人参糖肽的结构及其对Aβ25-35处理PC12细胞的抗凋亡作用

目的：研究人参糖肽的结构,探讨其对β淀粉样蛋白_25-35（Aβ_25-35）处理PC12细胞凋亡的保护作用,为开发人参抗阿尔茨海默病（AD）药物奠定理论基础。方法：采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）与Q ExactiveOrbitrap质谱联用分析人参糖肽结构。将鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞分为6组,加入含不同浓度（0、6.25、12.50、25.00、50.00和100.00 μmol·L^-1） Aβ_25-35的培养基,采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法测定PC12细胞的存活率。将PC12细胞分为空白对照组、模型组和给药组,模型组加入含有50.00 μmol·L^-1Aβ_25-35的培养基,给药组加入不同浓度（0.03、0.10、0.30和1.00 g·L^-1）人参糖肽和含有50.00 μmol·L^-1Aβ_25-35的培养基。采用CCK-8法测定PC12细胞的存活率,采用Annexin Ⅴ-FITC/PI法测定人参糖肽和Aβ_25-35处理后PC12细胞的凋亡率。将PC12细胞分为空白对照组、模型组和人参糖肽给药组,模型组加入含有50.00 μmol·L^-1Aβ_25-35的培养基,给药组加入不同浓度（0.10和0.30 g·L^-1）人参糖肽和含有50.00 μmol·L^-1Aβ_25-35的培养基,采用流式细胞术测定不同细胞周期PC12细胞的百分比。结果：人参糖肽结构分析得到肽链为NLSHYHSGSS、糖基为N1-HexNAc,肽链为SGSSSSSSSEDDGMGR、糖基为S6-HexNAc等20多个人参糖肽结构。当Aβ_25-35浓度为50 μmol·L^-1时,PC12细胞存活率为（55.45±2.34）%;与空白对照组比较,不同浓度Aβ_25-35处理组PC12细胞存活率明显降低（P<0.01）。与空白对照组比较,模型组PC12细胞存活率明显降低（P<0.01）;与模型组比较,给药组细胞存活率明显升高（P<0.05）。与空白对照组比较,模型组PC12细胞凋亡率升高（P<0.01）;与模型组比较,给药组细胞凋亡率降低（P<0.05）。与空白对照组比较,模型组S期PC12细胞百分比升高（P<0.05）;与模型组比较,给药组S期PC12细胞百分比降低（P<0.05）。结论：利用质谱法分析得到人参糖肽结构。人参糖肽可有效抑制Aβ_25-35处理PC12细胞的凋亡,具有神经细胞保护作用,其抗凋亡活性作用可能与抑制细胞S期阻滞有关。     

中药学硕士专业学位研究生培养的问题与对策

提升中药学硕士专业学位研究生培养质量,对于中医药产业的发展,有着重要的意义.以地方院校的C中医药大学为样本,通过对中药学硕士专业学位研究生培养现状进行分析,分析培养过程中出现的问题,提出提升人才培养质量的策略.     

清热养胃合剂的质量标准

目的:建立清热养胃合剂质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对制剂中牛至、金莲花进行鉴别,其中牛至的薄层色谱鉴别采用咖啡酸为对照品,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10:7.5:1)为展开剂;金莲花的薄层色谱鉴别采用芦丁为对照品和金莲花对照药材,以乙酸乙酯-甲酸-水(8:1:0.8)为展开剂。采用紫外分光光度法测定总黄酮的含量,高效液相色谱法测定芦丁的含量。结果:清热养胃合剂中的牛至、金莲花的薄层色谱具有鉴别特征、斑点清晰,与相应对照品均呈相同的鉴别反应;总黄酮含量测定中芦丁在0.134~0.670 mg线性关系良好(r=0.9999),平均回收率98.42%,RSD 1.2%。含量测定中芦丁在0.400~4.000 μg有良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为98.91%,RSD 1.2%。结论:鉴别方法专属性强、灵敏度高;定量方法简便快速、结果准确且重复性好,可用于控制清热养胃合剂的质量。     

高效液相色谱法测定治痫灵片中丹酚酸B的含量

目的建立治痫灵片中丹酚酸B含量的高效液相色谱测定方法.方法色谱柱Diamonsil c18,流动相为甲醇.乙腈-甲酸-水(3010159).结果丹酚酸B的线性范围为(0.64～6.40)μg,r=0.999 9,回收率为98.65%,RSD为0.81%(n=5).结论本法操作简便,结果准确.     

老年衰弱新兴标志物的研究进展及展望

衰弱已被视为一个重大的公共卫生问题,相对于大规模筛查老年衰弱的量表类工具而言,生物标志物可以更早、更客观地识别衰弱高危人群。本文对与衰弱相关的炎症、内分泌、氧化应激标志物等传统生物标志物的新进展以及存在的局限性进行综述,并对蛋白质生物标志物、表观遗传标记、神经元标志物、细胞外水分率比值等新兴标志物的潜在性进行探讨,提出标志物与功能参数结合、建立衰弱核心标志物小组、针对衰弱的过程状态选择不同的标志物等评估衰弱的新方法,应探索有价值的衰弱生物标志物补充到已有的研究中,有利于阐明衰弱的发病机制,对衰弱的预防、诊断及预后具有重要作用。     

游离股前外侧穿支皮瓣在足跟部创面的临床应用

目的 通过临床调查研究游离股前外侧穿支皮瓣在足跟部创面的应用情况,随访皮瓣预后及足部恢复情况得出相应的结论,为足跟部创面临床修复提供一些新的治疗思路。方法 收集2019年8月-2021年3月于济南市中心医院创伤骨科与烧伤整复外科采用游离股前外侧穿支皮瓣修复足跟部创面56例患者的临床资料,通过门诊、电话、微信方式进行随访足部皮瓣恢复情况,并采用美国骨科足踝评分(AOFAS)、足功能指数(FFI)进行评定,最后得出相应的结论。结果 56块股前外侧穿支皮瓣全部成活;其中3例发生动脉危象,2例发生静脉危象,经过探查重新吻合血管后皮瓣恢复血运;1例皮瓣远端部分坏死,予以清除坏死组织移植全厚皮片后愈合。足跟部外形恢复均可,较臃肿皮瓣,经1～3次皮瓣修薄整形手术,恢复较好外观,3～6个月恢复保护性痛觉与触觉,无皮肤溃疡,无张力性水疱形成,恢复负重及行走功能,均可满足基本日常活动需要。按美国骨科足踝评分(AOFAS)标准评定：优43例,良9例,可4例,优良占比93%;56例患足功能指数(FFI)均不超过70。结论 股前外侧穿支皮瓣穿支血管较恒定,供区丰富,供区相对隐蔽,术后供区瘢痕不明显,皮瓣外观恢复...     

人参糖蛋白对小鼠学习和记忆能力的影响

目的: 确定人参糖蛋白的基本化学组成,探讨其对东莨菪碱所致小鼠学习和记忆障碍的影响。方法: 采用中空纤维超滤设备,对已除去皂苷的人参水提取物进行分离。采用苯酚硫酸法测定总糖含量,Lowry法测定蛋白含量,高效液相色谱法(HPLC)测定人参糖蛋白的纯度和相对分子质量,将人参制备成1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生物后进行单糖组成分析。注射东莨菪碱建立小鼠记忆获得障碍模型,60只小鼠随机分为对照组(正常小鼠),模型组(训练后腹腔注射氢溴酸东莨菪碱2.5mg·kg^-1),阳性药组(训练前灌胃给药吡拉西坦9mg·kg^-1,30d),低、中、高剂量人参糖蛋白组(训练前灌胃给药,剂量为7.5、75.0、225.0mg·kg^-1),每组10只。水迷宫实验测定各组小鼠逃避潜伏期;跳台实验测定小鼠跨平台次数。结果: 人参糖蛋白总糖质量分数为58.41%,由7种单糖组成,其蛋白质量分数为19.93%,由17种氨基酸组成。人参糖蛋白相对分子质量分布在200~50000。Morris水迷宫实验,从第3天开始,与模型组比较,高剂量人参糖蛋白组小鼠平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),跨平台次数明显增加(P<0.01)。在对位训练中,与模型组比较,高剂量人参糖蛋白组小鼠60s内在平台所在象限s的时间明显延长(P<0.01),从第2天起,与模型组比较,低、中和高剂量人参糖蛋白组小鼠平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.05)。在跳台实验中,与模型组比较,低、中和高剂量人参糖蛋白组小鼠3min内的错误次数明显减少(P<0.05),中剂量人参糖蛋白组小鼠停留在平台上的潜伏期明显延长(P<0.05)。结论: 人参糖蛋白具有提高小鼠记忆能力的作用。     

人参活性糖肽的荧光标记鉴定及其在小鼠主要脏器组织中的分布

目的：对人参活性糖肽（PGG）进行荧光标记,观察其在小鼠主要脏器组织中的分布情况及其靶向趋势。方法：以异硫氰酸荧光素（FITC）为探针对PGG进行荧光标记,采用紫外分光光度法和红外分光光度法对PGG荧光标记物（PGG-FITC）进行结构分析,采用荧光分光光度法测定其荧光取代度。将78只小鼠随机分为13组,每组6只,其中6组小鼠注射PGG-FITC,6组小鼠注射FITC,1组小鼠作为空白对照组。给药后0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和24.0 h,采集各组小鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、肠和胃组织,采用荧光分光光度法测定小鼠主要脏器组织中PGG-FITC和FITC水平,并计算药时曲线下面积（AUC）和靶向效率（Te）。结果：PGG与FITC通过共价键连接,其荧光取代度为1.435%;与FITC组比较,PGG-FITC组小鼠主要脏器组织中的药物水平均明显升高（P<0.01）,脑组织中药物水平升高更为明显;FITC组小鼠主要脏器组织中AUC值从高到低依次为肝、脑、胃、肾、肠、心、脾和肺组织,PGG-FITC组小鼠主要脏器组织中AUC值从高到低依次为脑、心、肝、肾、脾、胃、肺和肠组织。结论：利用FITC对PGG进行荧光标记,PGG经过尾静脉注射后主要富集在小鼠脑部,具有明显的脑靶向趋势。