复方湿生扁蕾提取液镇痛、抗炎及急性毒性研究

目的 研究复方湿生扁蕾提取液的镇痛、抗炎作用,并考查其单次给药的急性毒性反应,为临床用药提供一定的理论依据.方法 通过热板致小鼠疼痛、二甲苯致小鼠耳肿胀模型,观察复方湿生扁蕾提取液对小鼠的镇痛、抗炎作用;通过单次以最大灌胃体积不同浓度给药观察该复方提取液对小鼠的急性毒性.结果 本复方提取液具有一定的镇痛、抗炎作用,复方组给药前后的痛阈差值与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.01),复方组对二甲苯致小鼠耳肿胀抑制率达31.7%.100、120 g·kg-1剂量组给药后4 h之内部分小鼠出现昏睡、萎靡少动、进食减少、稀便、反应迟钝等临床症状,这些症状在2d内逐渐消失.观察期间这两复方组体重增长缓慢,观察结束后剖检主要脏器未见肉眼可见病变.结论 在100、120 g·kg-1剂量下发现对小鼠体重具有不良影响,未发现致小鼠死亡及器官性病变的毒性作用,其LD50大于120 g·kg-1,安全性较好,可一定程度上为临床用药提供实验依据.     

湿生扁蕾对结肠癌微环境中HMSCs恶性增殖以及CD34、CD90的影响

目的:探究湿生扁蕾乙酸乙酯部位对结肠癌微环境中人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,HMSCs)恶性增殖及表面标志分子CD34、CD90表达的影响。方法:通过MTT法筛选湿生扁蕾乙酸乙酯部位作用于SW480细胞和HMSCs的最佳给药剂量。建立SW480和HMSCs细胞Transwell非接触共培养模型,将试验分为正常对照组、肿瘤细胞对照组、共培养组和湿生扁蕾给药组,分别采用细胞计数试验、流式细胞术FCM观察各组细胞的增殖、周期及HMSCs表面标志分子CD34和CD90的表达情况。结果:湿生扁蕾乙酸乙酯部位最佳给药剂量为200μg/ml,100μl。与正常对照组相比,共培养组HMSCs增殖能力增强,G1期细胞比例明显降低,S期和G2/M期细胞比例明显升高,且HMSCs表面标志分子CD34阳性表达率升高,CD90阳性表达率降低。与共培养组相比,湿生扁蕾给药组HMSCs增殖能力降低,G1期细胞比例明显升高,S期和G2/M期细胞比例明显降低,且HMSCs表面标志分子CD34阳性表达率降低,CD90阳性表达率升高。结论:结肠癌微环境中HMSCs增殖能力增强,且HMSCs表面标志分子阳性表达率发生显著改变,提示HMSCs发生恶性增殖,且湿生扁蕾乙酸乙酯部位可抑制结肠癌微环境中HMSCs的恶性转变。     

藏药湿生扁蕾提取物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用研究

目的研究藏药湿生扁蕾不同溶剂提取物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将54只雄性小鼠随机分为空白组、模型组、联苯双酯对照组、湿生扁蕾水提取物组、湿生扁蕾醇提取物组和湿生扁蕾醇水提取物组6组,每组9只。各组分别灌服生理盐水,联苯双酯溶液,湿生扁蕾水提取物、乙醇提取物、乙醇和水提取物,灌胃7 d后,除空白组外,其余各组均灌服1.5%四氯化碳花生油20 mL/kg造模。24 h后经眼眶静脉丛取血,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及肝组织中丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并观察小鼠肝脏病理学改变。结果与空白组比较,模型组小鼠血清ALT,AST活性及肝组织中MDA含量明显升高,肝组织中GSH-Px活性明显降低,差异均有统计学意义(P0.01);与模型组比较,湿生扁蕾不同溶剂提取物组及联苯双酯对照组小鼠血清ALT,AST活性及肝组织中MDA含量明显降低,肝组织中GSH-Px活性明显升高,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01),其中以湿生扁蕾醇水提取物组作用最为显著(P0.05)。肝脏病理学观察结果显示,造模后模型组肝损伤程度严重,湿生扁蕾不同溶剂提取物组肝脏病理损伤程度明显减轻。结论藏药湿生扁蕾不同溶剂提取物可减轻四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤,改善小鼠肝功能,作用机制可能与其清除自由基、保护肝细胞膜结构和功能的完整性、提高肝细胞内的GSH-Px活性、增强机体抗氧化能力有关。     

基于药效学和化学方法的金蕾复方醇提工艺优选

目的优选金蕾复方醇提工艺条件。方法以金蕾复方药液对胆汁淤积小鼠模型的干预效果为指标筛选最佳提取溶媒,以当药黄素、当药醇苷含量及干膏率为综合考察指标,采用L_9(3~4)正交试验对料液比、提取时间、提取次数进行优化,筛选最佳提取工艺参数。结果金蕾复方醇提最佳工艺条件为:以70%乙醇为提取溶剂,料液比为1∶8,提取时间为1 h,提取次数为2次。结论本试验优选的提取工艺保证了金蕾复方的药效,简单合理、稳定可行,可用于该制剂的工业化生产。