金花茶对衰老大鼠的抗氧化和抗凋亡作用

目的探讨金花茶对亚急性衰老大鼠抗氧化和抗凋亡的作用。方法拟建立大鼠亚急性衰老模型后,予高、低浓度金花茶灌胃干预。测肝脏和睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)含量及bax、bcl-2 mRNA表达水平。结果与衰老模型组对比,高、低浓度金花茶组肝脏和睾丸组织SOD含量和bcl-2 mRNA表达显著升高(P0.05),且MDA含量和bax mRNA表达明显下降(P0.05)。高、低浓度金花茶组间比较,上述指标有统计学差异(P0.05)。结结论金花茶可以提高SOD含量和降低MDA含量,通过上调bcl-2和下调bax表达水平,减慢肝脏和睾丸细胞的凋亡,对延缓机体衰老有重要作用。     

胰高血糖素样肽-1对葡萄糖刺激下胰岛β细胞胰岛素原合成的短期作用

目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)在高浓度、低浓度葡萄糖作用下对胰岛β细胞胰岛素原合成的短期影响。方法:将NIT-1细胞随机分为低浓度葡萄糖(LG)组、低浓度葡萄糖+GLP-1(LGG)组、高浓度葡萄糖(HG)组和高浓度葡萄糖+GLP-1(HGG)组4组。检测基线0h及葡萄糖和(或)GLP-1刺激后4h各组细胞胰岛素原基因和蛋白表达。结果:基线时各组胰岛素原表达无显著差异(P>0.05),4h后HG组、HGG组胰岛素原表达均明显增高(P<0.05),而LG和LGG组无明显变化(P>0.05)。组间比较,HGG组胰岛素原表达量明显高于LG组、LGG组及HG组(均P<0.05)。HG组胰岛素原表达量显著高于LG组、LGG组(均P<0.05)。结论:在高浓度葡萄糖条件下,短期GLP-1刺激可显著增加胰岛β细胞胰岛素原合成;GLP-1联合高糖对胰岛素原合成具有协同作用。     

高葡萄糖诱导的胰岛β细胞NIT-1细胞凋亡的拉曼光谱变化

目的探讨拉曼光谱在高葡萄糖诱导胰岛β细胞NIT-1细胞凋亡的变化,为研究细胞凋亡探索新路径。方法按不同葡萄糖浓度及不同培养时间将NIT-1胰岛β细胞分成6组。AnnexinV/PI染色流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率及激光光镊拉曼光谱仪检测细胞拉曼光谱,比较各组凋亡率及分析光谱信息。结果高糖培养组细胞凋亡率较对照组高,并且随着培养时间的延长高糖培养组的凋亡率逐渐增加（P〈0.05）,培养4 d后漂浮在培养基中的细胞大多数处于晚期凋亡状态。随着高糖培养时间的延长,拉曼光谱中代表蛋白质含量的1 001/cm峰峰面积及代表核苷酸含量的1 337/cm峰峰面积逐渐降低（P〈0.05）。结论高糖可以诱导NIT-1细胞凋亡,且凋亡率随诱导时间的延长而增加。拉曼光谱可以反映凋亡细胞内蛋白质与核苷酸含量的降低。     

波动性高糖对INS-1细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的探讨波动性高糖对INS-1细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响及其分子机制。方法将INS-1细胞随机分为三组。正常对照组(NG):含5.5 mmol/L葡萄糖;持续高糖组(SHG):含33.3 mmol/L葡萄糖;波动性高糖组(IHG):含5.5 mmol/L或33.3 mmol/L葡萄糖,每24 h交替换液1次,均培养3 d。3 d后检测各组INS-1细胞活性及凋亡百分率,胰岛素分泌量,Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(CytC)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平以及胰岛素(insulin)和胰岛十二指肠同源盒-1(PDX-1)mRNA表达水平。结果与NG组相比,SHG组与IHG组凋亡率均明显升高,细胞活性明显降低,Bax、CytC及Caspase-3表达明显增强,胰岛素分泌量及insulin、PDX-1 mRNA表达水平均明显降低(P均<0.01);与SHG组相比,IHG组细胞活性及胰岛素分泌量明显降低,凋亡率及Caspase-3明显增加(P均<0.01),Bax、CytC表达水平与insulin及PDX-1 mRNA表达水平均未见统计学差异。结论波动性高糖能导致胰岛细胞凋亡增加和功能障碍,其机制可能与上调Bax、CytC、Caspase-3及降低insulin与PDX-1基因表达等相关。