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兔眼与猪眼视网膜色素上皮细胞分离及培养方法的对比 总被引:2,自引:0,他引:2
目的分别对兔眼及猪眼视网膜色素上皮(RPE)细胞进行体外分离、培养和鉴定,探讨二者的异同点及注意事项。方法对有色兔眼和猪眼的RPE细胞采用胰蛋白酶消化法进行分离、培养和传代,取第4代细胞用于实验。免疫细胞化学染色对传代的细胞进行鉴定。光学显微镜下观察并比较培养的2种动物来源RPE细胞的形态、特征,并对2种动物来源的RPE细胞的培养过程进行比较。结果2种动物来源的RPE细胞分离方法的不同与各自眼球的解剖结构相关,主要体现在消化过程,猪眼RPE细胞1次消化即可分离,兔眼RPE细胞需2次消化得到。原代猪眼RPE细胞24h内贴壁较兔眼48~72h贴壁时间早。培养早期细胞生长活跃,随传代次数增加活力下降,色素颗粒减少。免疫细胞化学染色提示细胞角蛋白(AE1/AE3)表达阳性。结论2种动物来源的RPE细胞均可通过胰蛋白酶消化法分离,获得的RPE细胞数量多,培养成功率高。猪眼RPE细胞的分离培养更为容易。4代以内的RPE细胞适合于实验研究。 相似文献
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目的探讨不同手术方法治疗继发性黄斑前膜的临床效果。
方法回顾性分析2014年1月至2017年1月于河北省保定市第一中心医院眼科进行继发性黄斑前膜手术患者76例(76只眼)的临床资料。根据治疗方法的不同,将全部患者分为非联合组和联合组,非联合组为A组,联合组为B组。A组患者38例(38只眼)行睫状体平坦部三切口玻璃体切除联合黄斑前膜剥除及内界膜剥除术,B组患者38例(38只眼)行睫状体平坦部三切口玻璃体切除联合黄斑前膜剥除及内界膜剥除术,且于玻璃体腔内注射曲安奈德。对全部患者手术前后的最佳矫正视力(BCVA)、黄斑形态及手术并发症等进行随访及观察。手术前后患者的BCVA采用中位数(最小值-最大值)进行描述,手术前后视力的比较采用配对Mann-Whitney U检验,视力改善程度的描述采用眼数和百分比,组间比较采用Kruskal-Wallis H秩和检验。手术前后患者黄斑中心神经上皮层厚度(CMT)采用均数±标准差(
±s)进行描述,手术前后的组内比较和组间比较均采用配对t检验。
结果全部患者均接受随访,随访时间3~12个月,平均(6.3±2.4)个月。A组患者术后BCVA提高者25例(25只眼),视力不变者11例(11只眼),视力下降者2例(2只眼)。术后BCVA与术前相比,差异有统计学意义(u=4.251,P<0.05)。B组患者术后BCVA提高者28例(28只眼),视力不变者7例(7只眼),视力下降者3例(3只眼)。术后BCVA与术前相比,差异有统计学意义(u=3.71,P<0.05)。将两组患者术后视力的改善程度进行组间比较,差异无统计学意义(u=0.67,P>0.05)。A组患者术前CMT平均厚度为(336.87±123.18)μm,术后为(295.17±90.23)μm。手术前后患者的CMT差异有统计学意义(t=5.43,P<0.05)。B组患者术前CMT平均厚度为(321.18±132.12)μm,术后为(245.15 ±79.64)μm。手术前后患者的CMT差异有统计学意义(t=4.89,P<0.05)。术后两组间行独立样本t检验,差异有统计学意义(t=-2.51,P<0.05),这一结果表明,B组患者术后CMT厚度的改善较A组快。A组患者术后周边牵引性小裂孔3例(3只眼),经激光治疗后恢复1例(1只眼),再次手术2例(2只眼)。B组患者术后周边牵引性小裂孔2例(2只眼),均采用激光进行治疗。随访期间,A组患者有4例(4只眼)复发前膜。
结论两种手术方式均可以有效治疗继发性黄斑前膜。其中,B组的手术方式能够更快地改善CMT,减少黄斑前膜的复发。 相似文献
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目的研究bevacizumab(avastin)对猪视网膜色素上皮(RPE)细胞的毒性作用,进一步探讨该药物的安全剂量。方法 30只猪眼RPE细胞培养于含质量分数20%胎牛血清的DMEM培养基中,透射电镜下观察细胞内含大量色素,免疫荧光检测抗角蛋白抗原阳性。实验分为对照组(0g/L bevacizumab)和实验组(0.125、0.25、0.5、1.0、1.25、2.0、2.5g/L bevacizumab)。MTT比色法测定不同终质量浓度(0、0.125、0.25、0.5、1.0、1.25、2.0、2.5g/L)bevacizumab对RPE细胞增生的影响;流式细胞术检测bevacizumab作用72h后细胞凋亡和细胞周期的变化,倒置相差显微镜和透射电子显微镜下观察细胞形态和超微结构的改变。结果 2.0~2.5g/L bevacizumab作用72h后,与对照组比较RPE细胞的生长均有明显抑制(t=1.300,P=0.000;t=1.300,P=0.000),且呈质量浓度依赖性;实验组S期细胞较对照组减少,细胞凋亡率与对照组比较差异无统计学意义(χ2=1.870,P=0.240)。光学显微镜下,2.0g/L bevacizumab组细胞形态无明显变化。透射电子显微镜下,2.0g/L bevacizumab组细胞微绒毛减少,细胞质内出现空泡和髓鞘样变性。结论大剂量bevacizumab可抑制猪眼RPE细胞的有丝分裂,抑制细胞增生,明显破坏细胞的超微结构。 相似文献
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目的 检测视黄醇结合蛋白4(RBP4)及中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)在2型糖尿病视网膜病变(DR)的表达水平,探讨RBP4、NLR与DR的相关性。方法 选取163例患者作为研究对象,其中单纯2型糖尿病(T2DM)组41例,非增生性2型糖尿病视网膜病变(NPDR)组40例,增生性2型糖尿病视网膜病变(PDR)组42例,40例正常体检人作为对照组(NC)。空腹10 h后检测所有受试者静脉血糖、三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、尿酸、同型半胱氨酸、空腹胰岛素、中性粒细胞与淋巴细胞,计算NLR。稳态模型评估胰岛素抵抗指数。酶联免疫吸附法测定血清RBP4。采用方差分析、相关分析及Logistic逐步回归进行统计学分析。结果 与NC组比较,T2DM组、NPDR组、PDR组RBP4、NLR显著升高,与NPDR组比较RDR组RBP4显著升高(P均<0.05)。RBP4与收缩压、舒张压、空腹血糖、胰岛素抵抗指数、三酰甘油、胆固醇、同型半胱氨酸、NLR呈正相关,与高密度脂蛋白呈负相关(P <0.05)。Logistic回归分析发现收缩压、空腹血糖、RBP4、NLR、胰岛素抵抗、胆固醇为DR的危险因素。结论 RBP4与NLR在DR患者表达水平增高,且NLR可影响DR患者血清RBP4表达,RBP4与NLR是DR的危险因素,与DR相关。
相似文献9.
目的:观察内界膜剥除(internal limiting membrane peeling,ILMP)和玻璃体腔注射曲安奈德联合硅油填充治疗高度近视黄斑裂孔性视网膜脱离合并脉络膜脱离的临床疗效.方法:高度近视黄斑裂孔性视网膜脱离合并脉络膜脱离患者28例28眼,均行玻璃体切割(pars plana vitrectomy,PPV)吲哚菁绿辅助的ILMP以及硅油填充手术,术中将曲安奈德注射于玻璃体腔,术后随访6~24mo,观察术后视网膜复位率、视力恢复情况和术后并发症.结果:术后随访6~24mo,患者手术后平均LogMAR矫正视力为1.01± 0.31,与手术前平均LogMAR矫正视力比较,差异有统计学意义(t=-39.28,P<0.01).黄斑裂孔闭合19眼(68%),黄斑裂孔未闭合9眼(32%),26眼视网膜复位(93%),6眼出现高眼压.结论:玻璃体切割联合ILMP及硅油填充和玻璃体腔注射曲安奈德治疗高度近视黄斑裂孔性视网膜脱离合并脉络膜脱离,可阻止增生性玻璃体视网膜病变的再生,提高视网膜复位率. 相似文献
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目的 观察内界膜剥除联合玻璃体内注射曲安奈德治疗继发性黄斑前膜的疗效.方法 回顾性分析我院2011年6月至2015年6月因继发性黄斑前膜需行玻璃体视网膜手术者42例42眼,所有患者均行标准的23 G经睫状体平坦部的三通道玻璃体切割+黄斑前膜剥除+视网膜内界膜剥除+玻璃体内注射曲安奈德术,术后随访3.0~18.0(8.3±2.4)个月,对手术前后最佳矫正视力、黄斑形态及手术并发症等进行观察.结果 随访期末,最佳矫正视力提高者30眼,不变者8眼,下降者4眼;术后最佳矫正视力与术前相比,差异有统计学意义(t=3.145,P=0.000).黄斑中心神经上皮层厚度术前为(315.62±132.12)μm,术后为(233.42±146.32) μm,手术前后相比差异有统计学意义(t=4.322,P=0.000).术后视网膜少许出血6眼,玻璃体积血1眼,一过性高眼压6眼;3眼周边牵引性小裂孔,激光治疗后,行玻璃体内C3F8填充,视网膜在位.结论 玻璃体内注射曲安奈德可以加速黄斑水肿消退,降低黄斑前膜复发,促进视功能恢复.视网膜内界膜剥除在继发性黄斑前膜手术中可以松解黄斑区视网膜皱褶,解除对黄斑中心凹的牵引,改善黄斑区局部的代谢,有利于黄斑功能的恢复. 相似文献