲皮素对NB4,HL-60细胞的形态、PML mRNA及蛋白的表达影响。方法 以NB4,HL-60细胞为研究对象,细胞形态学观察采用Wright′s染色法及荧光染色法;PML蛋白细胞内分布定位采用免疫荧光技术;PML mRNA表达采用RT-PCR法。结果 1）经槲皮素处理后,各组细胞形态学上均出现凋亡特征性改变。2）槲皮素处理后NB4细胞内融合蛋白降解,PML聚积于POD结构,随后降解;在HL-60细胞,PML发生相似改变。3）槲皮素处理后各组细胞PML mRNA表达均无显著影响。结论 在槲皮素诱导下,PML在蛋白水平参与诱导白血病细胞凋亡机制;槲皮素能诱导,NB4,HL-60细胞凋亡,抑制白血病细胞生长。     

应用基因表达谱芯片研究硫化砷作用后K562细胞基因表达的变化

目的：利用基因表达谱芯片检测K562细胞在硫化砷作用前后基因表达的差异性进行比较研究。方法：研究对象为人慢性粒细胞白血病细胞株K562,用cy3和cy5两种不同的荧光染料通过逆转录反应将K562经硫化砷作用前后的mRNA分别标记成两种探针,并与载有一组靶的基因表达谱芯片进行杂交,通过计算机扫描分析得到这些基因在经硫化处理前后的表达差异,结果：筛选出包括与DNA结合,转录和转录因子,蛋白翻译,细胞周期等相关表达差异的基因共11条,其中7条表达上调,4条表达下调,结论：周期素E2,周期素G2可能参与硫化砷诱导K562细胞凋亡发生机制。     

ATRA和雄黄对白血病细胞PML基因及蛋白表达的影响

目的探讨PML基因及蛋白在白血病细胞中的表达和细胞内分布定位。方法经ATRA、雄黄处理后的NB4、HL-60、K562细胞为研究对象,细胞形态学观察采用Wright’s染色法及荧光染色法;PML蛋白细胞内分布定位采用免疫荧光技术;PMLmRNA表达采用RT-PCR法。结果 1.ATRA处理后,NR4和HL-60细胞形态学上出现分化表现,K562细胞无变化;经雄黄处理后,各组细胞形态学上均出现凋亡特征性改变。2.ATRA处理后,NB4细胞内融合蛋白降解,PMl蛋白恢复定位,HL-60、K562细胞内PML蛋白定位分布无变化;雄黄处理后NB4细胞内融合蛋白降解,PML聚积于POD结构,随后降解;在HL-60及K562细胞,PML发生相似改变。3.ATRA、雄黄处理后各组细胞PMLmRNA表达均无显著影响。结论在不同诱导剂刺激下,PML基因在蛋白水平参与细胞终末分化及诱导白血病细胞凋亡机制;PML蛋白在POD中发挥诱导凋亡控制细胞生长的作用。     

EFFECTS OF ANTI-PML/RARα OR ANTI-PML ANTISENCE ON THE GROWTH, DIFFERENTIATION AND APOPTOSISOF NB4 CELL LINES

R6sumeobjectifPourdluciderleseetsd,oligonucleotidesantisensantiusPML/RARaetanti-PMLsurcroissance,dmerenciationetaPoPtosedeligniecellulaireNB4.MdthodesColorationparWrightetaitemPloyeepourobserverlamorPhologiecellulaire,flowucytometrieetelectroPhor6sedeDNAsurgelpouraPoPtosecellulaire,essaiparculturesurmethylcellulosepourmesured'unitedeformationdecoloniedescellulesleucemiques(AML-CFU)etexclusiondecolorationpartryPanbleupournumerationdescellulesvivantes.R/suItatsLesoligonucldotidesant…     

临床病理讨论——高热出血

病史摘要患者男性,40岁,住院号152251。1977年7月23日患者因畏寒、发热、咳嗽,体温30℃～40℃持续不退,在当地医院诊治。血白细胞1400/立方毫米,肥达氏试验“O”1:80、“H”1:160。经合霉素、氯霉素、青霉素、链霉素等抗菌素治疗无效。用地塞米松后热可退,但停药后体温复升。因高热不退并有进行性消瘦、反复鼻衄、牙齦出血来沪诊治,于1977年9月1日入院。入院体检:神清,消瘦,贫血貌,体温40℃,血压120/70毫米汞柱。巩膜无黄染,口腔粘膜有出血点及溃疡,伴霉菌生长。胸骨无压痛,心率100次/分,律齐,心尖区Ⅲ级收缩期吹风样杂音。两肺清晰,肝上界第五肋间,下界锁     

血清酸性异铁蛋白放射免疫测定法的建立

异铁蛋白的结构基础和临床意义的研究已引起诸多关注.酸性异铁蛋白(AIF)可作为肿瘤标记物[1].     

CYP3A5参与急性白血病耐药机制的研究

目的探讨细胞色素P4503A亚家族多肽5(CYP3A5)在急性白血病(AL)耐药机制中的作用。方法RT-PCR、免疫组化、MTT法检测白血病细胞株、AL患原代细胞CYP3A5转录表达与细胞株对化疗药物敏感性、患化疗疗效及预后的相关性，检测化疗药物对CYP3A5的转录调控；构建CYP3A5重组质粒稳定转染HI，60细胞，观察细胞对化疗药物的敏感性是否改变。结果转录CYP3A5的K562、U937细胞与不转录CYP3A5的NB4、HL-60细胞相比，对柔红霉素明显耐受(耐药倍数均为2．1倍)；原发耐药组患初治时CYP3A5阳性率(17．2％)显高于持续完全缓解(CCR)组(0．4％)与继发耐药组初治时(5．4％)，早期复发组第1次完全缓解(CR1)时阳性率(23．9％)显高于CCR组CR时(1．3％)；柔红霉素可诱导K562／A02、HL-60／ADR细胞CYP3A5转录；HL-60细胞稳定转染CYP3A5重组质粒后明显耐受柔红霉素、长春新碱(耐药倍数分别为3．0，4．0倍)。结论白血病细胞表达CYP3A5可能使其原位代谢多种化疗药物，是直接导致AL耐药的机制之一。     

白血病病人治疗前与缓解后红细胞多胺水平变化的观察

本文观察了20例白血病病人治疗前外周血红细胞多胺水平,发现精脒、精胺水平增高,以精胺为著(P<0.001),精脒/精胺比率显著降低(P<0.001),缓解后(7例)红细胞精脒、精胺水平均有下降(P<0.05),但仍显著高于对照组(P<0.025);精脒/精胺比率上升(P<0.025),但仍低于对照组(P<0.001).这些结果提示白血病病人的红细胞多胺水平的动态观察有助于预测病情的演变.     

重组粒(单)集落刺激因子治疗药源性粒细胞缺乏症

药源性粒细胞缺乏症(粒缺)在国内外部有报道,其死亡率超过20％。如何提高粒缺患者的生存率已引起医学界关注。我院用重组粒(单)集落刺激因子(rhG/GM-CSF)共