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目的 观察脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸激酶B(TrkB)在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中的作用及其机制.方法 将20只Wistar雄性大鼠称重后按完全随机方法分成两组,避水应激组(WAS组)和假避水应激组(SWAS组),每组10只.记录两组在慢性避水应激模型造模期间粪便粒数;酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时定量PCR、Western印迹和免疫组化法检测BDNF和TrkB在大鼠血清及结肠肌层的表达.分别用河豚毒素(TTX)、BDNF和TrkB抑制剂K252a、BDNF孵育各组近端结肠肌条,记录近端结肠环形肌条肌张力的变化.结果 WAS组大鼠造模期间粪便粒数明显多于SWAS组(P＜0.05).WAS组大鼠血清BNDF水平高于SWAS组[(158.30±9.82)比(84.68 ±7.80) pg/ml]、结肠肌层TrkB蛋白表达水平高于SWAS组(0.44±0.03比0.30±0.02)(均P＜0.05),而肌层BDNF mRNA表达两组差异无统计学意义(P＞0.05).TrkB主要在肌层神经元的细胞核表达,且WAS组表达明显强.WAS组近端结肠环形肌条收缩幅度明显高于SWAS组[(0.35±0.02)比(0.22±0.03)g,P＜0.05];加入TTX阻断肠神经作用后,WAS组环形肌条收缩幅度仍大于SWAS组[(0.89±0.07)比(0.53 ±0.06)g,P＜0.05];用BDNF孵育肌条,记录不同时间点的标准化率(R值),其中孵育6、12 min时两组肌条R值差异有统计学意义(均P＜0.05),BDNF能诱导收缩波峰;用K252a孵育环形肌条30 min后加入BDNF,导致BDNF引起的峰值延后且降低.结论 BDNF通过作用于TrkB受体在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中发挥一定的调节作用. 相似文献
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