DNA damage response in resting and proliferating peripheral blood lymphocytes treated by camptothecin or X-ray

DNA damage response (DDR) in different cell cycle status of human peripheral blood lymphocytes (PBLs) and the role of H2AX in DDR were investigated. The PBLs were stimulated into cell cycle with phytohemagglutinin (PHA). The apoptotic ratio and the phosphorylation H2AX (S139) were flow cytometrically measured in resting and proliferating PBLs after treatment with camptothecin (CPT) or X-ray. The expressions of γH2AX, Bcl-2, caspase-3 and caspase-9 were detected by Western blotting. DDR in 293T cells was detected after H2AX was silenced by RNAi method. Our results showed that DNA double strand breaks (DSBs) were both induced in quiescent and proliferating PBLs after CPT or X-ray treatment. The phosphorylation of H2AX and apoptosis were more sensitive in proliferating PBLs compared with quiescent lymphocytes (P<0.05). The expression levels of anti-apoptotic proteins Bcl-2 were reduced and cleaved caspase-3 and caspase-9 were increased. No significant changes were observed in CPT-induced apoptosis in 293T cells between H2AX knocking down group and controls. It was concluded that proliferating PBLs were more vulnerable to DNA damage compared to non-stimulated lymphocytes and had higher apoptosis rates. γH2AX may only serve as a marker of DNA damage but exert no effect on apoptosis regulation.     

结直肠癌腹膜转移治疗的基础与临床研究

在中国，结直肠癌(CRC)发病率在各癌种中位于第2位，死亡率在各癌种中位于第4位。其中5%～15%的CRC患者会发生同时性腹膜转移(PM),约20%会发生异时性PM。CRC PM是位于肝、肺转移之后的第3大常见转移方式。虽然化疗取得了较好进展，使CRC PM患者的预后有所改善，但CRC PM患者的生存获益仍较少。目前，主要采用细胞减灭术联合腹腔内热疗法，预后较好，但仍会复发。目前，CRC PM的机制主要是肿瘤细胞自身生物学发生改变及肿瘤微环境改变。随着人们对CRC PM机制的深入研究，CRC PM治疗的潜在途径也变得更加多样。该文简要介绍了临床常见CRC PM的治疗方法，并从CRC PM机制出发对CRC PM潜在治疗方法进行了综述。     

雷利度胺对多发性骨髓瘤KM3细胞的作用机制研究

目的研究雷利度胺对多发性骨髓瘤(MM)细胞KM3细胞凋亡的影响并初步探讨其作用机制。方法用台盼蓝拒染法检测雷利度胺对KM3细胞生长抑制的影响,运用流式细胞仪(Annexin-V/FITC法)检测细胞凋亡。结果不同浓度(0 nmol/L、40 nmol/L、80 nmol/L、100 nmol/L、200nmol/L)的雷利度胺分别作用于KM3细胞24 h后,KM3细胞的存活百分比逐渐减少,分别为100.0%±2.5%,87.2%±1.2%,72.1%±2.4%,61.8%±1.8%,50.1%±0.9%;细胞凋亡率随药物浓度的增加逐渐增加,分别为8.5%±0.8%、11.7%±1.4%、24.7%±1.8%、31.2%±2.3%、35.1%±1.4%。结论雷利度胺抑制KM3细胞的生长并诱导其发生细胞凋亡,而且不同浓度的雷利度胺对KM3细胞呈现剂量依赖性抑制作用。     

生长激素对MOLT-4细胞增殖的影响

生长激素(GH)是由脑垂体前叶嗜酸性细胞所分泌的生长刺激因子[1].我们通过研究rhGH是否对人T淋巴细胞型白血病细胞株(Molt4)具有增殖作用以及观察生长激素受体(GHR)在Molt-4细胞中的表达,以期为rhGH的临床研究提供实验依据.     

X射线对人外周血淋巴细胞DNA损伤修复和凋亡的影响

目的 研究不同时间诱导X射线照射的淋巴细胞进入细胞周期DNA损伤修复与凋亡的影响.方法 X射线(0.5 Gy)作用于正常人外周血淋巴细胞,以照射后不同时间点(0、4 h)分别加入PHA并分成两组,即照射后0 h加PHA组(A组)和照射后4 h加PHA组(B组),再分别培养0、0.5、2 h,用流式细胞术和免疫印迹法检测A组和B组γ-H2AX蛋白的表达,Annexin-V/PI法分析A、B两组的细胞凋亡率.结果 流式细胞术及免疫印迹结果均显示A组的γ-H2AX蛋白表达高于B组(P＜0.05),且均先升高后降低.A组细胞凋亡率亦大于B组.结论 不同时间诱导被打击的淋巴细胞进入周期其可能发生DNA修复并同时伴随细胞凋亡的发生.     

太宁栓联合祛毒煎剂对急性白血病患者化疗后肛周感染的预防作用研究

目的:研究太宁栓联合祛毒煎剂对急性白血病(acute leukemia,AL)患者化疗后肛周感染的预防作用。方法:收集曾有肛门疾病如肛裂、痔疮病史的68例AL化疗患者,随机分为2组,治疗组采用太宁栓塞肛联合祛毒煎剂坐浴治疗,直至骨髓恢复,对照组采用传统的1∶5000高锰酸钾液坐浴治疗,直至骨髓恢复。比较2组AL肛周感染发生率。结果:对照组32例AL中有10例发生肛周感染,发生率31.25%;治疗组36例AL中有4例发生肛周感染,发生率11.11%,较对照组肛周感染率明显降低(P<0.05)。结论:太宁栓塞肛联合祛毒煎剂坐浴治疗法对预防AL化疗后肛周感染具有显著疗效,有助于化疗过程的顺利完成和改善患者化疗期间的生活质量。     

美罗华加沙利度胺联合化疗治疗侵袭性B细胞非霍奇金淋巴瘤的疗效分析

目的：评价美罗华联合沙利度胺化疗治疗侵袭性B-细胞非霍奇金淋巴瘤的临床疗效。方法：采用前瞻性对照分析,对60例侵袭性B-细胞非霍奇金淋巴瘤患者随机分成2组,即美罗华＋CHOP组（对照组）和美罗华＋CHOP＋反应停组（观察组）,比较2组患者的总有效率,总生存及无进展生存。结果：观察组：CR28例（80%）,PR5例（14.3%）,总有效率（CR＋PR）94.3%。对照组：CR25例（72%）,PR3例（12%）,总有效率（CR＋PR）84%。2组有显著差异（P〈0.05）。总生存：观察组：35例患者1年、2年、3年OS率分别为91.4%（32/35）,85.7%（30/35）,74.3%（26/35）;对照组：25例患者1年、2年、3年OS率分别为84%（21/25）,64%（16/25）,52%（13/25）,2组有显著差异（P〈0.05）。无进展生存率比较：观察组：35例患者1年、2年、3年PFS率分别为88.6%（31/35）,71.4%（25/35）,57%（20/35）;对照组：25例患者1年、2年、3年PFS率分别为68%（17/25）,52%（13/25）,36%（9/25）,2组有显著差异（P〈0.05）。而且不良反应轻。结论：美罗华联合反应停化疗治疗侵袭性B-NHL疗效显著,不良反应轻,值得临床推荐。     

干扰素-α联合雷利度胺对多发性骨髓瘤细胞的增殖抑制作用研究

目的:探讨干扰素联合雷利度胺对多发性骨髓瘤细胞的增殖抑制作用。方法:实验分为3组:干扰素联合雷利度胺组(IFN+LEN组),各孔培养基中添加100μg/L雷利度胺和200 U/ml干扰素-α,雷利度胺组(LEN组),各孔培养基中添加100μg/L雷利度胺;对照组(CTL组),U266细胞正常培养。分别分析共培养的U266细胞的增殖水平、细胞周期以及促瘤因子血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达水平。结果:干扰素联合雷利度胺可以较显著抑制人骨髓瘤细胞U266的增殖,诱导U266细胞的周期停滞,并能显著抑制促瘤细胞因子血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的表达水平。结论:干扰素联合雷利度胺在抑制人骨髓瘤细胞中具有潜在价值。     

高表达HAX1对人结肠癌细胞SW480凋亡的影响

观察高表达人血细胞特异蛋白1相关蛋白X-1(haematopoietic cell-specific protein 1-associated pro-tein X-1,HAX1)对结肠癌SW480在化疗药物打击后凋亡的影响。方法构建HAX1高表达的质粒,并瞬时转染入结肠癌细胞SW480中(HAX1组,转染了对照空质粒的结肠癌细胞SW480为CTL组),24h后加入顺铂(10μg.mL-1)处理细胞约36h,用Sub-G1法及Annexin V-FITC流式检测法检测并比较2组细胞凋亡率的差别。同时用Western blot方法检测转染细胞的HAX1表达情况及凋亡途径相关蛋白caspase-9和PARP的变化。结果顺铂打击36h后,Sub-G1法显示CTL组平均凋亡率为(33.67±2.50)%,HAX1组诱导凋亡率均值(16.33±2.10)%,比CTL组降低(P=0.026)。Annexin V-FITC法检测CTL组凋亡率均值为(46.33±9.30)%,HAX1组凋亡率均值为(24.33±6.10)%。HAX1组比CTL组明显降低(P=0.013)。Western blot证实在细胞高表达HAX1蛋白后,可明显降低caspase-9及PARP的剪切体蛋白的表达。结论高表达HAX1抑制顺铂诱导的SW480细胞凋亡,这种抑制作用是通过降低凋亡途径caspase-9及PARP剪切体表达情况完成的。