葫芦素B靶向CIP2A介导的C-KIT信号抑制t(8;21)急性髓系白血病细胞增殖并诱导其凋亡

目的:本文旨在探讨中药活性成分葫芦素B(cucurbitacin B,CuB)抑制急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的作用及机制.方法:Western blot、QPCR检测蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphata...     

乙氧基血根碱通过激活AMPK信号通路诱导自噬抑制三阴性乳腺癌增殖的作用机制研究

目的:探讨乙氧基血根碱(ethoxysanguinarine,Eth)能否通过AMPK信号通路诱导自噬抑制三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)的增殖.方法:通过MTT法、台盼蓝拒染法及集落形成实验检测Eth对2种不同TNBC细胞系(MDA-MB-231和MDA-MB-43...     

重楼皂苷Ⅰ激活Hippo信号诱导结直肠癌细胞凋亡及自噬的作用机制

目的 研究重楼皂苷Ⅰ（PPI）抑制结直肠癌细胞生长的作用及其分子机制。方法 培养RKO细胞，分为空白组和浓度为0.6、0.8、1.0 μmol·L^-1的PPI组，培养HRT18细胞，分为空白组，浓度为1.2、1.4、1.6 μmol·L^-1的PPI组，细胞增殖抑制实验、平板克隆形成实验及共聚焦高内涵细胞成像分析系统检测PPI对结直肠癌增殖及形态的影响；流式细胞术检测结直肠癌细胞凋亡率；pQCXIP-GFP-LC3质粒转染实验检测PPI处理后，结直肠癌细胞自噬体的形成情况；蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白胱天蛋白酶（Caspase）-3、Caspase-8和多腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）的表达、自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）的表达及Hippo信号通路蛋白大肿瘤抑制激酶1（LATS1）、Yes相关蛋白（YAP）的表达及磷酸化水平；plvx-Flag-YAP质粒转染实验，过表达YAP后，用PPI处理，细胞增殖毒性实验检测结直肠癌细胞增殖，蛋白免疫印迹法检测结直肠癌细胞LC3Ⅱ、PARP的表达；对SwissADME预测PPI的药代动力学参数。结果 与空白组比较，PPI组的结直肠癌细胞的存活率及克隆形成能力显著降低（P<0.01），并且PPI组的结直肠癌细胞的细胞面积显著降低，圆度显著升高（P<0.01）；与空白组比较，PPI组的结直肠癌细胞凋亡率显著增加（P<0.01），并且PPI组的结直肠癌细胞中凋亡蛋白Caspase-3及Caspase-8蛋白前体的表达降低，PARP切割显著增加（P<0.01）；与空白组比较，PPI组的结直肠癌细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达水平明显增加，并且促进自噬体的形成（P<0.01）；与空白组比较，PPI组的结直肠癌细胞中YAP蛋白的表达明显降低，并且磷酸化LATS1、YAP的表达显著升高（P<0.01）；与空白组比较，过表达YAP能显著拮抗PPI对结直肠癌细胞的凋亡自噬活化作用及增殖抑制作用（P<0.01）；SwissADME模拟结果显示PPI具有较好的类药活性。结论 PPI能通过靶向激活Hippo信号通路诱导结直肠癌细胞发生凋亡和自噬，进而抑制其增殖。