小干扰RNA抑制MDM2对HepG2细胞的影响及机制

目的探讨小干扰RNA对HepG2细胞泛素蛋白链接酶(MDM2)基因表达的干扰效应和增殖影响的分子机制。方法建立装载靶向MDM2基因小干扰RNA(siRNA)的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染HepG2细胞株,以转染阴性对照质粒组作对照;采用RT-PCR检测MDM2,p53,Bcl2和p21基因的表达;MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,划痕实验检测细胞迁移能力的改变。结果转染siRNA MDM2后的HepG2细胞MDM2和Bcl2基因表达明显减低,而p53和p21基因表达被明显增强,与空白组比差异具有显著性。siRNA MDM2明显抑制了HepG2的增殖并诱导其凋亡,同时使细胞迁移能力明显下降。但转染阴性对照质粒组未出现基因的表达变化和增殖抑制及凋亡。结论 siRNA MDM2可明显抑制HepG2增殖诱导其凋亡,并减弱肿瘤细胞迁移力。可能与抑制MDM2,增强p53表达,从而影响细胞周期和凋亡相关的基因表达变化有关。     

复方聚乙二醇电解质散用于肠道清洁准备的效果观察

目的:观察复方聚乙二醇电解质散用于肠道清洁准备的效果。方法:178例拟进行肠道清洁准备的患者,随机分成试验组(使用复方聚乙二醇电解质散)与对照组(使用甘露醇),比较2组肠道清洁度、不良反应和依从性。结果:试验组与对照组的肠道清洁度有效率分别为100.0%、94.2%(P>0.0.05),不良反应发生率分别为8.7%、27.9%(P<0.05),完全依从率分别为96.7%、80.2%(P<0.05)。结论:复方聚乙二醇电解质散用于肠道清洁准备效果好,不良反应少,患者依从性高,适合临床推广应用。     

利用siRNA沉默VEGF对膀胱癌生长的影响

目的研究VEGF特异性RNA干扰对膀胱癌细胞体内外增殖的影响。方法针对VEGF构建siRNA真核表达载体Psilencer^TM -VEGF-siRNA，并转染至膀胱癌细胞T24。RT-PCR观察VEGF的基因沉默效果；MTT比色分析检测细胞体外增殖能力；流式细胞计数检测细胞的凋亡。同时，通过裸鼠移植瘤模型观察VEGF基因沉默效果及对膀胱癌体内治疗的效果。结果转染siVEGF后膀胱癌细胞的VEG基因的表达显著被抑制（最高抑制率达79％）。与对照组比较，转染siVEGF组T24细胞的增殖活性明显低于转染阴性对照质粒组和空白对照组（P〈0．01）；流式细胞计数结果显示细胞发生凋亡。裸鼠体内致瘤实验显示，转染siVEGF组T24细胞在裸鼠体内增殖显著降低，肿瘤生长减慢。结论siVEGF能够有效的抑制膀胱癌中VEGF的表达，从而有效抑制膀胱癌细胞的生长。     

腹壁子宫内膜异位症相关性透明细胞癌一例及文献回顾

目的探讨剖宫产术后腹壁子宫内膜异位症（AWE）相关性透明细胞癌（CCC）的临床特点、治疗方法和预防措施。 方法搜集近10年AWE后恶性病变的相关资料结合1例相关患者的诊疗过程,对资料进行系统回顾分析。 结果共检索出410篇文献,最终25篇（其中英文20篇,中文5篇）文献符合纳入标准,纳入31例剖宫产后AWE发生CCC患者。其中12例行单纯肿瘤切除,17例同时行肿瘤切除和附加手术,2例未行手术治疗。接受化疗的患者为21例,放疗者6例,同时接受放化疗者5例。2例接受了术前新辅助化疗。12例患者出现肿瘤的扩散或转移。23例有随访信息,随访期间死于疾病者4例,带病存活者8例,无疾病迹象者11例。本文报道1例AWE后发生CCC的患者,行病灶及部分腹壁切除后使用补片进行腹壁重建治疗,术后恢复良好。 结论AWE后发生CCC恶变的情况近几年有增加的趋势。目前对此类恶变过程缺乏有效的预防与观察手段,对AWE者应早期行病变切除手术。对发生恶变者,应行包括病灶在内的腹壁整块切除手术,形成的缺损可行包括应用补片的腹壁重建手术治疗。     

siRNA抑制人肝癌细胞MDM2表达及细胞增殖的研究

目的探讨siRNA对人肝癌HepG2细胞MDM2基因表达的抑制作用及对增殖的影响。方法体外合成针对MDM2基因的siRNA质粒,转染HepG2细胞株;应用RT-PCR和western blot方法检测siRNA对MDM2和P53基因和蛋白表达的影响,并用MTT法检测siRNA对细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期。结果和空白组比转染siMDM2-1,2的HepG2细胞的MDM2基因和蛋白表达减低,而P53基因和蛋白表达增加。阴性对照质粒组的基因表达未见明显改变。转染siRNA MDM2后细胞生长受到抑制,转染siMDM2-1,2和阴性对照质粒后的抑制率分别是46.3%、56.1%和3%。和对照组比较,转染siMDM2-1,2的hepG2细胞的细胞周期发生明显改变,而转染对照质粒的hepG细胞周期未发生明显变化。结论 siRNA MDM2可以有效抑制HepG2细胞株中MDM2的表达,促进P53的表达,同时可以使细胞周期发生变化,这可能是其抑制肿瘤细胞增殖的主要机制之一。     

siRNA抑制人前列腺癌PC-3细胞株VEGF的表达及细胞增殖

目的:研究小干扰RNA(siRNA)对PC-3人前列腺癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的抑制作用及抑制癌细胞增殖和诱导凋亡的作用。方法:体外合成特异性靶向人VEGF基因的siRNA，并转染到PC-3细胞中;RT-PCR和Western blotting检测siVEGF对VEGF基因和蛋白表达的抑制作用;MTT法检测siVEGF对癌细胞增殖抑制作用，流式细胞术检测siVEGF诱导细胞凋亡的作用。结果:转染siVEGF1和siVEGF2组VEGF mRNA 表达水平与空白对照组比较分别下调了60.32%和70.73%；VEGF蛋白表达水平与空白对照组比较明显受到抑制，最高抑制率达72％；转染阴性对照质粒组VEGF基因和蛋白表达水平都无明显改变。转染siVEGF1和siVEGF2的细胞增殖受到抑制，增殖抑制率分别为49.5%和55.3 %，细胞的凋亡率分别为33.9%和42.0%。结论:构建的siRNA VEGF能特异有效下调VEGF基因的表达,瞬时转染siRNA VEGF能有效抑制人前列腺癌细胞PC-3增殖并诱导其凋亡。     

转染和干扰Runx2基因对K7M2细胞的影响

 目的探讨干扰和转染Runx2基因后对K7M2骨肉瘤细胞体外生物学活性的影响。方法分别将阴性对照质粒、携带Runx2和siRNA Runx2的质粒转染到K7M2细胞中。应用Western blot检测转染和干扰Runx2基因对其蛋白表达的影响,并检测细胞体外的增殖能力(MTT )、侵袭性、迁移性和黏附性的变化,并应用流式细胞仪（FCM）检测相应细胞的凋亡率和细胞周期分布的变化。结果与空白对照组比,转染Runx2和siRunx2组的K7M2细胞中Runx2蛋白表达分别明显增强和减弱,而阴性对照质粒组没有明显改变。转染siRunx2组的细胞,MTT结果显示增殖能力明显下降,迁移性、侵袭性和增殖指数（PI）也明显下降,与空白对照组比差异有统计学意义（P<0.05）,黏附性和凋亡率却没有明显变化。转染Runx2组K7M2的细胞增殖能力、迁移性、侵袭性和PI明显增高,与空白对照组比差异有统计学意义（P<0.05）,黏附性和凋亡率没有明显变化。阴性对照组和空白对照组比上述指标没有明显改变。结论Runx2可以促进K7M2细胞增殖,增强细胞的侵袭、迁移能力,其机制可能是和改变细胞周期的分布,使细胞更快的进入G₂/M期有关。     

老年男性乳腺癌的诊断和治疗（附13例报告）

男性乳腺癌(male breast cancer)临床上较为少见,与女性乳腺癌之比为1∶ 100,其发生率在整个乳腺癌0.5%～1.5%[1].男性乳腺癌发病年龄较晚,尚未引起足够重视,发现时往往出现淋巴结转移.我院自1996年1月至2009年1月共收治男性乳腺癌13例. 1 资料与方法 1.1 一般资料 13例男性乳腺癌患者,年龄55岁～80岁,中位年龄66岁,自出现症状到首次就诊的时间间隔为8～36个月,平均为(16.8±2.3)个月.患者以"乳房肿物"为主诉者10例,以"血性乳头溢液"为主诉者2例,以"腋下肿物"为主诉者1例.病程中伴乳房疼痛者8例,伴乳头瘙痒者3例.肿块位于乳晕区者9例,左侧乳腺者5例,右侧乳腺者9例,1例为双侧乳腺癌.     

轻量聚丙烯补片与自固定补片在Lichtenstein疝修补术的研究

目的对比研究轻量大网孔聚丙烯补片与自固定补片在Lichtenstein疝修补术中的应用。 方法选择2021年1-3月在吉林大学第二医院60例单侧男性腹股沟疝患者行前瞻性随机对照研究,随机分为轻量大网孔聚丙烯补片组和自固定补片组各30例,分别应用轻量大网孔聚丙烯补片和自固定补片进行Lichtenstein疝修补术;对比2组一般资料、手术相关指标、术后平均住院时间、血清肿、补片感染、术后疼痛、复发、异物感以及治疗费用等相关情况进而评价两种补片的治疗效果。 结果2组患者一般资料、手术麻醉方式、术后住院时间比较差异无统计学意义（P>0.05）,2组的平均手术时间和治疗费用差异有统计学意义（P<0.05）;术后血清肿、术后短期（7 d及1个月）疼痛和慢性疼痛、补片感染、局部不适或异物感、复发等并发症差异均无统计学意义。 结论自固定补片可明显缩短手术时间,但医疗费用明显高于轻量大网孔聚丙烯补片,在术后复发和慢性疼痛等并发症方面差异不显著。