卡氏肺孢子虫MSG抗原基因片段真核表达质粒构建与表达

[目的]构建大鼠源卡氏肺孢子虫MSG抗原基因片段真核表达质粒,进行表达。[方法]以卡氏肺孢子虫DNA为模板,应用PCR扩增MSG基因片段,连接至pGEM-T Easy载体,再克隆至PCDNA3.1( )载体。构建的重组表达质粒经酶切、PCR鉴定后转染至COS-7细胞,并进行大量增殖。RT-PCR验证转染基因的表达。[结果]重组表达质粒PCDNA3.1( )/MSG经酶切及PCR鉴定结果表明构建成功。RT-PCR结果显示MSG基因片段成功转染至COS-7细胞,并在其中进行基因表达。[结论]成功构建了PCDNA3.1( )/MSG重组质粒,并在COS-7细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究打下基础。     

护理本科人体寄生虫学双语教学的探索

目的探讨人体寄生虫学双语教学在护理本科学生中的应用效果。方法在2007级护理学专业的人体寄生虫学教学中,将83名学生随机分成双语教学组（45人）和中文教学组（38人）进行教学。结果两个教学组在考试总成绩和试题得分上虽未见明显差异（P〉0．05）,但是调查问卷显示双语教学对于提高学生英语阅读能力、学习专业词汇的能力、英语水平的能力有很大的帮助。结论在护理学本科生中开展人体寄生虫学双语教学是可行的,对学生未来的可持续发展具有重要意义。     

护理本科人体寄生虫学双语教学的探索

目的探讨人体寄生虫学双语教学在护理本科学生中的应用效果。方法在2007级护理学专业的人体寄生虫学教学中,将83名学生随机分成双语教学组（45人）和中文教学组（38人）进行教学。结果两个教学组在考试总成绩和试题得分上虽未见明显差异（P〉0．05）,但是调查问卷显示双语教学对于提高学生英语阅读能力、学习专业词汇的能力、英语水平的能力有很大的帮助。结论在护理学本科生中开展人体寄生虫学双语教学是可行的,对学生未来的可持续发展具有重要意义。     

医学院校基础实验课教学改革探索

分析现代医学教育改革提出的背景,今后实验教学改革的方法、手段,教学硬件与软件的改进与革新,建立健全合理、公正的教师实验课教学质量评估体系等,目的是培养具有适应现代医学模式的创新型实用人才,同时致力于探索高等医学院校实验教学模式建构等方面的作用和意义,力争形成一种新型的课堂教学模式.     

日本血吸虫T2核酸酶的原核表达及活性分析

目的 构建日本血吸虫T2核酸酶表达载体,并进行体外表达和酶活性分析。方法 从日本血吸虫基因组数据库中找到与曼氏血吸虫虫卵抗原Omega-1同源性最高的蛋白AY814845,设计引物并通过PCR技术扩增得到该基因,将其成熟编码区连入pET32a表达载体,转化大肠杆菌并用IPTG诱导其表达,最后对表达产物的核酸酶活性进行分析。结果 成功的构建了日本血吸虫T2核酸酶的表达载体,其编码区能够在大肠杆菌中表达,且表达产物具有一定的核酸酶活性。结论 从体外扩增了日本血吸虫T2核酸酶AY814845,明确其表达产物具有核酸酶活性,为今后深入研究该蛋白的功能打下了基础。     

本科教学工作水平评估是提高教学质量的关键

近一时期，中央和教育部领导，非常重视高等教育教学质量问题。温家宝总理、国务委员陈至立同志以及教育部周济部长和吴启迪副部长在多不同时间段的不同场合反复强调，今后一个时期，高等教育的主要任务是提高教育教学质量，指示各级教育管理部门要切实把工作重点放到更加注重提高教育教学质量上来。     

海分枝杆菌感染活化星形胶质细胞对VEGFA表达的研究

目的研究分枝杆菌感染巨噬细胞后的条件培养基活化星形胶质细胞表达血管内皮生长因子A(VEGFA)作用及其可能的机制。方法用海分枝杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞后的条件培养基感染星形胶质细胞,采用qRT-PCR及ELISA检测VEGFA mRNA和VEGFA蛋白的表达情况,采用Western blot检测低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF-1α)的表达,ELISA检测加入HIF-1α抑制剂后VEGFA的表达。结果海分枝杆菌感染巨噬细胞后的条件培养基能活化星形胶质细胞,并在感染后12h~24h诱导HIF-1α明显表达,同时随着感染时间的延长,VEGFA表达逐渐增多,24h达到峰值。使用HIF-1α的抑制剂不能完全阻断VEGFA的合成。结论 HIF-1α可能参与分枝杆菌感染后星形胶质细胞表达VEGFA,且还可能有其他转录因子参与这一过程。     

大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达

目的构建大鼠源肺孢子菌抗原p55基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达。方法以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入COS-7细胞,RT-PCR检测其基因转录情况,SDS-PAGE鉴定其表达相应的目的蛋白质情况。结果成功扩增了p55基因片段,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,RT-PCR和SDS-PAGE方法证实该片段能在COS-7细胞中有效表达目的蛋白质。结论成功构建了大鼠源肺孢子菌p55基因片段的真核表达质粒载体,并在COS-7细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究奠定了基础。     

卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化

目的体外扩增卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,Pc)55kDa抗原(p55)570bp的基因片段,构建原核表达载体pGEX-570,诱导表达并纯化重组蛋白。方法以卡氏肺孢子菌DNA为模板,扩增其基因片段,连接至pGEM-T载体,随后构建pGEX-570重组表达质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定后将其转化入BL21大肠杆菌中,经IPTG诱导表达融合蛋白。采用透析袋电泳法纯化融合蛋白。结果重组表达质粒pGEX-570经酶切,PCR鉴定及测序结果表明构建成功。IPTG诱导表达融合蛋白GST-p55/570,分子量约为47kDa。用透析袋电泳法纯化重组蛋白,经SDS-PAGE确认正确。结论本研究成功构建了pGEX-570原核表达载体,诱导表达并纯化GST-p55/570融合蛋白。为进一步开展肺孢子菌55kDa抗原的研究奠定了基础。     

留学生人体寄生虫学双语实验教学探索与思考

通过对留学生人体寄生虫学实验课进行教学,从学生的情况、课前准备、双语教学模式、教学内容、多媒体教学及随堂测验等六个方面进行了阐述,在教学内容和教学方法上进行了探索,从中得到一些启发与经验.