抗人α干扰素单克隆抗体SC_8的应用

本文研究证实McAb SC(?)可用于人rIFN-al和rIFN-aA的纯化和测定。用于纯化可使活性回收大于100%,一步可纯化143～3,000倍。用间接ELISA检测这两种rIFN-a,其敏感性可到微克以下。如用rIFN-al抗原来检测McAb SC(?)可达毫微克水平,比中和法敏感。但McAbSC(?)单独用于亲和层析纯化两种自然IFN-a不合适,回收较低。     

ABC—ELISA方法检测细胞膜表面IgG Fc段受体

为开辟更具实用价值的Fc受体研究的新途径,在ELISA方法基础上引入ABC技术,检测Namalwa细胞表面IgG Fc段受体。用生物素直接标记酰基,与胞膜相应受体结合后再联结ABC 复合物,敏感性大大提高,P/N达4以上,D—N值达0.8左右。     

纯化Namalwa细胞干扰素及其对DNA成份的清除能力

采用 TCA (三氯醋酸)——冷酒精部分纯化 Namalwa 细胞干扰素,再经 Blue Sepha-rose CL-6B 或 Bluc Dextran Sepharose 4B 柱层析,可将干扰素比活性提高到10~7～10~8IU/mg蛋白,用葡聚糖凝胶 Bio-gel P_(200)和 SDS-PAGE 测得干扰素分子量分别为19,050和18,500。用 DABA-微量荧光法检测了粗制和纯化过程中干扰素制剂中的核酸水平,结果表明 Blue Sepharo-se CL-6B 柱层析可基本廓清最终产物中的 DNA,噬菌体 T_4 DNA 追踪表明,大部分 DNA 在层析中被洗去。     

重组人γ-干扰素单克隆抗体的制备与纯化研究

本文报道重组人γ-干扰素单克隆抗体的制备与纯化研究。用常规法将分泌重组人γ-干扰素(γHu2FN-γ)单克隆抗体(McAb)细胞株(A_3和B_3E_7)接种组织相容性的动物体内,诱生有活性的IFN-γ-McAb,其中一株A_3杂交瘤分泌抗Hu2FN-γ-McAb的性能非常稳定。它比B_3E_7杂交瘤分泌的McAb效价高5～10倍。为提供较高纯度的A_3、B_3E_7 McAb制品、本     

SPA协同凝集反应快速检定痢疾杆菌的实验研究

1940年Verwey首先发现葡萄球菌A蛋白(Staphlococcal Protein A、简称SPA),以后经许多学者相继研究,证明它能与免疫球蛋白Ig~G FC段结合,结合后的IgG的Fab段仍能与特异性抗原结合,形成凝集,即协同凝集反应(Coaggulutination reaction,简称COA)目前已广泛用于很多微生物的鉴定和诊断。但作为快速     

重组人γ-干扰素单克隆抗体杂交瘤细胞建株研究

本文报道重组人γ-干扰素单克隆抗体杂交瘤细胞株建立的方法及结果。为获得供融合用的小鼠脾细胞,用两种不同的方案免疫了两组(每组3只)BALB/c小鼠。血清抗体效价最高的第4号小鼠,于加强免疫4天后取脾,制成脾细胞悬液。按照常规方法与小鼠骨髓瘤SP 2/0·Ag 14细胞融合。采用直接中和试验法筛选融合细胞孔的上清液,从中选出两株(A3和B3)分泌抗重组人γ-干扰素的杂交瘤细胞。交叉中和试验显示,A_3和B_3抗体只中和重组或自然的人γ-干扰素;与α-干扰素或β-干扰素无反应。此两株单克隆抗体的效价分别超过128,000和25,600。双扩散试验证明,A_3和B_3均为小鼠IgG_1型抗体;液氮中保存半年以上,仍保持原有的各种特性。     

抗重组人γ干扰素单克隆抗体的纯化研究

取本实验室制备的抗重组人γ干扰素单克隆抗体(rHu IFN-γ/McAb)A_3和B_3E_7粗制品(BALB/c小鼠腹腔分泌液),分别用饱和硫酸铵盐析法和葡萄球菌A蛋白(SPA)亲和层析法进行纯化。结果发现,虽两者都能部分纯化A_3和B_3E_7-McAb,但后者(SPA亲和层析法)的纯化效果比前者(硫酸铵盐析法)好。纯化后的产品经冷冻干燥后置低温贮存,其活性(抗体滴度)不受影响.     

重组人γ-干扰素单克隆抗体杂交瘤细胞建株的研究

本文报道重组人γ-干扰素单克隆抗体杂交瘤细胞株建立的方法及其结果。为获得融合用的小鼠脾脏细胞。用两种不同的免疫方案免疫了A、B两组(每组3只)BALB/c小鼠。血清抗体效价最高的第四号小鼠,于加强免疫四天后取脾,制成脾细胞悬液,按照常规方法与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合。采用直接中和试验法筛选融合细胞孔内的上清液,从中选出两株(A_3和B_3)分泌抗人重组干扰素-γ的杂交瘤细胞。交叉中和试验显示,A_3和B_3抗体只中和重组的和自然的人γ-干扰素;不与α-干扰素和β-干扰素反应。以两株单克隆抗体的效价分别可达到128000和25600。双扩试验证明,A_3和B_3均为小鼠IgG_1型抗体,液氮中保存半年后,仍具有原来的各种特性,