瘦素受体基因Pro1019 Pro变异与浙南地区2型糖尿病的相关性研究

目的研究瘦素受体Pro1019 Pro基因多态性与2型糖尿病的关系。方法运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法测定无亲缘关系的604例浙南地区汉人的瘦素受体基因Pro1019 Pro的基因型（其中2型糖尿病合并肥胖组201例,2型糖尿病非肥胖组150例,对照组253例）,并分析Pro1019 Pro基因多态性与糖尿病的关系。结果2型糖尿病肥胖组Pro1019 Pro基因型GG、GA及AA的频率分别为0.080、0.124和0.796,G和A等位基因频率分别为0.142和0.858;2型糖尿病非肥胖组基因型GG、GA和AA的频率分别为0.067、0.287和0.647,G和A等位基因频率分别为0.210和0.790;对照组基因型GG、GA及AA的频率分别为0.083、0.360和0.557,G和A等位基因频率分别为0.263和0.737。②2型糖尿病合并肥胖组A、G等位基因分布频率与对照组比较差异有显著性（P〈0.01）,非肥胖组与对照组比较无明显差异（P〉0.05）。结论浙南地区汉族人群存在瘦素受体基因Pro1019 Pro变异,它可能是该地区人群2型糖尿病合并肥胖患者的遗传易感标记,A等位基因与2型糖尿病发病有一定关系。     

术前循环肿瘤DNA含量对结直肠癌根治性切除术后3年生存率的预测价值

[目的]探究术前循环肿瘤DNA(ctDNA)含量对结直肠癌根治性切除术后3年生存率的预测价值。[方法]选择2014年3月~2016年3月行结直肠癌根治性切除术的78例患者,采用磁珠分离法提取受试者血浆ctDNA,荧光定量仪检测ctDNA的含量;随访至2019年3月31日,记录患者生存情况,比较存活患者和死亡患者血浆ctDNA含量,采用受试者工作曲线(ROC)分析血浆ctDNA含量对结直肠癌患者术后3年生存情况的预测价值,并采用Kaplan-Meier法进行生存分析。[结果]78例患者血浆ctDNA含量为(85.37±9.31)ng/mL,不同性别、年龄、肿瘤部位、TNM分期、分化程度及淋巴结转移情况患者血浆ctDNA含量差异无统计学意义;随访至2019年3月31日,存活患者56例,死亡22例,存活组患者血浆ctDNA含量明显低于死亡组(P<0.05);当血浆ctDNA≥85.91 ng/mL时,AUC为0.788,灵敏度为76.80%,特异度为72.70%,95%CI为0.674~0.901;低表达组患者3年总生存率为83.72%,显著高于高表达者(57.14%)(P<0.05)。[结论]术前血浆ctDNA含量的检测对结直肠癌根治性切除术后3年生存率有一定的预测价值,ctDNA含量越高的患者3年总生存率越低。     

PTPN22基因启动子-1123G＞C多态性与温州地区桥本甲状腺炎的相关性研究

目的:了解温州地区汉族人群PTPN22基因启动子-1123G>C位点的基因型分布;探讨该基因单核苷酸多态性与桥本甲状腺炎的关系。方法:运用单一等位基因特异性引物-聚合酶链式反应技术(PCR-SASP)测定无亲缘关系的270例温州地区汉族人群的PTPN基因启动子-1123位点单核苷酸多态性(正常对照组120例,桥本甲状腺炎组150例)。结果:桥本甲状腺炎组PTPN22基因启动子-1123位点的GG、GC和CC基因型频率分别为0.207、0.627和0.167,基因G和C频率分别为0.520和0.480;正常对照组基因型表达频率分别为0.375、0.475和0.150,G和C基因频率分别为0.613和0.388;PTPN22基因启动子-1123位点多态性的分布频率在对照组和病例组间差别有统计学意义(χ2=9.57,P<0.05),且C基因频率在病例组中显著高于对照组(χ2=4.633,P<0.05)。结论:PTPN基因启动子-1123G>C SNP与温州地区汉族人群桥本甲状腺炎的发生有相关性,-1123 C基因是HT的易感基因。     

CTLA-4、PTPN22基因多态性与温州地区汉族人桥本甲状腺炎的相关性

目的:探讨CTLA-4外显子1+49A＞G位点(rs231775)、PTPN22启动子-1123G＞C位点(rs2488457)基因多态性与温州地区汉族人群桥本甲状腺炎(HT)的相关性.方法:采用病例-对照的方法,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性( PCR-RFLP)及单一等位基因特异性引物-聚合酶链式反应技术(PCR-SASP)比较150例桥本甲状腺炎组与120例正常人对照组之间基因型、等位基因频率的差异.结果:HT组和对照组CTLA-4外显子1+49位点和PTPN22基因启动子-1123位点的基因型和等位基因频率的差异均有统计学意义.经等位基因频率的相对风险分析发现,CTLA-4外显子1+49位点G等位基因携带者患HT的风险是A等位基因的1.616倍(OR=1.616,95％CI:1.142～2.285),PTPN22启动子-1123位点C等位基因携带者患HT的风险是G等位基因的1.459倍(0R=1.459,95％CI:1.034 - 2.059).结论:CTLA-4外显子1+49A＞G、PTPN基因启动子-1123G＞C SNP与温州地区汉族人群HT的发生有相关性,CTLA-4外显子1+49G、PTPN22启动子-1123 C基因是HT的易感基因.     

TNFα-基因多态性与银屑病易感性研究

目的探讨TNF-α基因多态性与南方汉族人寻常型银屑病的相关性。方法采用PCR-RDB方法,检测南方汉族人Ⅰ型银屑病(60例)、Ⅱ型银屑病(40例)及正常对照(100例)TNF-ɑ多态性。结果南方汉族人Ⅰ型银屑病患者携带TNFα-238G/A基因型频率较健康组明显增高(OR=2.56,P<0.05);而Ⅱ型银屑病患者携带该基因型频率则与正常对照组差异无统计学意义(OR=0.83,P>0.05)。且南方汉族人Ⅰ型、Ⅱ型银屑病携带TNFɑ-308基因型频率与正常对照组差异无统计学意义(OR<1,P>0.05)。结论 TNFɑ-238基因的多态性与南方汉族人Ⅰ型银屑病相关,可能是易感因子之一,TNFα-308基因的多态性在银屑病发病中不起主要作用。     

腹腔镜胆囊部分切除术37例临床分析

目的:探讨腹腔镜胆囊部分切除术在治疗复杂胆囊结石的临床效果。方法:回顾性分析行腹腔镜胆囊部分切除治疗37例复杂胆囊结石患者的临床资料。结果:36例患者顺利完成手术,1例患者因术中出血止血困难,镜下视野不清改行开腹胆囊部分切除术。手术时间平均80 min,术后并发胆漏2例,经保守治疗治愈。结论:在复杂胆囊结石患者行腹腔镜手术中,腹腔镜胆囊部分切除可简化手术,在取得良好疗效的同时可有效避免或降低医源性胆道损伤的发生。     

瘦素受体基因Gln223Arg变异与浙南地区2型糖尿病的相关性研究

目的 研究瘦素受体Gln223Arg基因多态性与2型糖尿病(T2DM)的关系.方法 运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定无亲缘关系的336例浙南地区汉人的瘦素受体基因Gln223Arg的基因型(其中T2DM合并肥胖组121例,T2DM非肥胖组104例,正常对照组111例),并分析Gln223Arg基因多态性与糖尿病的关系.结果 ① T2DM肥胖组Gln223Arg基因型GG、GA及AA的频率分别为0.645、0.347和0.008;G和A等位基因频率分别为0.818和0.182;T2DM非肥胖组基因型GG和GA的频率分别为0.769、0.231;G和A等位基因频率分别为0.885和0.115;正常对照组基因型GG、GA及AA的频率分别为0.802、0.189和0.009;G和A等位基因频率分别为0.896和0.104.②T2DM合并肥胖组A、G等位基因分布频率与正常对照组比较差异有显著性(P＜0.05),非肥胖组与正常对照组比较无明显差异(P＞0.05).结论 浙南地区汉族人群存在瘦素受体基因Gln223Arg变异,它可能是该地区人群T2DM合并肥胖患者的遗传易感标记,A等位基因与T2DM发病有一定关系.     

藻蓝蛋白诱导喉癌HEP-2细胞凋亡的实验研究

目的:探讨藻蓝蛋白对人喉癌HEP-2细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法:不同浓度藻蓝蛋白处理HEP-2细胞,分别以MTT、倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞术检测藻蓝蛋白对HEP-2细胞活力及凋亡的影响;DCFH-DA标记的流式细胞术检测细胞内的活性氧水平;分光光度法检测细胞内caspase-3、-8、-9的活性;RT-PCR、Western blot检测细胞凋亡相关基因的表达。结果:MTT结果显示藻蓝蛋白能够抑制喉癌HEP-2的细胞活力,且呈时间和剂量依赖性;倒置显微镜、电镜、流式细胞术的一系列定性化和定量化实验证实藻蓝蛋白可显著诱导HEP-2细胞的凋亡;藻蓝蛋白处理后细胞内ROS水平升高,caspase-3、-8、-9被激活;RT-PCR结果表明,藻蓝蛋白作用后Bax、Fas、P53、caspase-3和caspase-9表达显著上调(P0.05),Bcl-2表达显著下调(P0.05);Western blot结果和RT-PCR结果一致。结论:藻蓝蛋白能够诱导HEP-2细胞的凋亡,其机制可能与细胞内ROS水平升高,上调Bax、Fas和P53 mRNA,下调Bcl-2 mRNA的表达,从而促进凋亡信号的转导最终导致细胞凋亡有关。     

瘢痕疙瘩p53基因检测试剂盒的临床应用

目的：在浙江地区对瘢痕疙瘩p53基因检测试剂盒进行临床实验，评价此试剂盒的准确度和有效性。方法：采用聚合酶链反应-反向点杂交方法建立的试剂盒检测了浙江地区75例瘢痕疙瘩患者与75例正常对照的p53基因第72位密码子多态性位点的基因型。结果：瘢痕疙瘩组的Pro等位基因及Pro／Pro基因型频率明显高于对照组（P值分别为0．014、0．015），Pro／Pro基因型者惠瘢痕疙瘩的风险性明显增高（OR=2．404，95％CI：1．182～4.887）。结论：p53基因检测试剂盒可以预测瘢痕疙瘩高危个体，对于临床诊断和治疗方面也有一定的指导意义，并具有良好的可重复性和特异性。     

TGF-β1基因-509C/T单核苷酸多态性与病理性瘢痕易感性研究

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)基因一509C/T多态性与中国汉族人群病理性瘢痕的相关关系.方法:采用聚合酶链反应一反向点杂交、DNA直接测序方法检测了155例病理性瘢痕患者与120名正常对照的TGF-β1.基因-509C/T多态性位点的基因型.结果:病理性瘢痕患者的C等位基因频率明显高于正常对照组(X2=4.676,P=0.031).病理性瘢痕患者的C/T、T/T基因型频率与正常对照组相比差异无统计学意义(x2值分别为0.763和1.376;P值分别为0.382和0.241),而病理性瘢痕患者的c/c基因型频率明显高于对照组(X2=5.493,P=O.019).提示c/c基因型者患病理性瘢痕的风险性明显高于C/T,T/T基因型者(OR=2.041,95%CI:1.116～3.73).结论:TGF-β1基因-509位点C等位基因及C/C基因型可能是病理性瘢痕的易感因素.