雄黄对乳腺癌MCF-7/ADM细胞多药耐药的逆转及机制研究

目的　探讨中药雄黄对乳腺癌多药耐药细胞系 (MCF 7/ADM )的逆转作用及可能的逆转机制。方法　药物敏感试验采用四氮唑蓝 (MTT)比色法 ,细胞内药物浓度测定采用荧光分光光度法 ;基因表达水平检测采用RT -PCR法。结果　雄黄在 0～ 2 5 μg/ml浓度范围内对MCF 7/ADM细胞未见明显毒副作用 ;15 μg/ml、2 5 μg/ml雄黄逆转倍数分别为 2 0倍和 2 8倍 ,并能明显抑制mdr 1基因的转录水平。 结论　雄黄可以逆转MCF 7/ADM细胞的多药耐药性 ,并呈剂量依赖性 ;可能的逆转机制为下调mdr 1基因的表达     

基质金属蛋白酶在生殖中的作用与调控

在生殖过程的不同阶段,生殖系统在结构和功能上不断发生周期性的变化,其基质的水解和重建与基质金属蛋白酶(MMPs)关系密切。研究表明,MMPs可以在多种因素调节下,通过与其组织抑制因子的平衡表达在月经周期、胚泡植入与胎盘形成、分娩及分娩后子宫复旧等生殖过程中发挥重要的生理功能。     

基质金属蛋白酶在生殖中的作用与调控

在生殖过程的不同阶段，生殖系统在结构和功能上不断发生周期性的变化，其基质的水解和重建与基质金属蛋白酶(MMPs)关系密切。研究表明，MMPs可以在多种因素调节下，通过与其组织抑制因子的平衡表达在月经周期、胚泡植入与胎盘形成、分娩及分娩后子宫复旧等生殖过程中发挥重要的生理功能。     

Toll样受体5激动剂CBLB502蛋白的辐射防护作用

目的研究CBLB502蛋白辐射防护作用。方法 HCT116细胞经CBLB502刺激后,Western印迹法检测NF-κB入核,碱性磷酸酶报告基因法检测CBLB502对NF-κB报告基因的激活。150只C57BL/6J小鼠接受8.0 Gy60Coγ射线照射前随机分为PBS,WR2721,CBLB502 0.02、0.05和0.2 mg/kg共5组,观察小鼠受照后30 d存活率和平均生存时间。另外40只小鼠接受6.5 Gy60Coγ射线照射前随机分为PBS、WR2721、CBLB502 0.2 mg/kg组和正常对照组,照射前1 d和照后30 d内检测外周血细胞。结果 CBLB502可明显促进HCT116细胞NF-κB入核（P〈0.01）并呈剂量依赖性激活NF-κB报告基因（r=0.998 3）。CBLB502显著提高8.0 Gy60Coγ射线照射后小鼠的存活率,PBS,WR2721,CBLB502 0.02、0.05和0.2 mg/kg组小鼠照后30 d存活率分别为0、83.3%、13.3%、66.7%和100%;照射后小鼠平均存活时间除0.02 mg/kg给药组与PBS对照相比无差异外,其余各给药组较PBS对照组有显著提高。6.5 Gy60Coγ射线照射后小鼠外周血白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板急剧下降,CBLB502 0.2 mg/kg组上述指标降低持续时间较照射对照组明显缩短,开始恢复时间提前,各指标最低值亦明显高于照射对照组。结论 CBLB502蛋白具有体外生物学活性并对急性放射病小鼠有明显的辐射防护作用。     

维甲酸诱导大肠癌细胞分化后内质网结构及标志酶G6PA细胞化学的改变

葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ６ＰＡ）是内质网的标志酶，它的改变与肿瘤代谢有一定的关系．观察经维甲酸（ＲＡ）作用前后人大肠癌细胞系（ＣＣＬ－１８７）生物学特性的改变和内质网结构及标志酶Ｇ６ＰＡ电镜细胞化学分布的改变．结果表明：ＲＡ可诱导ＣＣＬ－１８７细胞成熟分化，碱性磷酸酶的活性明显提高；内质网的结构及标志酶Ｇ６ＰＡ的细胞化学分布亦趋同于正常分化细胞。     

ABC家族基因在乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM中的表达及雄黄对其作用初探

目的：探讨阿霉素耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADM的ABC家族基因的表达及其与敏感细胞系MCF-7/S的差异，观察中药雄黄对ABC膜转运蛋白超家族中各基因（mdr-1、mrp、bcrp）表达的影响。方法：应用RT-PCR检测ABC家族基因的转录表达，MTT法检测耐药性改变。结果：ABC家族基因在MCF-7/ADM细胞中均过表达，而在MCF-7/S细胞中均未见表达；雄黄可下调ABC家族基因的mRNA水平，降低化疗药物阿霉素（ADM）对MCF-7/ADM细胞的IC50。结论：乳腺癌MCF-7/ADM细胞获得ADM抗药性，与ABC家族基因过表达有密切关系；雄黄可部分逆转MCF-7/ADM细胞对ADM的抗药性。     

电离辐射诱导人肠上皮细胞焦亡机制

目的 探讨消皮素E(GSDME)介导的细胞焦亡参与辐射诱导的肠损伤分子机制及消皮素（GSDM）蛋白家族是否通过通用的信号通路调控细胞焦亡。方法 利用人正常结肠上皮NCM460细胞和人结肠癌HT-29细胞辐射不同剂量及辐射后不同时间,通过观察焦亡小泡、细胞存活、焦亡执行蛋白的切割进行焦亡指标的检测,对HT-29细胞过表达GSDME并辐射后通过RNA测序技术,对焦亡相关差异基因进行富集分析,筛选相关通路差异基因进行验证。结果 辐射诱导NCM460细胞发生显著的细胞焦亡,HT-29细胞过表达GSDME后辐射诱导GSDME激活发生显著的细胞焦亡。成功模拟人肠细胞焦亡状态,过表达GSDME-N和GSDMD-N具有超过50%的焦亡状态下的差异基因;测序分析显示,焦亡状态下的基因主要富集在免疫反应、炎症反应和Rap1信号通路等。结论 GSDME激活介导了辐射诱导肠细胞焦亡的发生,GSDM蛋白家族通过通用的调控模式参与细胞焦亡,辐射通过免疫反应、炎症反应和Rap1信号通路诱导GSDME/D激活调控细胞焦亡。     

对细菌粘附细胞染色方法的改进

对细菌粘附细胞染色方法的改进葛常辉杨佩满（大连医科大学组胚教研室）我们在研究双歧杆菌粘附培养的大肠癌细胞过程中，对细菌Ｇｒａｍ染色和细胞的ＨＥ染色进行了简化并加以改进，得到了较好的效果。细菌和细胞的染色方法有多种，常用的有Ｇｒａｍ染色和ＨＥ染色。双歧...