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[目的]构建人maff基因表达载体并在人肝癌细胞系HepG2细胞中表达。[方法]PCR(聚合酶链式反应)扩增人maff基因,并将其和克隆质粒连接,转染到大肠杆菌中扩增,酶切鉴定,然后将目的基因和表达载体连接,转染到人肝癌细胞系HepG2细胞中表达并用westernblo(t蛋白质印记)进行鉴定。[结果]经酶切和westernblot鉴定,人maff基因表达载体可在真核细胞内表达Maf F蛋白。[结论]该实验构建了人maff基因真核表达载体,为进一步研究中药预防肿瘤发生提供实验基础。 相似文献
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医学免疫学是高等医学院校的基础课和必修课,既是基础医学的重要课程,又是生命科学的前沿学科,其重要性不言而喻。但是免疫学理论抽象而更新迅速,使初学者接受起来有一定难度。而实验教学是理论教学的补充及深入, 相似文献
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目的比较高血压病血瘀证与非血瘀证患者抵抗素、脂联素等差异,探讨高血压病患者脂肪因子与血瘀证的关系。方法空腹取静脉血制备血浆、血清,酶免检测血清脂联素、抵抗素,放免检测血清瘦素、胰岛素和血浆内皮素、肿瘤坏死因子,酶法检测空腹血清血糖、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇浓度。结果血瘀证检出率为25%。与非血瘀证组相比,血瘀证组瘦素、内皮素浓度升高(P〈0.05),脂联素水平降低(P〈0.05);抵抗素、胰岛素、肿瘤坏死因子水平差异无统计学意义(P〉0.05);抵抗素、脂联素二者与瘦素、胰岛素、内皮素均未见明显相关关系(P〉0.05)。胰岛素与瘦素呈正相关(r=0.714 2,P〈0.01)。结论肥胖与血瘀证相关;瘦素与血瘀证的联系可能是通过调节血管活性因子水平实现的,脂联素具有防止血瘀证形成的作用;高血压病肥胖者血瘀证的形成可能与抵抗素无关。 相似文献
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目的?探讨抗复感颗粒对肺炎幼龄大鼠的干预作用及机制。方法?将50只大鼠随机分为正常组、模型组、头孢曲松组、抗复感颗粒组、抗复感颗粒加头孢曲松联合用药(简称联合用药)组,每组10只。运用肺炎链球菌经气管滴注构建制备幼龄大鼠肺炎模型。抗复感颗粒组给予20 g /(kg·d)抗复感颗粒灌胃及0.05 mL生理盐水肌肉注射;联合用药组给予抗复感颗粒20 g /(kg·d)灌胃及肌肉注射头孢曲松100 mg /(kg·d);头孢曲松组给予0.6 mL/d生理盐水灌胃及肌肉注射头孢曲松100 mg /(kg·d);正常组、模型组均给予等量生理盐水灌胃及肌肉注射。连续给药5天后,观察大鼠一般情况;瑞氏-姬姆萨染色对肺泡灌洗液(BALF)中细胞的总数及分类细胞数计数;HE染色观察肺及大肠组织炎症细胞浸润;qRT-PCR法检测大鼠肺组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-6 mRNA表达水平;系列生化法检测大鼠大便肠球菌、双歧杆菌、大肠杆菌、乳酸杆菌的变化。结果?与模型组比较,各药物干预组肺组织炎症细胞浸润明显改善;抗复感颗粒组肠道轻度炎症细胞浸润,联合用药组肠道无明显异常。与正常组比较,模型组大鼠体重减轻(P<0.05),白细胞总数升高,其中中性粒细胞和淋巴细胞所占比例均升高(P<0.01),巨噬细胞比例降低(P<0.01);肺组织TNF-α、IL-6 mRNA水平升高(P<0.01);肠道中肠球菌、大肠杆菌数增高,乳酸杆菌降低(P<0.01)。与模型组比较,各药物干预组白细胞总数、中性粒细胞及淋巴细胞比例均降低,巨噬细胞比例增高(P<0.01),TNF-α、IL-6 mRNA水平降低(P<0.01);抗复感颗粒组、联合用药组大鼠体重增加,肠道中肠球菌、大肠杆菌数降低,乳酸杆菌增多(P<0.05,P<0.01)。联合用药组较头孢曲松组及抗复感颗粒组白细胞总数下降(P<0.01),联合用药组较抗复感颗粒组乳酸杆菌减少(P<0.01)。结论?抗复感颗粒可改善肺炎幼龄大鼠肺组织炎症,降低肺组织炎性细胞因子IL-6、TNF-α mRNA水平,且不引起肠道微生态的紊乱。 相似文献
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目的比较高血压病血瘀证与非血瘀证患者抵抗素、脂联素等差异,探讨高血压病患者脂肪因子与血瘀证的关系。方法空腹取静脉血制备血浆、血清,酶免检测血清脂联素、抵抗素,放免检测血清瘦素、胰岛素和血浆内皮素、肿瘤坏死因子,酶法检测空腹血清血糖、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇浓度。结果血瘀证检出率为25%。与非血瘀证组相比,血瘀证组瘦素、内皮素浓度升高(P0.05),脂联素水平降低(P0.05);抵抗素、胰岛素、肿瘤坏死因子水平差异无统计学意义(P0.05);抵抗素、脂联素二者与瘦素、胰岛素、内皮素均未见明显相关关系(P0.05)。胰岛素与瘦素呈正相关(r=0.714 2,P0.01)。结论肥胖与血瘀证相关;瘦素与血瘀证的联系可能是通过调节血管活性因子水平实现的,脂联素具有防止血瘀证形成的作用;高血压病肥胖者血瘀证的形成可能与抵抗素无关。 相似文献
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猕猴桃水提物诱导二相酶产生及抗氧化的机制研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:本实验以人胃腺癌细胞株SGC-7901为模型,用猕猴桃水提物含药血清进行干预,探讨猕猴桃水提物诱导二相酶产生及抗氧化的机制.方法:取正常SD大鼠随机分为猕猴桃水提物高、中、低剂量组(用猕猴桃水提物溶液46.8,31.2,15.6 g·kg-1 ig)和正常对照组(ig给予生理盐水).连续14 d,每天ig 2次,于末次给药1h,腹主动脉取血制备猕猴桃水提物含药血清.取对数生长期的SGC-7901细胞,在不同时间段分别给予相应的含药血清进行干预.用免疫组化法检测SGC -7901细胞内活化状态的核因子相关因子2(Nrf2)的细胞定位;RT-PCR法检测猕猴桃水提物高剂量组含药血清对SGC-7901细胞内二相酶mRNA水平的影响.结果:免疫组化法染色观察结果显示与正常对照组相比,猕猴桃水提物含药血清低、中、高剂量组均可提高Nrf2细胞核内的表达水平,颜色从浅黄色变为棕黄色.经积分统计学分析差异有显著性(P<0.05或P<0.01).RT-PCR检测结果显示与正常对照组相比较,猕猴桃水提物可明显诱导二相酶谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)基因的表达(P<0.05),且诱导谷胱甘肽-S-转移酶(GST) -P1和GST-T1基因表达作用差异有高度显著性(P<0.01),但对二相酶GST-M1和醌氧化还原酶(NQ01)基因水平影响不大.结论:猕猴桃水提物可促使Nrf2进入核内,导致二相酶的表达增加,具有诱导细胞解毒抗氧化作用. 相似文献
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目的:探讨芒果苷对化疗荷瘤小鼠外周血细胞因子白介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及脾T淋巴细胞内第二信使环腺苷酸(cAMP)的影响.方法:建立肉瘤s180荷瘤小鼠模型,并使用环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)及CTX联合芒果苷对其进行治疗,采用HE染色法检测肿瘤组织的病理变化;ELISA法测定治疗后小鼠外周血细胞因子IL-2、TNF-α;酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测脾T淋巴细胞内第二信使cAMP的水平.结果:芒果苷具有联合CTX抗肿瘤作用,可拮抗CTX对荷瘤小鼠的毒副作用;能升高血清中IL-2的水平,提高TNF-α的水平;降低脾T淋巴细胞内cAMP的水平.结论:芒果苷可拮抗CTX对机体的毒副作用,维持机体的免疫,联合使用可增强化疗药物的抗肿瘤效果. 相似文献
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