索拉非尼联合5-氮杂-2′-脱氧胞苷对肝癌SMMC-7721细胞DNMT3B基因表达的影响

目的:探讨索拉非尼联合5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肝癌细胞SMMC-7721的作用及其调控DNMT3B基因表达可能的分子 机制.方法:单独及联合给药后以MTT法测定SMMC-7721的增殖,Transwell检测其侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法观 察DNMT3B、p-Akt-Ser473及ERK蛋白的表达.结果:索拉非尼、5-Aza-CdR对肝癌SMMC-7721细胞半数抑制浓度(IC50)分别为11、6 μmol/L,联合用药选取(6+4)μmol/L作为后续用药浓 度.与对照组比较单药及联合用药均能抑制细胞侵袭、促进细胞凋亡、减少p-Akt-Ser473和DNMT3B蛋白的表达(P<0.05~P<0.01).结论:索拉非尼和5-Aza-CdR联合用药能有效降低索拉非尼用药浓度,降低肝癌SMMC-7721细胞DNMT3B蛋白表达水平.     

鲁氏不动杆菌耐药性研究

目的分析医院鲁氏不动杆菌的临床分布及耐药性,为控制细菌耐药及医院感染提供依据。方法收集医院2009年2月-2012年11月住院及门诊患者分离出的非重复鲁氏不动杆菌40株,采用法国生物梅里埃公司VITEK-2Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统的革兰阴性杆菌鉴定卡(GNI卡),将细菌鉴定到种,采用GNS-148药敏试验卡对临床常用抗菌药物进行药敏试验。结果 40株鲁氏不动杆菌主要来源于痰液15株,占37.5%,其次为分泌物及血液,分别占20.0%及12.5%;其主要分布在重症监护病房(ICU)10株,占25.0%,其次为骨科及感染科,分别占20.0%及12.5%;共检出多药耐药菌14株,检出率35.0%;鲁氏不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低,为17.5%,对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、妥布霉素、美罗培南、阿米卡星、左氧氟沙星耐药率达25.0%~37.5%,对其余抗菌药物的耐药率均>50.00%。结论医院鲁氏不动杆菌耐药率较高,其临床主要的危险因素为抗菌药物应用与侵入性操作,应提高对鲁氏不动杆菌耐药性及临床危险因素的重视。     

肺炎克雷伯菌耐药机制的研究进展

随着抗茵药物日新月异及其在临床治疗中的广泛应用甚至滥用,迫使细茵不断产生新的耐药机制以适应其生存环境。肺炎克雷伯茵是临床分离和院内感染最常见的致病菌之一。近年来,肺炎克雷伯茵表现出多重耐药现象,并具有复杂的耐药机制,导致临床抗茵药物治疗的失败和病程迁延,给临床抗感染治疗带来更多的困难和挑战。本文主要对肺炎克雷伯茵的耐药机制作一综述。     

某医院2012-2013年242株肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶及整合子耐药基因检测

目的 了解肺炎克雷伯菌主要的β-内酰胺酶和整合子耐药基因型,明确其耐药特性。方法 回顾性分析我院2012年1月至2013年5月临床分离的242株肺炎克雷伯菌药敏结果,聚合酶链反应(PCR)检测其β-内酰胺酶及整合子耐药基因。结果 242株肺炎克雷伯菌对16种抗生素存在不同程度的耐药,其中氨曲南、头孢唑啉、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松和头孢他啶耐药率较高,分别为76.86%、65.70%、63.64%、62.40%和59.92%;亚胺培南、丁胺卡那、厄他培南和哌拉西林/他唑巴坦较为敏感,分别为17.77%、18.88%、18.88%和23.55%。PCR结果显示,ESBLs基因阳性155株,占64.05%,主要为TEM型和SHV型,两者均存在的菌株有114株,占产ESBLs基因菌株的73.55%(114/155)。其次为KPC基因86株,占35.54%;此外AmpC基因43株,占17.77%,全部为DHA型。整合子基因128株,占52.89%,以整合子1(intI-1)为主,共检出120株,占49.59%。结论 我院肺炎克雷伯菌耐药情况严重,主要的耐药基因型为TEM型、SHV型、KPC和intI-1。     

miR-143调控DNMT3B表达对肝细胞癌耐阿霉素敏感性的影响

目的:构建耐药细胞株SMMC-7721/ADM,探讨miR-143在调控肝细胞癌耐阿霉素中的作用机制。方法:采用逐步递增阿霉素浓度法构建耐阿霉素细胞株SMMC-7721/ADM,评估其IC₅₀值;采用荧光定量PCR技术检测miR-143、DNA甲基转移酶3B （DNMT3B）、多耐药基因1（MDR1）变化、Bax和Bcl-2 mRNA表达水平;Western blotting检测DNMT3B蛋白表达;通过转染miR-143 mimics上调耐药细胞株SMMC-7721/ADM中miR-143表达水平后,检测耐药细胞IC₅₀、侵袭能力、细胞凋亡、DNMT3B、MDR1变化。应用脂质体-2000瞬时转染miR-143 mimics于耐药细胞株,观察上述指标变化。结果:成功构建耐药细胞株SMMC-7721/ADM,IC₅₀值升高78.97倍（P<0.01）,miR-143表达量降低,DNMT3B、MDR1、Bax、Bcl-2表达量升高（P<0.05~P<0.01）。转染miR-143 mimics后耐药细胞株IC₅₀值降低57%,侵袭能力下降,细胞凋亡增加,DNMT3B表达减少,MDR1 mRNA表达减少（P<0.01）。结论:miR-143可能通过降低DNMT3B表达提高肝细胞癌对阿霉素的敏感性。